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不同灸治时程对红细胞免疫功能影响的比较
采用不同灸治时程治疗阳虚小鼠模型,显示出不同灸治时程对阳虚小鼠模型的红细胞C3b受体花环率、红细胞免疫复合物花环率的影响存在差异.灸15 min可显著提高阳虚小鼠红细胞C3b受体花环率、红细胞免疫复合物花环率,灸5 min、25 min则无显著作用.说明灸治时间的长短对艾灸效应有一定的影响.
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重型肝炎患者红细胞补体Ⅰ型受体基因多态性与血清可溶性补体Ⅰ型受体含量的变化及意义研究
目的 研究重型肝炎患者红细胞补体Ⅰ型受体(CR1)密度基因多态性的分布及血清可溶性补体Ⅰ型受体(sCR1)含量的变化.方法 选择2011年3~8月在解放军第302医院住院治疗的34例重型乙型肝炎患者为研究对象,选择50例慢性肝炎患者作为对照组.采用PCR和HindⅢ酶切技术检测红细胞CR1密度基因多态性,采用ELISA定量试剂盒检测血清sCR1含量.结果 重型肝炎患者红细胞CR1基因HH型的患者显著高于慢性肝炎组,二者比较差异高度显著(P<0.01);重型肝炎患者血清sCR1含量显著高于慢性肝炎(P<0.001),并与PTA变化显著负相关(r=-0.81).结论 重型肝炎患者的红细胞CR1基因型以HH为主,与慢性肝炎患者的分布存在质的差别,其发生机制可能与个体过敏体质关系密切,血清sCR1含量变化与重型肝炎患者肝脏功能损伤程度密切相关.
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自体移植脾巨噬细胞C3b、Fc受体及蛋白质表达的实验研究
目的探讨自体脾组织移植后的功能状况.方法采用小鼠进行自体脾组织网膜内移植,术后6个月切取移植脾组织,检测巨噬细胞的Fc、C3b受体及蛋白表达.结果自体移植脾巨噬细胞Fc 受体的含量与原位脾相近,C3b受体的功能正常;蛋白质的表达与原位脾相同.结论大网膜内自体移植脾组织的功能在细胞水平是正常的,移植脾组织具有原位脾的功能.
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胃癌合并慢性病性贫血患者红细胞膜表面CD35和CD58的表达
目的:研究细胞因子对正常人和胃癌伴慢性病性贫血(anemia of chronic cliseasis, ACD)的影响.方法:采用ELISA方法测定CD35和CD58水平,红细胞酵母花环法测定RBC-C3bRR和RBC-ICR,聚乙醇沉淀比浊法测定CIC,流式细胞术测定CD2.结果:胃癌组和正常对照组进行比较:RBC-C3b差异有统计学意义,P<0.01;RBC-ICR差异有统计学意义,P<0.05;CD35差异有统计学意义,P<0.01;而CD58虽然低于正常对照组,但差异无统计学意义,P>0.05;CIC测定结果均正常.结论:胃癌患者RBC-C3b、CD35和CD58水平下降与胃癌患者具有免疫活性的细胞因子有直接关系.但CD58无统计学意义.
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脐血红细胞CD35调控白细胞CXCR4表达能力的变化
目的探讨脐血红细胞调控白细胞CXCR4表达能力的变化.方法采用灭活癌细胞(S180,5×106/ml)0.2ml(或生理盐水)加入全血细胞(或白细胞)0.2ml和血浆0.3ml中,37℃温育1h,用流式细胞仪免疫荧光法测定红细胞CD35和白细胞(淋巴细胞、粒细胞)CXCR4分子表达量.分组:①癌细胞悬液0.2ml加全血细胞悬液0.2ml和血浆0.3ml;②生理盐水0.2ml加全血细胞悬液0.2ml和血浆0.3ml;③癌细胞悬液0.2ml加白细胞悬液0.2ml和血浆0.3ml;④生理盐水0.2ml加白细胞悬液0.2ml和血浆0.3ml.结果脐血红细胞CD35表达量在S180激活后下降不如正常人红细胞明显,而白细胞CXCR4表达量在S180激活后上升不明显;正常人全血红细胞CD35表达量在S180激活后明显下降(40.21%±11.52% vs 28.65%±8.08%,P＜0.01),而粒细胞CXCR4表达量明显上升(40.62%±17.89% vs 64.18%±11.69%,P＜0.01).结论脐血红细胞免疫调控能力和白细胞免疫功能都明显低下.
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红细胞调控白细胞免疫功能新的自然实验研究体系
目的用血液免疫反应路线图实验体系评估红细胞在白细胞免疫活性中的作用.方法将0.3ml血浆加入0.2ml全血细胞悬液(全血细胞组)或0.2ml白细胞悬液(白细胞组)中,37℃温育1h,用免疫酶联法测定IL-8和IL-12水平,流式细胞仪测定白细胞膜CD4、CD8、CD35和CXCR4表达量.结果全血细胞组IL-8和IL-12水平(分别为5.96±4.26、9.84±2.23ρB*pg-1*ml-1)明显低于白细胞组(分别为15.09±9.86、13.59±3.69ρB*pg-1*ml-1,P<0.05),淋巴细胞CD4、CD35、CXCR4表达量(分别为37.79±12.00、154.66±70.00、34.40±20.45)明显高于白细胞组(分别为18.54±11.32、83.26±35.99、16.69±11.09,P<0.01),粒细胞CD35表达量(603.63±257.64)明显高于白细胞组(384.86±174.16,P<0.01).成人全血细胞组淋巴细胞和粒细胞CD35和CXCR4表达量明显高于脐血全血细胞组(P<0.05或P<0.01).结论红细胞是白细胞(包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、树突状细胞、粒细胞等)免疫功能的调控者和指导者,脐血红细胞免疫调节功能明显下降;本研究为红细胞免疫调控活性测定提供了新的近似自然的方法.
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肺炎支原体感染儿童细胞免疫功能的变化及其意义
支气管哮喘是一种与T细胞免疫异常有关的气道慢性变态反应性炎症[1].有研究表明,在儿童喘息性肺炎中肺炎支原体(mycoplasma pneumonia,MP)感染率高于非喘息性肺炎,儿童患支原体肺炎后常继发过敏性咳嗽,并认为MP是支气管哮喘急性发作或长期难以缓解的相关病原体[2].为此,我们对MP感染儿童的细胞免疫功能进行检测,旨在了解MP感染后机体是否存在与支气管哮喘类似的细胞免疫功能紊乱.
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铯137辐照对库存红细胞表面分子CD35、CD47的影响
目的：探讨铯137（137 Cs）辐照对库存红细胞表面分子红细胞1型补体受体（complement receptor type 1，CR1 or CD35）及 CD47分子的影响。方法采集60例健康献血者静脉血，制备去白细胞的悬浮红细胞，并将其分为2组各30例，未辐照组常规4℃保存，辐照组采用25Gy 137 Cs辐照后4℃保存。分别于第0、7、14、28、35天收集2mL 样本。采用直标法流式细胞术检测红细胞表面分子 CD35、CD47。结果辐照组和未辐照组红细胞 CD35、CD47的表达均随着4℃保存时间的延长而减少，2组的时点间以及组间·时点间交互作用比较差异均有统计学意义（P ＜0．01），但组间差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论25Gy 137 Csγ射线辐照对保存期内红细胞 CD35、CD47表面分子表达无明显影响。
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肾移植受者红细胞 CD35、CD58、CD59表达变化
目的：观察肾移植受者移植前后外周血红细胞膜表面 CD35、CD58、CD59的表达情况。方法选择2013年1月—2015年1月肾移植受者25例及健康体检者25例,采用流式细胞术对肾移植术前、术后3、7、14 d 外周血红细胞膜表面免疫分子 CD35、CD58、CD59进行检测,观察红细胞免疫功能的变化情况。结果肾移植受者术前CD35、CD59表达明显低于对照组(P <0．05,P <0．01),CD35术后14 d 明显低于术前,CD58术后3 d 高于术前和术后14 d (P <0．05)。结论肾移植受者术前红细胞免疫功能低下,术后有所改善。红细胞免疫参与肾移植受者机体免疫功能的调节。
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系统性红斑狼疮患者红细胞Ⅰ型补体受体与细胞免疫的相关关系
目的探讨红细胞Ⅰ型补体受体(CR1)在系统性红斑狼疮(SLE)免疫发病机制、病情活动与激素治疗前后方面中的作用以及与细胞免疫的相关性.方法选自2002年6月至2003年2月我科住院及门诊初诊初治SLE病人39例,其中活动期病人28例,稳定期病人11例.健康献血员30名为对照组.采用红细胞CR1与红细胞免疫复合物花环试验检测RBC-CR1与红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环率.对活动期患者在予糖皮质激素治疗前,治疗后2周、4周各测1次RBC-CR1、RBC-IC花环率.流式细胞仪测定CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD3+细胞数.结果①活动期SLE组RBC-CR1花环率(4.4±3.6)%明显低于稳定期组(8.9±3.3)%及对照组(9.6±4.3)%,RBC-IC花环率(12.9±9.5)%明显高于稳定期组(6.2±2.6)%及对照组(5.7±2.8)%.稳定期SLE组与对照组比较,RBC-CR1与RBC-IC花环率差异均无显著性(P＞0.05).②治疗后2周、4周与治疗前比较,RBC-CR1花环率显著升高(P＜0.01),但仍低于对照组(P＜0.05).RBC-IC花环率显著降低(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.05).③活动期、稳定期SLE组与对照组比较,CD4+、CD3+细胞数差异无显著性;CD8+细胞数明显升高;CD4+/CD8+比值明显下降.④RBC-CR1花环率与CD4+(r=0.40,P＜0.05)、CD4+/CD8+(r=0.41,P＜0.05)均呈正相关,与CD8+(r=-0.42,P＜0.05)、疾病活动指数(DAI)(r=-0.65,P＜0.01)呈负相关,与CD3+未见相关性(P＞0.05).结论活动期SLE患者的红细胞CR1免疫识别、黏附清除CIC能力的下降,可能是SLE免疫发病机制过程中的一个重要环节;与细胞免疫有相关性.
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抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎周围血中性粒细胞CD35表达的变化及意义
目的 初步探讨抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎(MPO-AAV)患者外周血中性粒细胞CD35表达的变化及其与临床疾病活动性间的关系.方法 选择40例初诊未治的活动性MPO-AAV患者为病例组,记录患者伯明翰血管炎活动度积分(BVAS),40名健康志愿者为对照组,采用流式细胞术检测2组受试者外周血中性粒细胞CD35和MPO的表达水平,ELISA法检测外周血抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体(MPO-ANCA)、补体B因子活化片段a(Ba)及MPO水平,采用t检验、非参数检验及Spearman相关分析比较2组受试者的检测结果,分析病例组内各检测指标间及检测指标与BVAS间的关系.结果 与健康对照组比较,病例组患者外周血中性粒细胞膜CD35及MPO表达水平均增高[分别为(2 014±968)与(1 454±511),t=3.024,P=0.002和(709 ±244)与(580±158),t=2.806,P＜0.01],而胞质内MPO表达水平显著降低[(1 525±1 033)与(3 196±2 126),t=-4.468,P＜0.01].病例组血清Ba和MPO水平明显高于对照组{分别为[37.89(26.17,63.14)] μg/L与[27.99(18.64,46.52)] μg/L,Z=-2.521,P=0.012和[546.16(450.55,729.96)] U/L与[327.93 (279.02,365.10)] U/L,Z=7.121,P＜0.01}.病例组中性粒细胞膜CD35表达水平分别与周围血中性粒细胞计数、血清Ba及BVAS呈正相关(分别为r=0.573,P＜0.01;r=0.433,P=0.005和r=0.368,P=0.020);中性粒细胞胞内MPO水平与周围血MPO水平呈负相关(r=-0.458,P=0.003);MPO-ANCA与BVAS呈正相关(r=0.351,P=0.026).结论 MPO-AAV患者中性粒细胞膜CD35的增强表达,可能保护中性粒细胞不被激活的补体旁路破坏,导致更多的中性粒细胞参与MPO-AAV发病,抑制CD35表达可能是MPO-AAV新的潜在治疗途径之一.
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实验性癫痫大鼠免疫分子的表达
背景:近年来,许多学者对癫痫与免疫的关系从细胞和分子水平进行了研究,发现癫痫患者存在细胞、分子及其功能的多种免疫学改变.目的:观察实验性癫痫大鼠海马神经元的变性,以及小胶质细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ和C3b受体的表达.设计:随机对照动物实验.单位:大连大学医学院;日本三重大学.材料:实验于2001/2002在吉林北华大学免疫学实验室完成.取成年Wistar大鼠40只,随机分为模型组和对照组两组,每组20只.方法:模型组大鼠皮下注射海仁酸(12 mg/kg)建立实验性癫痫大鼠模型,对照组不干预,观察模型组大鼠注射海仁酸6 h期间湿狗样变行为变化.给药后3 d处死大鼠,采用结晶紫染色方法观察实验性癫痫大鼠海马神经元的变性;采用免疫组织化学染色方法观察实验性癫痫大鼠MHC分子和补体C3b受体的表达.主要观察指标:两组大鼠大脑海马神经元变性,MHC-Ⅰ类分子、MHC-Ⅱ类分子和C3b受体的密度比较.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①模型组大鼠注射海仁酸3h以内出现湿狗样变及抽搐发生,在第3～6小时出现更为剧烈的癫痫持续状态.②模型组大鼠大脑海马锥状细胞层可见到神经元的变性,对照组未见神经元损伤.③模型组大鼠大脑海马MHC-Ⅰ类分子、MHC-Ⅱ类分子和C3b受体的密度分别为(201.6±6.43),(493.8±7.92)和(362.5±3.18)个/视野,对照组未见明显表达,两组比较差异显著(P＜0.01). 结论:①皮下注射海仁酸可成功建立实验性癫痫大鼠模型.②实验性癫痫大鼠大脑海马硬化发生过程中,存在着补体系统参与的免疫炎症反应,说明癫痫的免疫炎症机制.
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附红细胞体对人和鼠红细胞影响比较
目的 研究附红细胞体对人和小鼠红细胞的影响,以探讨附红细胞体的感染机制.方法 采集5例感染附红细胞体患者静脉血,采用PCR法检测附红细胞体特异片段,并通过流式细胞术检测其红细胞CD35(CR1受体)表达.分离纯化人附红细胞体,以尾静脉注射方式人工感染小鼠,感染后通过血涂片光学显微镜检查,PCR检测及透射电子显微镜检测鉴定感染成功,流式细胞术检测其红细胞CD35表达,同时比较人和小鼠的红细胞计数、Hb含量、红细胞压积和超氧化物歧化酶(SOD)等血液指标变化.数据行t检验.结果 感染组小鼠均被附红细胞体感染,感染率在80%以上.感染附红细胞体患者和感染组小鼠血样中PCR检测均出现801 bp特异性片段,而健康对照者和对照组小鼠的血液样本未扩增出特异性片段.感染附红细胞体患者的红细胞CD35表达增加(t=20.96,P<0.01),而小鼠的红细胞CD35并不表达,感染附红细胞体的人和小鼠红细胞数量都明显减少(t=2.58,t=3.08,均P<0.01),Hb含量降低(f=2.38,t=2.78,均P<0.05),红细胞压积略有下降(t=1.56,t=0.11,均P>0.05),SOD活性略有下降(t=0.64,t=1.43,均P>0.05).结论 人附红细胞体可以在人和小鼠之间跨种传播,可以破坏红细胞正常结构,附红细胞体能够增加人红细胞CD35的表达,而小鼠的红细胞CD35不表达.
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系统性红斑狼疮患者红细胞补体受体Ⅰ型密度相关基因组多态性研究
目的制定系统性红斑狼疮(SLE)患者红细胞补体受体Ⅰ型(CR1)天然免疫功能低下分型标准.方法采用聚合酶链反应(PCR)加HindⅢ酶切法测定红细胞CR1密度相关基因多态性,在32例SLE患者和48例正常人中用红细胞CR1花环(RBC-CR1R)及红细胞免疫复合物花环(RBC-ICR)测定红细胞CR1活性.结果16例活动期SLE患者中发现10例红细胞CR1密度相关基因组高表达型(HH型)占62.5%,而稳定期16例中有13例,占81.3%.这23例HH型SLE患者红细胞CR1活性(RBC-C3bR 16.34±3.41,RBC-ICR 10.17±3.02)比HL型(中表达型)、LL型(低表达型)高(8例HL型:RBC-C3bR 13.50±4.50,RBC-ICR 6.00±3.07和1例LL型:RBC-C3bR 4.00,RBC-IC 0.00),但与48例正常人明显不同(RBC-C3bR 18.60±3.80,RBC-ICR 4.50±1.50,P＜0.01).结论根据红细胞CR1基因型与CR1活性测定结果可将SLE患者红细胞CR1活性低下分为原发型、继发型和混合型,这种CR1免疫活性的差异可反映疾病的活动状况.
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银屑病患者红细胞CD35和红细胞趋化因子受体的测定
目的研究银屑病患者红细胞CD35及红细胞趋化因子受体(ECKR),探讨红细胞天然免疫功能状况及其在银屑病发病机制中的作用.方法测定新鲜血红细胞对肿瘤细胞的快速天然免疫反应;用流式细胞仪定量测定红细胞CD35;用ELISA法检测白介素8含量,反映红细胞上ECKR的结合活性.结果银屑病患者肿瘤红细胞花环率和红细胞CD35定量均明显高于对照组(P＜0.05),ECKR结合活性比正常人明显降低(P＜0.05),红细胞CD35定量及ECKR结合活性与PASI评分呈显著正相关(r=0.93,P＜0.001,r=0.49,P＜0.005).结论银屑病患者红细胞天然免疫功能存在亢进和紊乱,红细胞CD35分子数量及其活性的增加是银屑病天然免疫反应能力亢进的基础;红细胞CD35分子定量及ECKR结合活性的测定可作为判断银屑病病情的客观指标;红细胞参与了细胞因子的调控并在银屑病的发病过程中可能起一定作用.
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新的免疫球蛋白超家族成员——CRIg的结构与功能
CRIg是新近发现的免疫球蛋白超家族成员,表达在巨噬细胞上,与C3b、iC3b结合不仅参与C3介导的病原微生物调理作用,还抑制T细胞的活化.此文对CRIg的结构与功能进行综述.
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大蒜素对肿瘤患者细胞免疫功能的影响
目的:探讨大蒜素对肿瘤患者细胞免疫功能的影响.方法:用红细胞C3b受体花环试验(RCRR)、红细胞免疫复合物花环试验(RICR)、红细胞免疫粘附肿瘤细胞花环试验(TRCR)检测30例肿瘤患者服用大蒜素前、后1、2、3月及30例正常对照组的红细胞免疫功能.用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法检测30例肿瘤患者服用大蒜素前、后1、2、3月及30例正常对照组的淋巴细胞免疫功能.结果:肿瘤患者服用大蒜素前,红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫粘附肿瘤细胞花环率显著低于对照组(P＜0.05),而红细胞免疫复合物花环率显著高于对照组(P＜0.01),淋巴细胞免疫功能显著低于对照组(P＜0.05);服用大蒜素后,红细胞C3b受体花环率显著高于对照组(P＜0.05),淋巴细胞免疫功能接近或高于对照组.结论:大蒜素能提高肿瘤患者的细胞免疫功能.
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脑胶质细胞瘤病人IL-2和sIL-2R表达及细胞免疫功能变化的意义
目的研究脑胶质细胞瘤病人外周血中白细胞介素2(IL-2)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)的表达以及红细胞免疫和T淋巴细胞亚群的变化规律,探讨它们之间的相互关系.方法对55例脑胶质瘤病人及55例健康献血员,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清IL-2、sIL-2R含量,免疫黏附法测定红细胞免疫活性及其调节功能,链亲和素-过氧化物酶(SP)一步法测定CD3、CD4、CD8细胞数.结果脑胶质细胞瘤组IL-2含量较对照组显著性降低(P＜0.01),sIL-2R则显著性升高(P＜0.01);红细胞C3b受体(RBC-C3bR)、红细胞免疫调节促进因子(RFER)亦显著性降低(P＜0.01),而红细胞免疫复合物(RBC-ICR)、红细胞免疫调节抑制因子(RFIR)则显著性升高(P＜0.01);CD3、CD4细胞数显著性降低(P＜0.001),而CD8无显著性差异(P＞0.05).结论脑胶质细胞瘤病人存在免疫功能低下;检测血清IL-2和sIL-2R含量、红细胞免疫功能及T细胞亚群活性,对脑胶质细胞瘤病人的免疫机制研究具有重要意义.
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子宫内膜异位症患者的红细胞免疫功能测定
目的探讨子宫内膜异位症患者的抗子宫内膜抗体及红细胞免疫功能变化及临床意义.方法将50例子宫内膜异位症患者作为研究对象,20例正常妇女为对照组,应用玫瑰花环试验检测红细胞补体C3b受体花环(C3bRR)及免疫复合物花环(ICR)2项红细胞免疫功能指标;应用ELISA法检测抗子宫内膜抗体.结果与对照组比较,子宫内膜异位症各组C3bRR均明显降低(P<0.05),ICR均明显升高(P<0.05),子宫内膜异位症患者各组间C3bRR和ICR无显著差异,子宫内膜异位症患者抗子宫内膜抗体的阳性率明显升高(P<0.05).结论子宫内膜异位症患者的红细胞免疫功能低下,可能与子宫内膜异位症的发生有关;抗子宫内膜抗体可以作为辅助诊断指标.
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胃肠道恶性肿瘤病人红细胞C3b受体和sIL-2R测定
①目的了解胃肠道恶性肿瘤病人红细胞免疫功能和血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)水平的变化及其相互关系.②方法采用红细胞花环试验和双抗体夹心ELISA法,检测40例胃肠道恶性肿瘤病人红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)和sIL-2R水平的变化,并与30例正常人进行比较.③结果胃肠道恶性肿瘤病人E-C3bRR明显低于对照组,而sIL-2R水平明显高于对照组,差异均有极显著意义(t=9.21、9.76,P＜0.01).E-C3bRR和sIL-2R呈显著负相关(r=-0.53,P<0.01).④结论 E-C3bRR和血清sIL-2R水平测定对判断胃肠道恶性肿瘤病人的病情具有重要意义.
