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  • 温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激相关因子的影响

    作者:冯程程;马丽

    目的:建立大鼠糖尿病周围神经痛性病变(DPN)模型,并观察温通活血乳膏对模型动物行为学、坐骨神经传导速度及Bax、Bcl-2表达的影响.方法:用链脲佐菌素(STZ)造Wistar大鼠DPN模型,并随机分为6组:模型组,二甲双胍组(0.18g/kg),辣椒碱乳膏组(0.2g/只),二甲双胍阳性药对照组(辣椒碱乳膏0.2g/只+二甲双胍0.18g/kg),温通活血乳膏低剂量组(0.4g/只+二甲双胍0.18g/kg)、温通活血乳膏高剂量组(0.8g/只+二甲双胍0.18g/kg),各组分别予不同药物给药,连续用药4周后测定各组大鼠的行为学指标、坐骨神经传导速度,同时采用免疫组化法测定各组大鼠的Bax、Bcl-2表达.结果:与模型组比较,温通活血乳膏低、高剂量组大鼠热缩足潜伏期、冷缩足持续时间、机械痛缩足持续时间均延长(P<0.01,P<0.05),缩足反应百分率降低(P<0.01,P<0.05).与二甲双胍组比较,温通活血乳膏低、高剂量组的冷缩足持续时间延长(P<0.01),温通活血乳膏高剂量组机械痛缩足持续时间延长(P<0.05).与溶媒对照组比较,模型组大鼠的Bax表达增强(P<0.01),Bcl-2表达减弱和Bc.l-2/Bax比值明显降低(P<0.01).与模型组比较,各药物组坐骨神经细胞Bax表达均降低(P<0.05),Bcl-2表达均增加(P<0.01,P<0.05),以温通活血乳膏高剂量组明显.结论:温通活血乳膏通过上调Bcl-2表达、下调Bax表达,抑制DPN大鼠坐骨神经细胞凋亡,起到改善神经传导及感觉障碍的作用.

  • 温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变大鼠VEGF及细胞凋亡的影响

    作者:郭诗韵;冯程程;陈茜;沈玉国;马丽

    目的:探讨温通活血乳膏在糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠中对血管内皮生长因子(VEGF)及细胞凋亡的影响.方法:建立链脲佐菌素及高糖高脂饲料诱导的DPN大鼠模型,随机分为:空白组、模型组、二甲双胍组、辣椒碱+二甲双胍组、温通活血乳膏+二甲双胍组.药物干预4周,观察大鼠一般情况,光镜下检测坐骨神经病理结构,免疫组化法检测VEGF的表达,并用TUNEL法检测背根神经节神经元细胞凋亡情况.结果:与模型组相比,温通活血乳膏+二甲双胍组的坐骨神经病理结构趋于正常,VEGF表达呈阴性;且神经细胞凋亡数目减少(P<0.01,P<0.05).结论:温通活血乳膏抑制了DPN大鼠坐骨神经结构的改变,并抑制了VEGF的表达,阻止细胞凋亡的进程,从而延缓周围神经病变进展.

  • 温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节中p-AKT蛋白表达的影响

    作者:徐利娟;冯程程;岳薇薇;沈玉国;马丽

    目的 观察温通活血乳膏外用对糖尿病周围神经病变大鼠神经传导速度的影响及可能作用机制.方法 53只Wistar大鼠随机选取10只作为空白组,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养联合一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立糖尿病周围神经病变大鼠模型,造模成功后分为模型组[后肢涂抹空白乳膏(0.8 g/只)和蒸馏水1 ml/100 g灌胃]、二甲双胍组[涂抹空白乳膏和二甲双胍片0.1Sg/(kg·d)灌胃]、辣椒碱+二甲双胍组[涂抹复方辣椒碱乳膏0.2g/只和二甲双胍片灌胃]、温通活血乳膏+二甲双胍组[涂抹温通活血乳膏0.8g/只和二甲双胍片灌胃].每天1次,连续4周.检测各组大鼠坐骨神经(包括运动神经和感觉神经)传导速度,HE染色观察背根神经节病理结构,检测大鼠背根神经节中蛋白激酶B(AKT)及磷酸化蛋白激酶B (p-AKT)的蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠运动神经传导速度减慢,潜伏期缩短;感觉神经潜伏期延长,传导速度减慢(P<0.05或P<0.01);光镜下背根神经节中神经元胞体萎缩、胞质内尼氏体溶解、部分胞核溶解、消失;背根神经节中p-AKT蛋白表达降低(P<0.05).温通活血乳膏+二甲双胍组较模型组坐骨神经传导速度加快,背根神经节结构改善,背根神经节中p-AKT蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01).温通活血乳膏+二甲双胍组坐骨神经传导速度较二甲双胍组及辣椒碱+二甲双胍组加快(P<0.05或P<0.01).各组大鼠背根神经节中AKT蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 温通活血乳膏可能通过上调背根神经节中p-AKT蛋白的表达水平,从而提高糖尿病周围神经病变的神经传导速度.

  • 温通活血乳膏的抗炎消肿、镇痛及改善微循环作用实验研究

    作者:陈茜;王卫群;李凯利

    目的:研究温通活血乳膏的抗炎消肿、镇痛及改善微循环的作用.方法: 用醋酸法致小鼠扭体,观察小鼠扭体次数;用角叉菜致大鼠足趾肿胀,观察大鼠足趾肿胀抑制率;用显微镜观察小鼠耳廓血管血流量及微循环改善.结果:温通活血乳膏能明显减少醋酸法致小鼠的扭体次数;明显抑制角叉菜致大鼠足趾的肿胀率;对小鼠耳廓具有扩张血管,加快血流量,增加周围毛细血管数,部分毛细血管管径明显加宽.结论:温通活血乳膏具有较好的抗炎消肿、镇痛和改善微循环的作用.

  • 温通活血乳膏联合硫辛酸治疗DPN的疗效观察

    作者:马静;李凯利;马丽

    目的:通过观察温通活血乳膏联合硫辛酸治疗DPN的疗效,探讨其抗氧化应激与DPN的关系,为其治疗DPN提供理论依据。方法选取2013年6月~2014年6月我院收治的DPN患者96例,按随机分配序列的方法分成治疗组和对照组,各48例。对照组采用基础治疗的同时静脉点滴硫辛酸注射液,治疗组在对照组的基础上加用温通活血乳膏,治疗14天。观察治疗前后DPN患者丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)指标变化,测定患者正中神经、腓总神经、运动神经传导速度(MNCV)及感觉神经传导速度(SNCY)的变化,并通过TCSS评分对病情进行评估。结果经过2周治疗后,两组患者SOD、GSH-Px升高,而MDA的含量减低,与治疗前相比,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组MDA减低、SOD、GSH-Px升高与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者MNCV和SNCV较治疗前均有所提高,其中治疗组内部比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后治疗组患者TCSS评分、疗效均明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者均未发生不良反应。结论温通活血乳膏联合硫辛酸治疗DPN安全有效,且疗效比单纯应用硫辛酸显著,其作用机制可能与抗氧化应激有关。

  • 温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变大鼠超氧化物歧化酶及丙二醛水平影响研究

    作者:马静;李凯利;马丽

    目的:探讨温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变( DPN)大鼠氧化应激的作用机制。方法2013年5—9月,选用8周龄雄性SD大鼠50只。采用随机数字表法分为正常对照组10只和造模组40只;造模组大鼠饲养期间死去10只,将剩余大鼠采用随机数字表法分为模型组、硫辛酸组、温通活血乳膏组,各10只。制作DPN大鼠模型,硫辛酸组大鼠腹腔注射硫辛酸,温通活血乳膏组大鼠涂抹温通活血乳膏,正常对照组与模型组大鼠给予等量的基质。检测并比较各组大鼠甩尾时间、潜伏期及运动神经传导速度( MNCV)、血清及坐骨神经抗氧化指标〔超氧化物歧化酶( SOD)、丙二醛( MDA)水平〕,观察坐骨神经超微结构。结果模型组大鼠甩尾时间较正常对照组延长( P <0.05);硫辛酸组和温通活血乳膏组大鼠甩尾时间较模型组缩短(P<0.05)。模型组潜伏期较正常对照组延长(P<0.05);温通活血乳膏组潜伏期较模型组缩短(P<0.05)。模型组、硫辛酸组和温通活血乳膏组MNCV较正常对照组缩短(P<0.05);硫辛酸组和温通活血乳膏组MNCV较模型组延长(P<0.05)。模型组、硫辛酸组和温通活血乳膏组血清MDA较正常对照组升高(P<0.05)。模型组坐骨神经SOD、 MDA与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。硫辛酸组和温通活血乳膏组坐骨神经MDA较模型组降低( P<0.05)。模型组有髓神经纤维髓鞘增宽,板层结构破坏严重,神经严重脱髓鞘,细胞器空泡样变性;硫辛酸组、温通活血乳膏组大鼠有髓神经纤维髓鞘、板层结构、施万细胞结构变化较模型组减轻。结论温通活血乳膏局部用药可以改善MNCV,减轻周围神经结构和功能损伤,其作用机制可能是通过调节氧化还原间的失衡,从而达到治疗DPN的作用。

  • 温通活血乳膏对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞TNF-α、IL-6、NF-κB表达的影响

    作者:马丽;冯程程;徐利娟;郭诗韵;康小龙;王晶;白生宾

    目的 观察温通活血乳膏对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞TNF-α、IL-6、NF-κB表达的影响.方法 将RAW264.7细胞随机分为正常对照组、LPS组、空白对照组、温通活血乳膏浓缩液高、中、低剂量组(250、50、10 μg/mL).样品与细胞共同孵育24 h后,进行相关检测.结果 不同剂量温通活血乳膏对细胞生长均无抑制作用,细胞活力正常.与LPS组比较,温通活血乳膏组能显著抑制NO、ROS产生及TNF-α、IL-6水平(P<0.05,P<0.01),并均呈量效关系;也能显著抑制LDH释放(P<0.05),但量效关系不明显.RAW264.7细胞经LPS刺激后,p65、p-p65、IKK、p-IKK细胞核区可见明显的绿色荧光表达,与细胞核蓝色叠加,其核内荧光强度显著高于正常对照组(P<0.01);经温通活血乳膏干预后,p65蛋白荧光强度显著降低(P<0.01).结论 温通活血乳膏能有效抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞释放炎症因子,具有一定抗炎作用,其机制可能与抑制p65蛋白核转位有关.

  • 温通活血乳膏联合胰激肽原酶肠溶片治疗糖尿病痛性神经病变临床研究

    作者:朱建红;张新军;吕安坤

    目的:观察温通活血乳膏联合胰激肽原酶肠溶片治疗糖尿病痛性神经病变的临床疗效.方法:将62例糖尿病痛性神经病变患者随机分为对照组32例和治疗组30例.对照组给予胰激肽原酶肠溶片,治疗组在对照组的基础上联合温通活血乳膏.观察两组患者的临床疗效,比较两组患者治疗前后下肢神经的传导速度、神经症状、体征及VAS评分.结果:治疗组有效率为82.0%,对照组有效率为64.9%,两组患者临床疗效比较,差异具有统计学意义(P<0.05).两组患者治疗后周围神经传导速度均较前提高,差异具有统计学意义(P<0.05),且与对照组比较,治疗组治疗后周围神经传导速度均优于对照组(P<0.05).治疗组神经症状、体征及VAS评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:温通活血乳膏联合胰激肽原酶肠溶片可明显改善糖尿病痛性神经痛变患者的临床症状,并延缓糖尿病周围神经病变的进展.

  • 温通活血乳膏对糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经细胞Bax、Bcl-2的影响

    作者:郭诗韵;冯程程;阿克拜尔·乌普;叶婷;马丽

    目的 探讨温通活血乳膏外用治疗糖尿病周围神经病变 (DPN) 的作用机制.方法 建立链脲佐菌素 (STZ) 及高糖高脂饲料诱导的DPN大鼠模型, 随机分为五组:空白组、模型组、二甲双胍组 (E) 、辣椒碱组+二甲双胍组 (L+E) 、温通活血乳膏+二甲双胍组 (W+E) .分别给药处理, 连续用药4周, 测定各组大鼠体重、血糖及坐骨神经传导速度, 用Western Blot检测坐骨神经中Bax与Bcl-2蛋白表达水平;用RT-PCR检测坐骨神经中Bax mRNA和Bcl-2 mRNA.结果与空白组相比, 各造模组大鼠坐骨神经细胞Bax表达明显增高, Bcl-2表达明显降低;与模型组相比, 各药物组坐骨神经细胞Bax mRNA及Bax蛋白的表达均降低 (P<0.05), Bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白的表达均升高 (P<0.05) .结论 温通活血乳膏通过上调Bcl-2表达、下调Bax表达, 抑制DPN大鼠坐骨神经细胞凋亡, 为其对DPN坐骨神经损伤进行分子保护的调控机制提供线索.

  • 温通活血乳膏联合依帕司他对糖尿病痛性神经病变的影响

    作者:马丽;陈茜;李凯利

    目的:观察温通活血乳膏联合依帕司他治疗糖尿病痛性神经病变的疗效.方法:温通活血乳膏由川芎、细辛、桂枝、红花等7味中药组成(本院药学部制备,批件号:新药制字:Z,20052604).90名患者按1∶1随机分配进入温通活血乳膏联合依帕司他治疗组(45例)和依帕司他对照组(45例),疗程30天.比较两组治疗前后及其组间下肢神经的传导速度、症状、体征、VAS评分及Na+,K+-ATP酶活性的影响.结果:终进入统计分析为85例患者.①治疗组和对照组治疗前后自身比较,均较前改善,差异具有显著性(P<0.01).温通活血乳膏(生药1g/kg)治疗组治疗后运动神经传导速度(腓总神经、胫神经)分别为38.4±2.2 m/s、42.9±4.6m/s,感觉神经传导速度(腓总神经、胫神经)分别为39.2±2.4m/s,40.1±3.5m/s,均高于对照组治疗后运动神经传导速度(腓总神经、胫神经)32.1±2.4m/s,35.3±3.8m/s及感觉神经传导速度(腓总神经、胫神经)30.5±2.5m/s,32.7±2.9m/s,差异有统计学意义(P<0.05);②临床疗效:温通活血乳膏(生药1g/kg)治疗组在改善患者临床症状方面效果明显,显效21例,有效14例,无效8例,总有效率为81.4%;对照组显效9例,有效19例,无效14例,总有效率为66.7%,两组总有效率比较差异具有显著性(P<0.01).③VAS评分:温通活血乳膏(生药1g/kg)治疗组在改善患者VAS评分1.3±0.5明显低于对照组1.8±0.7,两组评分比较差异具有统计学意义(P<0.05).④Na+,K+-ATP酶活性:温通活血乳膏(生药1g/kg)治疗组Na+,K+-ATp酶活性48.05±6.36 (u/mg)明显高于对照组35.92±13.71 (u/mg),差异有统计学意义(P<0.05).结论:温通活血乳膏联合依帕司他能够有效改善糖尿病痛性神经病变患者的临床症状,延缓糖尿病周围神经病变的进展.

  • 温通活血乳膏工艺研究

    作者:王纤汝;夏昌隆;卢军

    目的:研究温通活血乳膏的制备工艺.方法:以乙醇浓度、回流时间、提取次数为主要因素,设计正交试验;以制剂的外观性状、涂展性、耐热试验、,耐寒试验、离心性等观察指标筛选乳膏基质处方,制备温通活血乳膏.结果:佳工艺以加8倍量70%乙醇,提取2次,每次2小时,提取液回收乙醇,低温减压浓缩成相对密度约为1.05的药液,加经筛选的乳膏基质制备为宜.结论:提取工艺简便可行,评分指标可靠、科学;乳膏基质组成合理、稳定.

  • 温通活血乳膏对STZ诱导的DPN大鼠炎症因子的影响

    作者:陈茜;冯程程;李凯利

    目的 观察温通活血乳膏对链脲佐菌素诱导的糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠相关炎性因子的影响,探讨其改善DPN的作用机制.方法 将120只经高脂饲料喂养后小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射而诱发2型糖尿病的大鼠动物模型按体重随机分为正常组、模型组、辣椒碱软膏组、温通活血乳膏高剂量组、温通活血乳膏中剂量组、温通活血乳膏低剂量组,每组各20只.各组均给予相应药物治疗8周,以运动神经传导速度(MNCV)和摆尾温度阈值作为指标来评价糖尿病周围神经病变的改善情况,EUSA法检测各组血清TNF-α、IL-1 β、MMP-1、MCP-1的含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠的MNCV显著下降(P<0.05),摆尾温度阈值显著升高(P<0.05),血清TNF-α、IL-1 β、MMP-1、MCP-1均显著升高(P< 0.05);温通活血乳膏对DPN大鼠的MNCV、摆尾温度阈值、血清TNF-α、IL-1 β、MMP-1、MCP-1的效应具有剂量依赖性(P<0.05);不同的剂量对不同的指标,其效应呈现不同的量效关系,不同剂量的温通活血乳膏组与辣椒碱软膏组对DPN大鼠的MNCV、摆尾温度阈值及血清TNF-α、IL-1 β、MMP-1的效应相比,其差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 温通活血乳膏能降低DPN大鼠血清TNF-仪、IL-1β、MMP-1、MCP-1的水平,其机制与调控炎性因子复杂网络有关,且具有明显的剂量依赖性.

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