首页 > 文献资料
-
槲芪散及其君药槲寄生提取物对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响
目的:研究槲芪散及其君药槲寄生对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响.方法: 用不同浓度的槲芪散及其君药槲寄生提取物作用于人肝癌细胞(SMMC-7721)后,用四甲基偶氮唑比色法(MTT)检测SMMC-7721细胞增殖.用实时荧光定量PCR法检测SMMC-7721的端粒酶活性.结果: (1)MTT结果显示槲芪散、槲寄生多糖和总碱能抑制SMMC-7721细胞,随药物作用时间的延长作用增强.(2)槲芪散、槲寄生多糖和槲寄生总碱能明显降低SMMC-7721端粒酶的活性.结论: 槲芪散及槲寄生多糖和总碱均能抑制SMMC-7721增殖,降低SMMC-7721端粒酶的活性.
-
埃克特注射液体内外抗肝癌作用研究
目的:观察埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞及小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用. 方法:用MTT法、细胞生长曲线实验研究不同浓度的埃克特注射液作用48h对SMMC-7721细胞的生长抑制作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,以了解该药物对肝癌细胞的体外增殖作用;同时建立小鼠H22 肝癌移植性实体瘤模型研究埃克特注射液对肝癌的体内抑制作用. 结果:埃克特注射液对SMMC-7721具有抑制作用,呈明显的量效关系,IC50为2.325 mg/L;生长曲线提示埃克特注射液对SMMC -7721细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;Hoechst 33258染色后,给药组出现明显的细胞凋亡形态学变化;腹腔注射0.5、1、2 mg/kg埃克特注射液对小鼠移植性肿瘤H22的抑制率分别为34.37%、42.36%、57.99 %,呈剂量依赖性. 结论:埃克特注射液对人肝癌细胞SMMC-7721细胞具有明显体外抗增殖作用,对小鼠移植性肿瘤H22有一定的抑制作用.
-
siRNA靶向沉默fbxl20基因对肝癌SMMC-7721细胞生物学行为的影响
目的:通过沉默fbxl20基因,以观察基因沉默后对SMMC-7721细胞的增殖、迁移和周期分布的影响.方法:通过脂质体Lipofectamine2000介导转染SMMC-7721细胞,靶向fbxl20基因的siRNA片段阻低肝癌SMMC-7721细胞株fbx120 mR-NA表达.结果:siRNA能有效沉默SMMC-7721细胞fbx120 mRNA的表达,沉默效率为71.49％.MTT试验实验显示:siRNA转染SMMC-7721细胞后,细胞增殖能力显著降低.Transwell小室和划痕愈合实验表明,fbxl20基因被沉默后,SMMC-7721细胞在迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达62.03％.流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染48 h后,SMMC-7721实验组细胞G1/G0期比率(81.21％)显著高于阴性对照组(71.49％)和空白对照组(67.90％).结论:本实验运用RNA干扰技术成功抑制了SMMC-7721细胞中fbxl20基因的表达,并且发现fbxl20基因可能与肝癌细胞的增值和迁移相关.
-
阻断MEK/ERK上调内质网应激条件下CHOP和p53表达
目的:研究MEK/EILK信号途径在肝癌细胞SMMC-7721抵抗内质网应激诱导凋亡中的分子机制.方法:采用MEK特异抑制剂PD98059阻断内质网应激介导的MEK/ERK活化,并利用流式细胞和Western blot技术分析阻断MEK/ERK对内质网应激诱导的细胞凋亡及其关键调控分子GRP78、CHOP和p53表达的影响.结果:阻断MEK/ERK信号途径后,SMMC-7721细胞对内质网应激诱导凋亡的敏感性明显增强,CHOP和p53的蛋白水平显著上调.结论:内质网应激介导的MEK/ERK活化能够通过下调CHOP和p53表达抵抗细胞凋亡.
关键词： MEK/ERK信号途径 内质网应激 细胞凋亡 SMMC-7721 -
景洪哥纳香醇提物对两株人肿瘤细胞体外细胞毒作用初探
目的:观察景洪哥纳香醇提物体外抗肿瘤活性.方法:通过改良MTT法,考察不同浓度的洪哥纳香醇提物体外对人胃癌细胞MKN-28及人肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒作用.结果:100μg/mL景洪哥纳香醇提物对MKN-28、SMMC-7721的细胞增殖抑制率可达95%以上.在一定的剂量范围内,洪哥纳香醇提物对MKN-28的增殖抑制能力具有一定的剂量依赖性,而对SMMC-7721则不明显.其IC50分别为31.02μg/mL、18.88μg/mL.结论:景洪哥纳香醇提物体外对MKN-28、SMMC-7721具有显著的抗肿瘤活性.
-
人类基因XAPC7真核表达载体的构建及其在SMMC-7721细胞中的表达
目的:构建pcDNA3.1(-)/XAPC7真核表达载体并检测其在人肝癌细胞系SMMC-7721中的表达.方法:采用PCR法从pET28b/XAPC7重组质粒中克隆得到XAPC7 cDNA全长序列,将之与pMD18-T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中.构建好的pcDNA3.1(-)/XAPC7真核表达质粒经酶切鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染人肝癌细胞系SMMC-7721,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株,再应用半定量RT-PCR技术检测转染前后该细胞株XAPC7基因的mRNA表达水平.结果:pcDNA3.1(-)/XAPC7经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功;经RT-PCR检测,重组质粒转染株的XAPC7基因mRNA表达水平高于对照组,证实XAPC7基因已经稳定转染到SMMC-7721细胞中并得到表达.结论:成功地建立了人基因XAPC7的稳定转染细胞株,为进一步研究XAPC7的功能奠定了实验基础.
-
辛伐他汀联合吡喃阿霉素对肝癌SMMC-7721细胞的协同抑制作用
目的:研究辛伐他汀联合吡喃阿霉素对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用.方法:辛伐他汀、吡喃阿霉素分别及联合处理细胞48小时,MTT法测量细胞的增殖抑制,按公式计算相互作用指数.结果:按照文献报道计算相互作用指数,相互作用指数小于1.结论:辛伐他汀和吡喃阿霉素对于SMMC-7721有协同抗瘤作用.
-
薏苡仁油注射液对人体肝癌SMMC-7721细胞株体外抗肿瘤作用及机制研究
目的:研究薏苡仁油注射液(KLT)对人体肝癌SMMC - 7721的体外抗肿瘤作用及机制.方法:在人肝癌SMMC - 7721细胞模型上采用CCK -8细胞增殖试验、划痕试验、Transwell小室穿膜试验、Matrigel克隆形成试验观察KLT对细胞增殖、迁移及侵袭的影响；应用流式细胞术检测KLT对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响；Western blot检测KLT对肿瘤细胞中目的基因的表达情况.结果:经KLT作用后的人肝癌细胞生长、迁移及侵袭功能被抑制；流式细胞术检测发现KLT处理的肝癌细胞阻滞于G2/M期,细胞晚期凋亡较明显；KLT上调了cyclin B1的表达,下调了cyclin D1、cyclin E的表达.结论:KLT在体外对肝癌细胞具有良好的抗肿瘤活性,其作用机制可能与其诱导的细胞周期阻滞、细胞凋亡、抑癌基因的上调、癌基因的下调有关.
-
羟基喜树碱通过线粒体途径诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的观察
目的:研究羟基喜树碱是否可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡. 方法: 将不同浓度的羟基喜树碱作用于肝癌细胞SMMC-7721,用MTT法检测细胞增殖,光镜观察细胞形态;用荧光染料MitocaptureTM检测线粒体跨膜电位、用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放;用Annexin Ⅴ-FITC,hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况. 结果:羟基喜树碱对肝癌细胞SMMC-7721的增殖有明显的抑制作用,IC50约是80 mg/L. 当用80 mg/L羟基喜树碱作用不同时间后:线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放;细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核染色质固缩,呈致密浓染的凋亡状态. 结论:羟基喜树碱通过线粒体途径引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.
-
山慈菇含药血清对SMMC-7721细胞侵袭、黏附能力的影响
O引言山慈菇甘、微辛、寒,有小毒,入肝脾经,有消肿散结、化痰清热解毒之功[1].近些年来,山慈菇在临床上作为抗癌药而引起关注.我们采用正常血清和含药血清分别处理SMMC-7721肝癌细胞的方法,利用黏附、侵袭实验检测中药山慈菇对SMMC-7721细胞体外侵袭、黏附能力的影响,进而从细胞水平上探索中药山慈菇对肝癌细胞浸润、侵袭能力的抑制作用.
-
中药甘露1号抑瘤作用的研究
目的探讨中药甘露1号的抑瘤作用及其机制。方法采用在体、离体动物实验观察中药甘露1号煎剂对接种S-180的LACA小鼠、TCR小鼠的抑瘤作用及对SMMC-7721人肝癌细胞生长的抑制作用。结果该煎剂对接种S-180的LACA小鼠、TCR小鼠的抑瘤率为32.3%-55.4%(P＜0.01)。但甘露1号+MTX(氨甲喋呤)复合组的抑瘤率不高于单用MTX的抑瘤效果。在细胞培养实验中，其对SMMC-7721人肝癌细胞生长的抑制随其浓度的提高而增加，呈线性关系。结论甘露1号煎剂对在体动物实验和细胞实验均显示了抑制肿瘤生长的作用。
-
18β-甘草次酸哌嗪衍生物抗肝癌SMMC-7721细胞活性研究
目的 研究18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞增殖的的抑制作用及对凋亡的影响.方法 用18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35以不同浓度、不同时间段处理SMMC-7721细胞,显微镜下观察其对肝癌SMMC-7721细胞形态结构的影响;MTT法检测18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞的增殖抑制率;Hoechst-33258细胞凋亡染色试剂盒检测细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 MTT检测结果表明,18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35能够抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,且呈浓度依赖性(P＜0.05);流式细胞仪检测细胞凋亡率,D35为26.71％、D34为36.95％.结论 18β-甘草次酸哌嗪衍生物D34、D35对SMMC-7721细胞有增殖抑制作用和促凋亡作用,且优于18β-甘草次酸(GA).
-
印度獐牙菜在小鼠体内抗肿瘤作用的实验研究
目的:探讨藏药印度獐牙菜的抗肿瘤作用.方法:利用人肝癌SMMC-7721小鼠模型进行印度獐牙莱体内抗肿瘤实验.结果:藏药印度獐牙菜对小鼠肝癌SMMC-7721有明显的抑瘤作用,能改善小鼠的免疫机能.结论:首次发现藏药印度獐牙菜具有体内抗肿瘤作用,为印度獐牙菜临床治疗肝癌提供了依据.
-
索拉非尼与阿帕替尼对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用比较
目的 比较索拉非尼及阿帕替尼对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用. 方法 设置药物浓度6.25 μg/ml、12.5 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml、200 μg/ml的索拉非尼(索拉非尼组)与阿帕替尼(阿帕替尼组)分别作用于SMMC-7721细胞.采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]比色法检测索拉非尼、阿帕替尼对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用,细胞划痕实验比较两种药物对SMMC-7721细胞迁移的影响,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测两种药物作用细胞后,其上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor, VEGF)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)的浓度. 结果 (1)随着给药浓度的增加,索拉非尼、阿帕替尼对细胞增殖的抑制作用增强;且同一药物浓度下,索拉非尼组生长抑制率均高于阿帕替尼组,差异有统计学意义(P＜0.001).(2)索拉非尼组、阿帕替尼组和对照组细胞迁徙面积比率分别为(0.26±0.012)%、(0.46±0.011)%和(0.66±0.023)%,三组迁徙面积比率差异有统计学意义(F=746.020,P＜0.001),进一步两两比较显示,索拉非尼组的迁徙面积小于阿帕替尼组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)药物作用后细胞上清液中VEGF、TNF-α、IL-6浓度,索拉非尼组均低于阿帕替尼组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 索拉非尼、阿帕替尼都对SMMC-7721细胞的增殖、迁移、细胞因子均有抑制作用,且索拉非尼作用强于阿帕替尼.
-
顺铂对肝癌细胞株SMMC-7721中SATB1表达的影响
目的:探讨肝癌细胞株SMMC -7721加入顺铂后细胞形态及特异AT序列结合蛋白1(special AT-rich sequence-binding protein 1,SATB1)表达的变化.方法:SMMC-7721细胞株中加入不同浓度(0、2.5、5和10μg/ml)顺铂培养24 h后,在倒置显微镜下观察细胞形态变化,半定量逆转录RT-PCR法检测SATB1 mRNA的表达,Western blot检测SATB1蛋白的表达.结果:SMMC-7721细胞与不同浓度顺铂共培养24 h后,倒置显微镜下可见细胞形态明显改变,细胞数减少,损伤、死亡的细胞增多.SATB1 mRNA及蛋白的表达均随着顺铂浓度的增加而减少,其中5和10μg/ml顺铂组与对照组间的差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:顺铂可抑制SMMC-7721细胞增殖及SATB1的表达,从而达到抑制肝癌细胞生长的目的.
-
氯化镉和顺铂联合对人肝癌细胞增殖的抑制作用
背景与目的:研究氯化镉和顺铂联合对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.材料与方法:采用MTr法测定不同浓度氯化镉和顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用;应用两药相互作用指数进行联合作用分析.结果:0.56、1.12、2.25 μg/ml的氯化镉联合0.25、0.5、1.0 μg/ml的顺铂可协同抑制SMMC-7721增殖,且随着作用时间延长,协同抑制作用增强(P＜0.05或P＜0.01).结论:氯化镉与顺铂联合应用可以协同抑制人肝癌细胞SMMC,-7721的增殖.
