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浊点萃取-气相色谱法测定槲寄生中20种农药残留
目的:建立浊点萃取-气相色谱法测定槲寄生中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量的方法.方法:选用聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)作为提取剂,采用气相色谱法,Hp-5弹性石英毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器进行检测,外标法计算含量.结果:有机氯和拟除虫菊酯分别在5～500,10～1 000 μg·L~(-1)呈良好线性关系,相关系数均大于0.997 8;检测限(LOD)1.5～7.5μg·kg~(-1);平均回收率为74.15%～111.6%,RSD 4.O%～9.1%.结论:本方法简便、快速,适用于槲寄生中的农药多残留的测定.
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表面活性剂在脱落细胞免疫细胞化学技术中的应用
目的 探讨表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)在免疫细胞化学染色中提高细胞阳性率的重要作用.方法 用分组对照方法把采集的27例胸、腹水标本分成A、B、C组,A、B组使用表面活性剂Triton X-100,C组作为阴性对照组不使用表面活性剂Triton X-100,分别做增殖细胞核相关抗原、癌胚抗原、白细胞共同抗原3种免疫细胞化学标记.结果 加入表面活性剂Triton X-100的A、B组细胞阳性率明显高于未加入表面活性剂Triton X-100的C组.结论 表面活性剂Triton X-100在免疫细胞化学中可以增加涂片中阳性细胞表达,减少非特异性着色、降低背景.
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浊点萃取-高效液相色谱法同时测定槲寄生中3种黄酮的含量
目的 采用浊点萃取法富集槲寄生中的异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-(6″-β-羟基-β-甲基戊二酸半酯)葡萄糖苷,并使用高效液相色谱法测定其含量.方法 采用聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-114)作为萃取剂,色谱柱为Synergi C18柱(250mm× 4.6mm,4μm),流动相为乙腈(A)和体积分数0.5％乙酸溶液(B)梯度洗脱,流速为1∶0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为358nm.结果 测得异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷、鼠李秦素-3-O-β-D-(6″-β-羟基-β-甲基戊二酸半酯)葡萄糖苷质量浓度分别在2.093 ～41.86、1.200 ～24.00、0.861 0～ 17.22 mg·L-1内与峰面积呈良好线性关系；平均回收率分别为93.2％、95.6％、94.5％.结论 该方法准确、灵敏,可作为槲寄生药材质量控制的有效方法.
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比浊法检测疫苗中TritonX-100残留量的方法学验证
目的 建立检测疫苗中Triton X-100残留量的比浊法,并进行方法学验证.方法 将TritonX-100与5％苯酚溶液充分混匀后,室温静置15 min,采用比浊法测定340 nm处吸光度值,与经同样处理的标准品绘制的标准曲线比较,计算样品中残留TritonX-100的浓度.由4名试验人员连续3d测定12次,评价不同试验人员建立标准曲线的成功率；由同一试验人员在同一试验内和不同时间内及由4名试验人员在不同时间内分别测定低(15μg/ml)、中(25 μg/ml)、高(45μg/m1)3个不同浓度的TritonX-100的浓度,验证该方法的精密度和准确度；并检测BSA对试验准确度和精密度的影响.结果 4名试验人员连续3d的12次检测结果均满足标准曲线的成立条件,成功率为100％；同一试验人员在同一试验内对低、中、高3个不同浓度的TritonX-100溶液重复测定10次,变异系数分别为分别为5.33％、1.19％和1.39％,回收率分别为99.33％、105.60％和110.67％；同一试验人员在不同时间内连续测定3次,变异系数分别为4.94％、7.49％和3.46％,回收率分别为87.75％、93.85％和95.51％,4名试验人员在不同时间内连续测定3次,变异系数在1.73％ ～ 12.17％之间,回收率在89.55％～99.26％之间,灵敏度为10 μg/ml,具有良好的精密度和准确度；BSA对试验准确度和精密度无显著影响.结论 该方法快捷、简便,可灵敏、准确地定量检测TritonX-100的含量,可用于疫苗样品中残留TritonX-100的质量控制.
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Triton X-100与SDS对SD大鼠皮下移植猪主动脉瓣巨噬细胞表型极化的作用比较
目的:比较非离子型去污剂聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和离子型去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)对SD大鼠皮下移植猪主动脉瓣巨噬细胞表型极化的作用. 方法:分别采用Triton X-100和SDS对猪主动脉瓣进行去细胞处理,将瓣膜分为Triton X-100处理组和SDS处理组,三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液处理组作为未处理组.将处理后的猪主动脉瓣埋入SD大鼠胸部左右两侧皮下,建立SD大鼠皮下移植猪主动脉瓣模型,分别在第3、14、28天时取出移植的猪主动脉瓣,免疫组织化学染色比较猪主动脉瓣中CCR7(M1型巨噬细胞标志物)和CD163 (M2型巨噬细胞标志物)的表达情况,计算M2型巨噬细胞与M1型巨噬细胞的比值(M2型/M1型巨噬细胞=CD163+细胞数/CCR7+细胞数). 结果:未处理组猪主动脉瓣皮下移植28 d时,M2型/M1型巨噬细胞比值＜1,巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化,发挥促炎作用;SDS处理组、Triton X-100处理组瓣膜在皮下移植14 d和28 d时,M2型/M1型巨噬细胞比值＞1,巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化,发挥促进组织修复的作用.瓣膜皮下包埋14 d时,SDS处理组猪主动脉瓣M2型/M1型巨噬细胞比值明显高于Triton X-100处理组和未处理组(P均＜0.05). 结论:去细胞处理可促进移植瓣膜中巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化,采用SDS进行去细胞处理对巨噬细胞极化的作用优于Triton X-100.
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工作场所空气中三氧化硫和硫酸的氯化钡比浊法的改进
目的 对工作场所空气中三氧化硫和硫酸的氯化钡比浊法进行改进和评价.方法 基于氯化钡比浊法,采用0.1％聚乙二醇辛基苯基醚 (Triton X-100) 溶液作稳定剂,改变硫酸钡悬浮体系的稳定性,分别进行标准曲线线性、测定准确度和精密度试验,筛选出合适的稳定剂.结果 该方法标准曲线相关系数可达0.999 7,检出限为1μg/ml,加标回收率为94.9％～99.8％,批内精密度为1.6％.结论 改进后的方法具有简便快速、高效、准确等优点,线性、检出限、准确度、精密度等性能指标均满足标准研制指南的要求,适用于工作场所空气中三氧化硫和硫酸的测定.
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胶束增溶分光光度法测定空气中硫化氢
硫化氢在低浓度时无毒害作用,仅仅是气味难闻,然而在高浓度时却有致死作用.且硫化氢中毒会破坏上皮嗅觉感受器,使硫化氢浓度达到200ppm-300ppm时不被人察觉,直接导致中毒死亡[1].
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乳化剂OP存在下胶束增溶分光光度法测定水中镉
目的：用胶束增溶分光光度法测定水中镉的含量，并比较了乳化剂OP(聚乙二醇辛基苯基醚)和吐温-20(聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯)的胶束增溶作用。方法：分别以体积分数为10％OP和体积分数为10％吐温-20为增溶剂，以PAN(1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚)为显色剂，在555nm波长处测定水中镉络合物的吸光度。结果：相同条件下，同浓度的镉络合物用OP的吸光度值是吐温-20的1．6倍，用OP作乳化剂平均回收率为96．5％，平行样品的相对平均偏差为2．57％，标准曲线线性良好，回归系数r=0．999 9，ε=4．6×104L·mol-1·cm-1。结论：乳化剂OP的增溶作用优于吐温-20，此法测定水中痕量镉较好。
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富含小鼠骨髓间充质干细胞的生物活性小鼠烧伤变性脱细胞真皮基质的制备
目的 探讨富含小鼠骨髓间充质干细胞的生物活性小鼠烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)的制备. 方法 取12只BALB/c小鼠,背部皮肤造成20％体表总面积深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤).取烧伤皮肤,去除表皮后,按随机数字表法分为聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)组和乙二胺四乙酸(EDTA)组,每组15个样本.Triton X-100组样本置于2.5 g/L Triton X-100-2.5 g/L胰蛋白酶混合溶液中持续振荡洗脱24 h,EDTA组样本置于0.2 g/L EDTA-2.5 g/L胰蛋白酶混合溶液中持续振荡洗脱24 h制备小鼠DADM.对DADM行大体观察,扫描电镜下观察DADM胶原纤维的结构及排列,荧光显微镜下观察DADM的组织结构.将小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)以每孔2×105个的浓度接种于2组小鼠DADM中,制备成具有生物活性的小鼠DADM.培养3d,苏木素-伊红染色观察具有生物活性的小鼠DADM的组织结构,免疫荧光法观察具有生物活性的小鼠DADM中BMSC的分布及数目;细胞计数试剂盒8检测培养2h、1 d、3d、5 d具有生物活性的小鼠DADM中BMSC的增殖情况.对数据行重复测量方差分析及t检验. 结果 (1)2组小鼠DADM外观均呈白色,具有一定的韧性及弹性.2组小鼠DADM呈良好的三维多孔网状结构,EDTA组小鼠DADM胶原纤维连续性良好,Triton X-100组小鼠DADM胶原纤维发生不同程度断裂.2组小鼠DADM均洗脱完全,胶原纤维疏松、排列紊乱,EDTA组小鼠DADM组织结构连续性较Triton X-100组佳.(2)培养3 d,2组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC均分布均匀,EDTA组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC为(37±7)个,显著高于Triton X-100组的(25±8)个,f=0.128,P＜0.05.培养2 h、1d,Triton X-100组和EDTA组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC增殖能力相近(t=1.292、0.656,P＞0.05);培养3、5d,EDTA组具有生物活性的小鼠DADM 中 BMSC增殖能力显著高于Triton X-100组(t=2.309、14.128,P＜0.05或P＜0.01). 结论 EDTA洗脱制备的小鼠DADM具有更佳的三维多孔网状结构,胶原纤维连续性好;移植BMSC制备的具有生物活性的小鼠烧伤DADM叫中 BMSC分布均匀、数量多、增殖能力强,有望成为较佳的自体真皮替代物.
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浊点萃取结合高效液相色谱法测定大鼠血浆中双氯芬酸钠的浓度
目的:采用浊点萃取法富集大鼠血浆中的双氯芬酸钠,并选择高效液相色谱法测定其在大鼠体内的血药浓度.方法:选用Triton X-114作为提取溶剂,色谱柱为DiamonsilTMC18色谱柱,检测波长225 nm,流动相为乙腈-0.02 mol·L-1醋酸钠溶液(35:65,v/v).结果:该方法在0.25～200 μg·mL-1范围内线性良好,在低、中、高(0.5,25,160 μg·mL-1)3个浓度的日内精密度RSD不大于7.7%,日间精密度RSD不大于11.4%.方法准确度RE在±5.8%范围内.3个浓度提取回收率不低于83.4%.结论:本方法简便、快捷、环保,适用于双氯芬酸钠在大鼠体内血药浓度的测定.
