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地龙含杂的一个纠正措施
地龙为钜蚓科动物参环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓或栉盲环毛蚓的干燥体.前一种习称“广地龙”,后3种习称“沪地龙”.
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HPLC法测定沪地龙中次黄嘌呤
沪地龙是钜蚓科通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓P.guillelmi Michaelsen或栉盲环毛蚓P.pectinifera Michaelsen的干燥体.夏季捕捉,及时剖开腹部,除去内脏及泥砂,洗净,晒干或低温干燥.地龙具有清热定惊、通络、平喘、利尿的功能,用于高热神昏、惊痫抽搐、关节痹痛、肢体麻木、半身不遂、肺热喘咳、尿少水肿及高血压[1].地龙分为广地龙与沪地龙,过去主要使用广地龙,而近年来上海也养殖地龙,但对沪地龙的研究较少,据报道次黄嘌呤是地龙扩张支气管成分,从地龙中分离出的次黄嘌呤有抗组胺、降血压等作用[1].笔者曾经用紫外分光光度法测定沪地龙中次黄嘌呤[2],本实验在此基础上采用RP-HPLC法测定了上海地区沪地龙中的次黄嘌呤,方法简便可靠.
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提高沪地龙药材质量的加工方法研究
目的::研发一种高效的加工方法,以提高沪地龙药材质量.方法:自主研发机械化加工设备,并考察不同辅料(面粉、米糠、生石灰、木屑、草木灰)混合清洗,降低灰分含量的效果.结果:采用机械化加工设备加工的蚯蚓剖开率达95％以上.经过添加辅料清洗可以有效控制灰分含量,其中以草木灰或面粉为辅料清洗的药材灰分含量低.结论:本研究采用自主研发的设备结合有效辅料清洗,创立了一种高效去除沪地龙灰分的加工方法,为解决同类问题提供了参考.
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HPLC法测定各沪产地龙和广地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶和尿苷的含量
目的 测定各种沪产地龙与广地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量,建立地龙药材质量评价的方法.方法 用0.9％生理盐水超声提取地龙,SORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm,Aglient Co.,Ltd),流动相:5 mmol/L磷酸二氢钾(pH 2.9),流速1 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μL,采用HPLC法,同时测定次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷4种核苷类成分的含量.结果 次黄嘌呤的线性范围为0.500 0～100.00 μg (r=0.999 9),平均回收率99.37％,RSD=1.36％(n=6);黄嘌呤的线性范围为0.500 0～100.00 μg(r=0.993 1),平均回收率91.57％,RSD=1.40％(n=6);尿嘧啶的线性范围为0.500 0～100.00 μg (r=0.999 9),平均回收率95.31％,RSD=1.64％(n=6);尿苷的线性范围为0.500 0～100.00 μg(r=0.999 9),平均回收率100.21％,RSD=1.98％(n=6).结论 该方法重复性、回收率好,可用于测定地龙与广地龙中次黄嘌呤等4种核苷类成分的含量.
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福州地区药用地龙质量的商讨
药用地龙(Dilong Pheretima)为常用中药,中国2000年版药典规定其来源为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum(E.Perrier)、通俗毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛皮Pheretima guillelmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的干燥体.前一种习称"广地龙",后一种习称"沪地龙".广地龙春季至秋季捕捉,沪地龙夏季捕捉,及时剖开腹部,除去内脏及泥沙,洗净,晒干或低温烘干.地龙民间使用较多,常取其清热平肝,滋阴潜阳之功效,小孩多用.福州地区药用地龙也多为广地龙和沪地龙,本文将近在福州地区采集到不同规格的地龙从质量方面作一商讨,并提出建议.
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沪地龙抗凝血活性部位分离研究
目的 从沪地龙中分离纯化抗凝血活性部位.方法 以抗凝活性为筛选指标,以Sephadex G50、DEAE Cellulose-52、Sephadex LH-20等进行分离、纯化.结果 从沪地龙热提取液中分离得到3个活性部位.结论 地龙中存在多个不同活性的体外抗凝血活性部位.
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通俗环毛蚓的化学成分研究
目的:对中药通俗环毛蚓的化学成分进行分离鉴定.方法:乙醇、乙醚等溶剂提取物,用红外光谱仪和气相色谱-质谱联用方法以及氨基酸分析仪等技术鉴定化合物.结果:在通俗环毛蚓中测定有琥珀酸、18种脂肪酸和20种游离氨基酸.结论:通俗环毛蚓中的脂肪酸可能是其活性成分之一;另外其总游离氨基酸含量较高(含量为8.629%).
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3种动物类中药材中无机元素的分布规律研究
目的 研究哈蟆油、 沪地龙、 冬虫夏草中35种无机元素的分布规律,控制3种药材中有关元素含量,为保障其质量和安全提供依据.方法 采用微波消解法对样品进行前处理,电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)法对3种动物类中药材中铍、 钠、 镁、 铝、 钾、 钙、 钒、 铬、 锰、 铁、 钴、 镍、 铜、 锌、 砷、 硒、 钼、 钌、钯、 银、 镉、 锡、 锑、 碲、 钡、 钕、 镝、 铒、 铱、 铂、 汞、 铊、 铅、 钍、 铀35种无机元素进行测定和分析.结果 35种无机元素线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法重复性RSD均小于20%,回收率在74.9%~115.9%之间.研究结果显示3种动物类中药材中钠、 镁、 钾、 钙等有益元素含量丰富.有害元素方面,沪地龙中铅、 砷、 汞、 镉、 铜元素含量较高,冬虫夏草中铅、 砷、 汞、 铜元素含量较高,且均存在部分元素异常偏高的现象.结论 哈蟆油药材尚未发现重金属及有害元素富集的安全隐患,而沪地龙、 冬虫夏草均存在有害元素超标问题,有必要加以监管控制.
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地龙的HPLC特征图谱研究
目的：建立地龙的高效液相色谱（HPLC）特征图谱，比较广地龙与沪地龙的主要成分含量差异以及地龙与3种其他动物药的图谱差异。方法：采用地龙HPLC特征图谱法，测定了16份广地龙、8份沪地龙、3份土鳖虫、3份水蛭与3份蜣螂虫的特征图谱，采用相似度评价与t检验对这5种动物药的图谱数据进行差异分析。结果：本研究建立了地龙药材的HPLC特征图谱法，首次指认了11个共有特征峰，包括6个核苷、4个核碱基与1个氨基酸；建立的HPLC特征图谱法可以将地龙与土鳖虫、水蛭及蜣螂虫区分开来；首次对广地龙与沪地龙HPLC特征图谱中主要成分的含量差异进行了研究，其中广地龙中黄嘌呤及腺苷含量高于沪地龙，沪地龙中尿苷、鸟苷及2′-脱氧鸟苷含量高于广地龙，并据此计算出5种成分的峰面积比值新指标S，S值可用于区分2种地龙。结论：该特征图谱可用于地龙药材的鉴别，且可为广地龙与沪地龙的药效学差异研究提供参考。
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HPLC法测定沪地龙中7个核苷类成分的含量
目的:建立中药材沪地龙中7个核苷类成分的分析方法.方法:采用0.1％氨水超声提取沪地龙药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、2'-脱氧鸟苷,并应用反相高效液相色谱法测定其含量;色谱条件:采用Gemini C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以5mmol·L-1乙酸铵溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1,检测波长254 nm,柱温30℃.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷和2'-脱氧鸟苷的线性范围分别为0.51～102.09 μg· mL-1(r=1.000 0),0.52～103.78μg·mL-1(r=1.000 0),0.50～101.03μg·mL-1(r=1.000 0),0.52～104.79 μg·mL-1(r=1.000 0),0.50～99.99μg·mL-1(r=1.0000),0.55～110.54μg·mL-1(r=1.0000),0.50～99.28μg·mL-1(r=1.0000);平均回收率(n=6)分别为98.6％(RSD=2.6％)、104.6％(RSD=1.8％)、105.3％(RSD=1.4％)、96.2％(RSD=2.6％)、91.0％(RSD=0.42％)、88.1％(RSD=2.1％)和106.5％(RSD=2.1％).12批样品中上述7个核苷类成分的含量测定结果分别为0.046～0.864、0.263～0.770、0.034～0.631、0.379～0.994、1.655～3.595、0.544～1.465和0.074～0.208 mg· g-1.结论:该方法可用于沪地龙药材中核苷类成分的含量测定.
