首页 > 文献资料
-
清开灵注射液及其中间品对RBL-2H3细胞增殖的影响
目的:研究不同浓度的清开灵注射液及其生产过程中的中间品对RBL-2H3细胞增殖的影响,建立相应类过敏细胞模型及利用该模型评价清开灵注射液及其中间品的不良反应,进而为全流程监控药品质量奠定基础.方法:将清开灵注射液及其中间品分别以体积比1/4为初始浓度,2倍稀释至1/4 096,共11个浓度作用于RBL-2H3细胞,于倒置显微镜下观察细胞形态,用四甲基偶氮唑盐法测定不同浓度清开灵注射液及其中间品对RBL-2H3细胞生长的抑制作用,并计算细胞增殖的半数抑制浓度(IC50).结果:较低浓度的清开灵注射液及其中间品对RBL-2H3细胞生长有轻度促进作用,随着药液浓度的增加,对RBL-2H3细胞生长的抑制作用逐渐明显,细胞存活率显著降低(P＜0.05),到1/4浓度时,抑制率接近100％.结论:测定并计算清开灵各中间品的IC50,可用于进一步建立相应类过敏细胞模型,评价清开灵注射液及其中间品的不良反应及全流程的监控药品质量.
-
大鼠皮肤类过敏试验的方法学研究及适用性考察
目的：研究大鼠皮肤类过敏试验方法的适用性和可靠性,对中药注射剂潜在的类过敏反应进行检测和评价。方法以C48/80为工具药物,对可能影响大鼠皮肤类过敏试验的灵敏度和可靠性因素进行比较研究,优选佳试验条件,选用 Tween80、内毒素、中华眼镜蛇毒素、天花粉蛋白注射液、痰热清注射液和血塞通注射液进行考察和应用。结果大鼠皮肤类过敏反应试验方法佳条件为：采用胰岛素注射器(口径0.33 mm)进行药物注射,50～100μL/点,给药后立即尾静脉注射0.5%伊文思蓝染液1 mL,15 min时颈动脉放血处死大鼠,剪取背部皮肤处理。采用该方法,Tween80、内毒素、中华眼镜蛇毒素、天花粉蛋白注射液均呈现一定的诱导大鼠皮肤出现蓝斑的能力,痰热清注射液给予临床剂量无蓝斑出现。血塞通注射液临床剂量虽可引起大鼠皮肤蓝斑,但不排除与因其本身的药效作用干扰所致。结论该方法操作简便,试验周期短,需用药量少,检测敏感性高,结果重复性好,但易受药物本身特性干扰而出现假阳性。
-
大鼠皮肤类过敏试验评定标准的探讨
该研究通过对大鼠皮肤类过敏试验各项特征指标的研究,选定同只动物给药部位皮肤蓝斑OD与对照部位皮肤蓝斑OD比值(K)作为新的评定标准.并以有临床类过敏反应报道的常用造影剂、中药注射剂和注射剂原料药或辅料为受试药物进行大鼠皮肤类过敏试验,以对K进行界定:K＞2为类过敏反应阳性;1.2≤K≤2为类过敏性可疑;K＜1.2为类过敏反应阴性.以此标准对受试药物的类过敏性进行评定.评定结果与经典标准的评定结果进行比较,以考察K的适用性.比较结果显示,以K作为大鼠皮肤类过敏试验的评定标准,可更真实地反映皮肤蓝染的实际情况,同时将因动物个体因素造成的误差降到低.其阳性、可疑、阴性3级标准相对蓝斑直径阳性、阴性2级标准,具有更为客观、准确的特点,建议尝试选择K作为药物致大鼠皮肤类过敏反应的评定标准.
-
啮齿类动物类过敏试验模型的建立
目的:以不同浓度的聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)为对象,建立一种简便易行的清醒小动物类过敏试验方法,用于中药注射剂的类过敏反应筛选和评价.方法:所有受试物均含有0.4%伊文思蓝,各组分别iv给予受试药小鼠20 mL·kg-1,豚鼠30 mL·kg-1,给药后观察30 min内动物的行为学变化,耳廓蓝染情况,测定小鼠双耳丙酮生理盐水浸液的吸光度.结果:小鼠iv0.5%～10%吐温-80溶液、含0.5%～10%吐温-80的鱼腥草蒸馏液、150～600 mL·kg-1双黄连粉针剂;豚鼠iv0.25%～1.0%吐温-80溶液、含0.25%～1.0%吐温-80的鱼腥草蒸馏液、54 mg·kg-1双黄连粉针剂,均可造成小鼠和豚鼠耳廓不同程度蓝染,并且各组随着剂量增高,耳廓蓝染面积增大、染色加深.鼠耳经丙酮生理盐水液浸泡后,用半自动生化仪检测,发现伊文思蓝渗出量与肉眼观察结果基本一致.结论:利用小鼠和豚鼠耳廓血管通透性测试,可以作为筛选中药注射剂类过敏反应的模型,是一种简便易行的清醒小动物类过敏试验方法.
-
清开灵注射液对人血清补体和RBL-2H3细胞影响的体外研究
目的 体外研究清开灵注射液对人血清补体和RBL-2 H3细胞的影响.方法 采用ELISA法检测清开灵注射液对人血清补体末端复合物SC5 b-9含量的影响.将不同批号、不同浓度的清开灵注射液与RBL-2 H3细胞共孵育,作用45min后,显微镜下观察细胞脱颗粒,显色法测定β-氨基己糖苷酶释放度和ELISA法测定组胺释放量.结果 清开灵注射液能使人血清中SC5 b-9含量降低,与PBS组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；能刺激RBL-2 H3细胞释放组胺和β-氨基己糖苷酶,与阴性组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 清开灵注射液不能引起补体系统激活,可以直接刺激肥大细胞脱颗粒释放组胺和β-氨基己糖苷酶.其在临床引起的不良反应可能为非补体激活相关的类过敏反应.
-
脂微球替代增溶剂消除维生素K1注射液的严重不良反应
目的 维生素K1注射液产生的类过敏反应是其严重的不良反应,本实验拟用脂微球替代增溶剂的维生素K1脂微球以消除类过敏反应.方法 Beagle犬分别静脉注射维生素K1脂微球和维生素K1注射液,比较行为学、血压、血浆IgE、组胺等指标的变化.用分光光度法和流式细胞术检测RBL-2H3细胞的脱颗粒及细胞凋亡.结果 维生素K1注射液能诱发犬Ⅳ级及以上类过敏症状,评分(16.8±1.6)(P＜0.01),血浆组胺升高(P＜0.05),血压下降(P＜0.01).维生素K1注射液可以诱导RBL-2H3细胞释放组胺和β-氨基己糖苷酶,导致细胞凋亡.而维生素K1脂微球不引起犬发生异常行为,不升高血浆组胺,不引起RBL-2H3细胞释放颗粒和细胞凋亡.维生素K1注射液和维生素K1脂微球组血浆IgE均无明显变化.结论 维生素K1注射液能够引起类过敏反应,而不引起过敏.维生素K1脂微球既不引起类过敏反应也不引起过敏反应.
-
布比卡因类过敏反应1例
1 病历报告患者,女,35岁,60kg,于2007年4月5日在硬膜外麻醉下行子宫肌瘤挖除术.既往无药物过敏史,无麻醉手术史.血常规:RBC 4.5×1012/L,wBC 8.2×109>/L,PT 12.5s.麻醉经过:人手术室后,监测HR、ECG、NIBP、SpO2.
-
清开灵注射液及其中间品类过敏反应的实验研究
目的:研究清开灵注射液及其生产过程中的中间品对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响,评价清开灵注射液及其中间品的类过敏反应.方法:将清开灵注射液以5个不同浓度稀释,其中间品以IC50浓度稀释,分别作用于RBL-2H3细胞,45 min后,底物显色法测定β-氨基己糖苷酶释放度;ELISA法测定组胺释放量.结果:不同浓度的清开灵注射液对RBL-2H3细胞脱颗粒程度并无浓度依赖性,但高浓度下脱颗粒程度相对较高.同时,在其不同中间品中,金银花促进RBL-2H3细胞脱颗粒作用明显.结论:在体外,不同浓度的清开灵注射液均可不同程度的引起肥大细胞脱颗粒,释放活性物质,引起类过敏反应,而金银花可能是致敏的主要成分.本研究为进一步研究清开灵注射液不良反应的作用机制提供实验依据.
-
血塞通注射液对人血清补体系统影响的体外研究
目的:体外研究血塞通注射液对人血清补体系统的影响,探讨血塞通注射液引起类过敏反应的发生机制.方法:采用体外补体激活评价模型,研究血塞通注射液对人血清补体系统的影响,将血塞通注射液与人体血清共同孵育30 min,采用ELISA法检测血塞通注射液对人血清补体末端复合物SC5b-9含量的影响.结果:血塞通注射液能使人血清中SC5b-9的含量降低,与PBS组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:血塞通注射液不能引起人血清补体系统的激活,其引起的类过敏反应与补体激活途径无关.
-
注射用双黄连的类过敏反应与影响因素的研究
目的:本研究以大鼠为实验动物,探讨注射用双黄连剂的类过敏反应,发掘其影响因素.方法:建立注射用双黄连类过敏研究方法-肥大细胞脱颗粒实验,进行注射用双黄连的类过敏性及类过敏影响因素的研究.结果:类过敏反应与注射用双黄连的给药剂量和给药速度有关.结论:临床应用注射用双黄连时,应严格掌握其滴速和剂量.
-
基于实时细胞分析的化合物48/80诱导肥大细胞脱颗粒评价研究
药物引起的过敏/类过敏反应是临床常见的不良反应之一.传统的过敏/类过敏反应评价方法多选用豚鼠,通过考察给药后豚鼠出现的喷嚏、抓鼻、呼吸困难、抽搐昏倒或死亡等现象,以判断药物是否可以引起过敏/类过敏反应[1],存在实验周期性长、灵敏度低、误差大等缺点.大量研究表明[2],药物作用于肥大细胞,激活并释放活性介质是引发过敏/类过敏反应的直接原因.因此,体外检测肥大细胞脱颗粒可以反映药物是否可以引起过敏/类过敏反应.
-
钙离子变化应用于中药注射剂类过敏性评价的可行性研究
目的:研究通过检测RBL-2H3细胞内钙离子变化评价中药注射剂类过敏性的可行性.方法:不同浓度的C48/80作用RBL-2H3细胞后,FlexStation检测RBL-2H3细胞内钙离子变化,显色法检测β-氨基己糖苷酶释放率,比较钙离子变化与β-氨基己糖苷酶释放率的一致性.选择6种临床常用中药注射液:参麦注射液、注射用血塞通、脉络宁注射液、舒血宁注射液、痰热清注射液及热毒宁注射液,检测各中药注射液对RBL-2H3细胞内钙离子浓度及β-氨基己糖苷酶释放率的影响.结果:与对照组相比,加入200、400、600μ g/ml的C48/80后,钙离子浓度和β-氨基己糖苷酶释放率均随C48/80浓度的升高而明显增大,钙离子变化与β-氨基己糖苷酶释放率变化趋势一致.各中药注射液中,26.66ml/L的参麦注射液显著升高RBL-2H3细胞内钙离子浓度,但对β-氨基己糖苷酶释放率无明显影响,其余中药注射液对RBL-2H3细胞β-氨基己糖苷酶释放率及胞内钙离子浓度均无明显变化.结论:以细胞内钙离子浓度变化作为检测药物类过敏的方法,有可能在早期更便捷、迅速的对药物进行安全性筛查,但是在对药物的安全性进行整体评价时,仍需要对应传统的检测方法,以便评价结果的真实可靠.
-
浅析中药注射液体外类过敏检测方法
随着中药注射液的广泛应用,对其严重不良反应之一类过敏反应的研究凸显出重大意义.本文就检测方法中细胞株、阳性药、检测指标及ELISA试剂盒等方面进行综述,旨在优化中药注射液体外类过敏的检测方法.
-
小鼠耳廓蓝染类过敏检测方法用于注射益气复脉(冻干)的质控研究
目的 对小鼠耳廓蓝染类过敏检测法进行方法学的验证和优化,建立注射用益气复脉(冻干,YQFM)质控方法.方法 小鼠1次性尾iv含0.4％依文思蓝(EB)的受试物,以耳廓蓝染发生率和EB渗出量作为类过敏评价指标,以Compound 48/80为阳性对照,考察了方法的重复性、鼠耳萃取时间等影响因素,并对20140105和20140804两个批次YQFM(1 800 mg/kg)进行了耳廓蓝染类过敏试验.结果 Compound 48/80具有明显的致类过敏反应,模型稳定,重复性好;鼠耳在加入甲酰胺后室温下浸泡2～5 d进行萃取,EB含量未发生显著变化;YQFM 20140105和20140804两个批次均未发生类过敏反应.结论 小鼠耳廓蓝染类过敏检测方法较稳定,可用于YQFM质量控制.
