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慈菇消脂丸提取工艺试验研究
目的:确定慈菇消脂丸的佳水提取工艺条件.方法:以提取物中总黄酮总量为检测指标,采用正交试验法,分别考察加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素对提取率的影响.结果:煎煮次数对检测指标影响大,佳提取工艺为A1B3C3,即加8倍量水,煎煮3次,每次1.5小时.结论:实验结果对制剂生产实践具有重要的指导意义.
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慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂毒性及氧化应激的影响
目的 观察慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏脂质代谢及抗氧化能力的影响,探讨其相关作用机制.方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和中药高、中、低剂量组.采用高脂饲料饲喂大鼠建立NASH模型,造模同时给予相应药物干预.造模12周,实验大鼠全部处死,取大鼠肝脏和血清.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、游离脂肪酸(FFA)及肝组织匀浆T-SOD、MDA、GSH-Px、FFA,HE染色观察肝组织病理形态,透射电镜观察肝细胞超微结构,油红 O 染色观察肝细胞脂肪变性.结果 造模大鼠肝组织呈中重度脂肪变性并伴有炎症细胞浸润.与正常组比较,模型组大鼠肝湿重、肝指数和血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、MDA、FFA及肝组织匀浆MDA、FFA均明显升高(P<0.05,P<0.01),血清及肝组织匀浆T-SOD、GSH-Px明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药高剂量组血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、MDA、FFA明显降低,肝组织匀浆MDA、FFA明显降低(P<0.05,P<0.01),血清及肝组织匀浆T-SOD、GSH-Px明显升高(P<0.01).病理观察显示,与模型组比较,中药各剂量组大鼠肝小叶内空泡样变、脂肪样变减少,炎性细胞浸润明显改善.结论 慈菇消脂丸能明显改善模型大鼠肝功能及血脂水平,提高肝脏抗氧化能力,减轻脂质过氧化损伤,达到防治NASH的目的.
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慈菇消脂丸中大黄素和大黄酚含量的测定
目的 采用高效液相色谱法测定慈菇消脂丸中大黄素、大黄酚的含量.方法 采用Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5.0 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15),流速:0.8 mL/min;检测波长:423 nm;柱温:20℃.结果 大黄素、大黄酚在0.25～0.75μg范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为98.0%(RSD=1.5%)、99.6%(RSD=1.8%).结论 本方法稳定、简便易行,为慈姑消脂丸的生产提供了质量依据.
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慈菇消脂丸对非酒精性脂肪肝炎大鼠肝组织脂质过氧化与TNF-α表达的影响
目的:研究中药慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响.方法:50只雄性SD大鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)、慈菇消脂丸高剂量组(n=10)、慈菇消脂丸低剂量组(n=10)、东宝肝泰阳性药物对照组(n=10),正常对照组给予基础饲料,其余4组建立非酒精性脂肪肝炎大鼠模型,同时给予中药和阳性药物干预.实验结束后处死大鼠取出肝组织,观察肝组织病理形态学的变化,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、和肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷光苷肽过氧化物酶(GPX).分别用免疫组化技术和RT-PCR法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)在肝脏的表达.结果:模型组大鼠肝组织出现脂肪变性及不同程度的炎性细胞浸润,镜下可见肝细胞内大量脂滴.中药治疗组及阳性药物对照组大鼠脂肪性肝炎明显减轻.与模型组比较,中药治疗组和阳性药物对照组大鼠血清TG,TC,ALT,AST和肝脏MDA明显降低,而SOD,GPX活性明显增加.正常组大鼠肝组织内几乎无TNF-α mRNA和蛋白表达.与正常组相比,模型组TNF-α mRNA及蛋白表达显著增加(P＜0.05).与模型组比较,中药治疗组及阳性药组大鼠肝组织内TNF-α mRNA和蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);且中药高剂量治疗组作用较阳性药组显著(P＜0.05).结论:TNF-α在大鼠非酒精性脂肪肝炎中发挥着重要作用,慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪肝炎具有明显的防治作用,其作用机制可能与改善肝组织脂肪变性程度、抑制脂质过氧化、抗炎有关.
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慈菇消脂丸对酒精性脂肪性肝病大鼠血清APN与TNF-α的影响
目的 研究慈菇消脂丸对酒精性脂肪性肝病(AFLD)大鼠血清脂联素(APN)与肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响,探讨其作用机制.方法 用高脂饲料喂食加乙醇灌胃的方法复制酒精性脂肪肝模型.随机分为正常组、模型组、慈菇消脂丸高剂量组、中剂量组、低剂量组、罗格列酮阳性药物对照组.慈菇消脂丸对模型大鼠治疗4周后,观察模型大鼠肝组织病理形态学的变化;血清肝功能、APN和TNF-α含量变化.结果 模型组大鼠肝小叶内出现大量脂肪变性,汇管区伴有炎性细胞浸润以及部分点状肝细胞坏死.与正常组相比较,模型组大鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TNF-α均升高,APN明显下降.与模型组相比较,慈菇消脂丸各剂量组,肝脏脂肪变性和炎症均有不同程度的减轻.慈菇消脂丸能降低模型大鼠ALT、AST、TNF-α含量,对APN亦有较为明显的改善,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 慈菇消脂丸具有改善肝功能,调节TNF-α和APN这2种脂质因子,减轻肝细胞脂肪变性,从而起到对酒精性脂肪性肝病的治疗作用.
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慈菇消脂丸对NF-κB介导的非酒精性脂肪肝病大鼠肝细胞凋亡的干预作用
目的 通过观察慈菇消脂丸对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡相关调控基因核转录因子κB(NF-κB)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,探讨解毒化痰法治疗NAFLD的作用机制.方法 60只SPF级健康雄性Wistar大鼠,随机分为6组:正常对照组,模型组,慈菇消脂丸高、中、低剂量组,盐酸吡格列酮组,每组10只.采用高脂饮食喂饲大鼠建立NAFLD模型后,连续药物治疗6周.给药结束后,处死全部动物,取肝脏和血清.全自动生化分析仪检测各组大鼠肝功、血脂;HE染色观察肝脏的组织形态学特点;透射电子显微镜观察肝细胞的超微结构;Western Blot技术检测肝组织NF-κB、Bcl-2、Bax的表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平升高(P＜0.01);肝组织呈中重度脂肪变性并同时伴有肝细胞凋亡;肝组织中NF-κB、Bax蛋白表达增强(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达减低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.01).与模型组比较,慈菇消脂丸各剂量组大鼠血清ALT、AST、TG、TC水平降低(P＜0.01);肝组织NF-κB、Bax蛋白表达减低(P＜0.01),Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).与盐酸吡格列酮组比较,慈菇消脂丸高剂量下调NF-κB蛋白、上调Bcl-2蛋白表达的作用更显著(P＜0.01).结论 慈菇消脂丸能够明显改善NAFLD大鼠肝功及血脂;上调Bcl-2蛋白表达,降低NF-κB、Bax蛋白表达,使Bcl-2/Bax比值升高,从而抑制肝细胞凋亡,起到防治NAFLD的作用.
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慈菇消脂丸对脂肪肝大鼠脂代谢和超氧化物歧化酶的影响
目的:探讨慈菇消脂丸治疗脂肪肝的作用机理.方法:按大鼠体重0.2mL/100g40%四氯化碳豆油溶液合并高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型7周后,模型组灌胃(ig)给予等体积豆油溶液,阳性对照组给予东宝肝泰片0.32mg·kg-1·d-1,慈菇消脂治疗低、中、高剂量组(ig)给予慈菇消脂丸0.4、0.8、1.6mg·kg-1·d-1,连续8周,正常大鼠作为空白对照组.测定肝脂数、血清血脂,观察脂质过氧化作用结果.结果:慈菇消脂丸各组超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)含量显著降低,组织学检查显示肝内脂变减轻.结论:慈菇消脂丸使实验性脂肪肝的肝脂数和血清血脂含量降低,即抑制肝脂合成、促进肝脂代谢,升高SOD活性而有抗氧化作用,从而对实验性脂肪肝有显著抑制作用.
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慈菇消脂丸的质量标准研究和总黄酮含量测定
目的:建立慈菇消脂丸制剂成分鉴别及复方的总黄酮含量测定.方法:生山楂、决明子、何首乌等的薄层鉴别,决明子、何首乌中大黄素、大黄酚的HPLC含量测定,以及硝酸铝-亚硝酸钠法(UV)测定复方中总黄酮含量.结论:为慈菇消脂丸新药研发提供质量控制.
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慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝病iNOS、eNOS表达的影响
目的 观察中药慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝病的防治作用.方法 建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,随机分为正常对照组、模型对照组、慈菇消脂丸高剂量组、慈菇消脂丸低剂量组、阳性对照组,观察肝组织病理形态学的变化.免疫组化技术检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肝脏的表达.结果 模型组大鼠肝组织出现脂肪变性及不同程度的炎性细胞浸润,镜下可见肝细胞内大量脂滴.与正常组相比较,模型组大鼠肝组织内iNOS蛋白表达显著提高,eNOS蛋白表达降低(P＜0.01)；与模型组相比较,中药治疗组大鼠肝组织内iNOS蛋白表达显著降低,eNOS蛋白表达提高；与阳性药物对照组相比较,中药慈菇消脂丸高剂量组作用显著(P＜0.05).结论 慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝病具有明显的防治作用,其作用机制与改善肝组织脂肪变性程度、抑制脂质过氧化、抗炎有关.
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慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用
目的 观察中药慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用.方法 建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型,随机分为正常组、模型组、慈菇消脂丸高剂量组、慈菇消脂丸低剂量组、东宝肝泰阳性药物对照组,观察肝组织病理形态学的变化,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量.免疫组化技术检测环氧合酶-2(COX-2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肝脏的表达.结果 模型组大鼠肝组织出现脂肪变性及不同程度的炎性细胞浸润,镜下可见肝细胞内大量脂滴.与正常组相比较,模型组大鼠肝组织内SOD活性显著降低,MDA、NO含量显著提高,COX-2、iNOS蛋白表达显著提高,差异具有统计学意义;与模型组相比较,中药治疗组大鼠肝组织内SOD活性显著提高,MDA、 NO含量显著降低,COX-2、 iNOS蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义;中药慈菇消脂丸高剂量组作用亦较阳性药物对照组显著.结论 慈菇消脂丸对大鼠非酒精性脂肪性肝炎具有明显的防治作用,其作用机制与改善肝组织脂肪变性程度、抑制脂质过氧化、抗炎有关.
