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硫酸二乙酯诱变对火木层孔菌生长特性及色素代谢物的影响
采用硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)诱变方法对火木层孔菌菌株进行诱变处理,研究了0.5％诱变浓度下DES诱变时间与火木层孔菌致死率的关系.对筛选的优势菌株菌丝生长速度、液体发酵菌丝体生物量、菌丝形态、色素类次级代谢产物分泌以及次级代谢产物抗氧化活性方面的差异进行研究.研究表明,硫酸二乙酯诱变可改变菌丝形态但对菌丝体生长并未产生明显影响,且硫酸二乙酯诱变筛选可改善药用火木层孔菌活性成分,提高对缺氧/糖PC12神经细胞的抗氧化活性.
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海洋来源放线菌无活性野生株的链霉素抗性抗肿瘤活性突变株新产代谢产物研究
目的 研究阐明无活性放线菌野生株L35-1来源硫酸二乙酯(DES)诱变链霉素抗性抗肿瘤活性突变株D2s4-1新产代谢产物及其抗肿瘤活性.方法 组合利用活性跟踪与微量预试先导-放大实验制备的实验模式,通过与原始菌样品直接对照,在快速确定差异活性斑点基础上,组合利用各种色谱技术,分离纯化突变株新产代谢产物.根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.采用MTT法测定抗肿瘤活性.结果 从突变株D2s4-1发酵物中分离鉴定了6个该突变株新产代谢产物,即1,9-二甲酯吩嗪 (1)、2-羟基苯乙酰胺 (2)、2-吡咯甲酸(3)、大豆黄素(4)、环(4-羟基-脯氨酸-亮氨酸)二肽(5)和尿嘧啶(6).其中1、3、5和6有一定抗肿瘤活性,浓度为100 μg/ml时对K562细胞的抑制率分别为33.3%、16.3%、33.3%和21.1%.结论 阐明了抗肿瘤活性突变株D2s4-1的6个新产物,其中4个为活性产物.化合物1为新天然产物,其抗肿瘤活性亦属首次筛选发现.用化学诱变组合抗性筛选技术从无活性放线菌野生株转化获取的活性突变株可供筛选新产活性产物,从而拓展放线菌药源活性新菌株资源.
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庆大霉素优良高产菌株的诱变选育研究
为得到优良的庆大霉素(GM)高产菌,以Micronozpora Echinozpora 07-1为出发菌,经硫酸二乙酯(DES)和微波诱变处理,以自身代谢终产物为筛子,采取抗性平板以及摇瓶动态选育两种方式,结合薄板层析(TLC)检测进行优良突变菌株的筛选.筛选得到的产C1组分比例较高的优良突变菌株突变菌株D15,其发酵液中C1含量达到GM中的45.94%,生物效价为1 400 U/ml,较出发菌株提高了66.8%,并且具有良好的遗传稳定性.
