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火木层孔菌液体培养物的化学成分研究
目的:研究针层孔属火木层孔菌Phellinus igniarius液体培养物的化学成分并对其在多种体外药理模型上进行随机活性筛选.方法:分别对发酵液及菌丝体的化学成分进行研究,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及反相HPLC柱色谱等分离方法进行分离纯化;运用光谱数据解析鉴定化合物结构;在细胞水平模型上,筛选化合物在肿瘤细胞毒、神经保护、肝保护、抗炎和抗HIV等方面的活性.结果:从发酵液和菌丝体2部分共分离鉴定了29个化合物,分别为3个倍半萜:3S,9R,10S-3-羟基-11,12-O-异丙基血苋烷烯(1),3S,9R,10S-3,11,12-三羟基血苋烷烯(2)和3S,4S,9R,10-11,12,14-三羟基血苋烷烯(3);3个甾体:24R-麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(4),豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇(5)和麦角甾5α,8α-过氧-6,22-二烯-3β-醇(6);14个环二肽:环(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(7),环(L-亮氨酸-D-脯氨酸)(8),环(L-亮氨酸-L-脯氨酸)(9),环(异亮氨酸-脯氨酸)(10),环(甘氨酸-亮氨酸)(11),环(苯丙氨酸-丝氨酸)(12),环(丙氨酸-脯氨酸)(13),环(丙氨酸-苯丙氨酸)(14),环(4-羟基-脯氨酸-苯丙氨酸)(15),环(L-苯丙氨酸-D-脯氨酸)(16),环(D-苯丙氨酸-D-脯氨酸)(17),环(6-羟基-脯氨酸-苯丙氨酸)(18),环(谷氨酸氨-脯氨酸)(19)和环(天冬氨酸-亮氨酸)(20);9个其他类化合物:乙酰氨基苯丙氨酸(21)、腺苷(22)、苯乙二醇(23)、邻-羟基苯乙醇(24)、苯甲酸(25)、对-甲氧基苯甲酸(26)、间-甲氧基苯甲酸(27)、十六烷酸(28)和3-吡啶羧酸(29).化合物5和8在1×10-5mol·L-1时能够有效地抑制MPP+诱导的PC12-syn细胞损伤,相对保护率分别为90.3%和87.5%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05).在1×10-5mol·L-1浓度下,化合物12和18可较好地保护DL-半乳糖胺诱导的WB-F344细胞损伤,细胞成活率分别为25%和24%(双环醇作为对照,细胞成活率为24%).结论:化合物1-29均为首次从针层孔属火木层孔菌液体培养物中分离鉴定;化合物5和S有神经细胞保护活性,化合物12和18具有肝细胞损伤保护活性,其他化合物在测试浓度下在以上筛选模型中未显示明确活性.
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硫酸二乙酯诱变对火木层孔菌生长特性及色素代谢物的影响
采用硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)诱变方法对火木层孔菌菌株进行诱变处理,研究了0.5％诱变浓度下DES诱变时间与火木层孔菌致死率的关系.对筛选的优势菌株菌丝生长速度、液体发酵菌丝体生物量、菌丝形态、色素类次级代谢产物分泌以及次级代谢产物抗氧化活性方面的差异进行研究.研究表明,硫酸二乙酯诱变可改变菌丝形态但对菌丝体生长并未产生明显影响,且硫酸二乙酯诱变筛选可改善药用火木层孔菌活性成分,提高对缺氧/糖PC12神经细胞的抗氧化活性.
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不同品种桑黄抗氧化和抗炎的药理作用比较
目的 评价桑黄的不同品种火木层孔菌和裂蹄木层孔菌的水提物和醇提物的抗氧化和抗炎作用.方法 采用亚铁还原能力(FRAP)和二苯基苦酰肼基(DPPH)自由基清除能力法观察火木层孔菌和裂蹄木层孔菌的的抗氧化作用;采用LPS诱导NO释放法观察火木层孔菌和裂蹄木层孔菌的抗炎作用.结果 火木层孔菌和裂蹄木层孔菌水提物的抗氧化能力分别为(374.06±2.29)μmol TEAC·g-1提取物和(355.40±2.18)μmol TEAC·g-1提取物;醇提物的抗氧化能力分别为(408.82±6.91)μmol TEAC·g-1提取物和(414.69±2.58)μmol TEAC·g-1提取物;火木层孔菌和裂蹄木层孔菌均具有明显的清除DPPH自由基的作用,其水提物的IC50分别为7.58 mg·mL-1和8.04 mg·mL-1;醇提物的IC50分别为5.32 mg·mL-1和5.15 mg·mL-1;火木层孔菌水提物和醇提物作用后,对NO释放量和细胞存活率具有明显的降低作用,其中100、50、25μg·mL-1剂量组与LPS组比较具有显著性差异(P<0.01或P<0.05);裂蹄木层孔菌水提物作用后,对NO释放量和细胞存活率具有明显的降低作用,其中水提物100、50、25、12.5μg·mL-1剂量组与LPS组比较具有显著性差异(P<0.01),醇提物对NO释放量具有明显的降低作用,对细胞存活率具有明显的升高作用,其中25、12.5μg·mL-1剂量组与LPS组比较具有显著性差异(P<0.01).结论 桑黄的不同品种火木层孔菌和裂蹄木层孔菌的水提物和醇提物均具有抗氧化和抗炎作用.
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火木层孔菌桑黄对MPP+诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响
目的 评价火木层孔菌桑黄的水提物对MPP诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法 采用PI染色分析细胞凋亡率,DAPI染色观察细胞核的形态变化,JC-l染色检测线粒体膜电位的变化,C-DCDHF-DA染色观察ROS生成的变化.结果 MPP+诱导后SH-SY5Y细胞凋亡率明显升高,线粒体膜电位明显下降,ROS生成明显升高;火木层孔菌桑黄作用后能明显降低细胞凋亡率,其中20、10μg·mL-1剂量组与MPP+组比较具有显著性差异;其对细胞凋亡后细胞核的形态变化具有一定的改善作用;其可以提升线粒体膜电位,其中20、10、5、2.5μg·mL-1剂量组与MPP+组比较具有显著性差异;其对ROS生成具有明显的抑制作用,其中20、10、5 μg·mL-1剂量组与MPP+组比较具有显著性差异.结论 火木层孔菌桑黄水提物对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有明显的抑制作用.
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药用真菌针层孔菌的研究进展
目的综述近30年药用真菌针层孔菌在菌丝培养、化学成分、药理作用等方面的研究进展.方法查阅近30年国内外有关针层孔菌的研究文献,并进行分析、总结.结果已有学者对针层孔菌的菌丝培养、化学成分和药理活性等方面进行了一系列的研究,发现该真菌含有多种化学成分,且具有抗肿瘤、保护肝脏等多种药理活性.结论针层孔菌是一种极具研究和开发价值的药用真菌,应在生物学特性、人工栽培、化学、药理等方面进一步研究.
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桑黄化学成分研究
火木层孔菌Phellinus igniarius(DC.ex Fr.)Quel又名桑黄,属于木层孔菌属(针层孔属)真菌.该真菌寄生于杨、桦、栎树等树干上,在我国东北、华北、西北及西南等地区均有分布.作为药用真菌的一种,桑黄在我国传统医药中主要用于治疗血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血不止、妇人劳损及瘰疬溃烂等症[1].有关桑黄成分的前期研究表明该真菌中含有黑色素(melanin)[2]、甾体和萜类成分,包括麦角甾醇、芳樟醇和三萜酸,以及脂肪酸类、落叶松蕈酸和芳香酸等.本实验对桑黄95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分进行了较系统的化学成分研究,从中分离得到8个化合物,并通过1D、2D、NMR、IR和MS方法鉴定了结构,分别为6-(3,4-二羟苯基)-3,5-己二烯-2-酮(Ⅰ)、4-(3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮(Ⅱ)、原儿茶醛(Ⅲ)、丁香酸(Ⅳ)、原儿茶酸(Ⅴ)、咖啡酸(Ⅵ)、异麦角甾酮(Ⅶ)和阿魏酸二十八醇酯(Ⅷ).除化合物Ⅶ外,其余化合物均为首次从针层孔属真菌中发现.
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129 木层孔菌属真菌的化学成分与生物活性
国内外研究成果表明,木层孔菌属的多种真菌含抗肿瘤活性成分,有待于开发抗肿瘤新药.对该属常见真菌的化学成分和生物活性进行介绍.
