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响应面法优化虎杖苷转化为白藜芦醇的工艺条件
目的:应用响应面优化虎杖苷转化为白藜芦醇的酶解工艺条件,提高活性成分白藜芦醇的含量,为虎杖药材的资源开发提供参考.方法:以白藜芦醇提取量为指标,在单因素试验基础上,通过响应面法考察酶用量、酶解温度、时间及pH对白藜芦醇提取量的影响.使用UV测定白藜芦醇含量,检测波长305 nm.结果:佳酶解工艺条件为酶用量463 μL,温度43℃,酶解pH5.0,酶解时间153 min;白藜芦醇平均提取量16.46 mg·g-1,与模型预测值16.52 mg·g-1偏差较小,是未经酶转化前样品中白藜芦醇含量的3.58倍,是酶水解工艺的1.66倍.结论:通过响应面分析法优选虎杖中虎杖苷转化为白藜芦醇的工艺可行性较好,为降低白藜芦醇的工业化生产成本提供参考.
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生物酶提取乌骨鸡的工艺研究与药效验证
目的 以乌骨鸡为原料,优选生物酶酶解乌骨鸡的工艺条件.方法 以光密度法测定酶解液氨基酸为指标,对酶解温度、时间、pH和酶底比进行比较,用正交试验设计法筛选酶解佳工艺条件.以乌鸡白凤丸补气养血、调经止带主要药效为指标,对酶解提取工艺进行验证.结果 确定酶解方案为先用pH 8.3的人工肠液湿润,90 ℃加热,降温后转入50 ℃恒温水浴,加入12 000 U中性蛋白酶酶解4 h.结论 以乌骨鸡酶解工艺入药的乌鸡白凤丸不仅保持了原制剂工艺的作用,酶解工艺对测试的各项指标均有明显的改善作用,显示出良好的效果.
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林蛙皮的酶解工艺及抗氧化作用
目的 优选林蛙皮酶解制备工艺,并研究其抗氧化作用.方法 采用酶解法,通过单因素考察试验和L9(34)正交实验,以水解度作为考察指标,对酶解工艺进行筛选;通过林蛙皮酶解液对羟基自由基,超氧阴离子及DPPH自由基的清除作用,研究其抗氧化能力.结果 林蛙皮的佳酶解工艺为:料液比1:15,pH 6.5,中性蛋白酶加入量为3000 U/g,45℃下水浴2 h,90℃灭酶10 min,离心,得林蛙皮酶解液,此酶解液对羟基、超氧阴离子及DPPH自由基的清除率在一定范围内随浓度的升高而加强.结论 通过正交实验,得到中性蛋白酶酶解林蛙皮的佳生产工艺,工艺合理可行,其酶解液具有良好的抗氧化活性,为林蛙皮进一步的化学及药理研究奠定了基础.
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仿生酶解法提取土鳖虫的工艺研究
目的:研究土鳖虫仿生酶解的工艺条件.方法:在胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解温度已固定的基础上,以PT/APTT为指标,筛选酶底比和酶解时间主要工艺参数;并以血小板聚集率、血凝-纤溶动态图为指标,对酶解法提取土鳖虫的工艺合理性进行考察.结果:土鳖虫酶解条件为:37℃人工胃液温浴30min,再加入2.0％(酶底比)胃蛋白酶酶解3h,残渣转入45℃人工肠液,加入4％(酶底比)胰蛋白酶酶解2h.结论:该工艺条件简单、稳定.
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阿胶低肽酶解工艺的实验研究
阿胶为马科动物驴Equus asinus L.的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶.性味甘、平,归肺肝肾经,功能补血、止血、滋阴润燥,主治血虚证,另可作肿瘤的辅助治疗~([1,2]).阿胶主含胶原蛋白,但胶原蛋白的消化吸收需要蛋白酶参与降解,而适应症人群则常见脾胃虚弱或胃肠道反应,服用阿胶不仅会造成患者消化系统的负担,而且药效也不能得到充分的发挥.
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复合酶酶解蜈蚣粉工艺优化
目的 优化复合酶酶解蜈蚣粉佳酶解工艺.方法 采用正交试验法探究酶解温度、酶解时间、pH值及单个酶酶活力对蜈蚣复合酶酶解液冻干粉对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制率的影响,并确定佳酶解工艺条件.结果 蜈蚣复合酶佳酶解工艺条件为酶解温度35℃、酶解时间3 h、pH值为8.0及单个酶酶活力2000 U/g,在此工艺条件下,蜈蚣复合酶酶解液冻干粉对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率为61.67％.结论 通过实验验证此工艺可行,蜈蚣复合酶酶解液冻干粉对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率较高.
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泥螺多肽酶解工艺的研究
本文采用胰蛋白酶水解海洋生物泥螺的软体组织,进行多肽的制备工艺分析研究,以期获得较纯的多肽.本文以泥螺多肽酶解度为指标,通过L16(45)正交实验和酶解条件优化实验确定多肽的佳酶解工艺.结果 表明:胰蛋白酶酶解泥螺蛋白制备多肽的佳酶解条件为:温度45℃、料液比1∶4、pH 8.7、酶解时间8h、加酶量0.48%.
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蜈蚣酶解工艺优化及抗肿瘤活性研究
目的:优化蜈蚣酶解工艺并探究酶解液产物体外抗肿瘤活性.方法:采用胰蛋白酶进行酶解,以水解度为指标,在单因素实验基础上,通过响应面法优化酶解工艺.结果:蜈蚣的佳酶解条件为酶解温度49.6℃,酶解pH为7.62,酶解时间7小时,加酶量3000U.在优条件下,平均水解度为17.77％.体外抗肿瘤试验表明蜈蚣酶解液产物具有较优增殖抑制效果,对肺腺癌A549细胞株、乳腺癌MCF-7细胞株及喉癌Hep-2细胞株的IC50值分别为1.822mg/ml、1.142mg/ml和1.404mg/ml.结论:此工艺稳定可行,可应用于蜈蚣酶解工艺的优化;其抗肿瘤效果优良.
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海蜇多肽的制备工艺及体外抗氧化活性的研究
用胰蛋白酶酶解提取海蜇多肽,探索不同的酶解条件对酶解工艺的影响,并从还原体系、羟自由基清除体系、DPPH自由基清除体系等三个方面,对海蜇酶解多肽的提取制备工艺及体外抗氧化活性进行研究.结果表明:海蜇不同部位酶解物具有不同的佳酶解条件.当处于佳酶解条件时,海蜇头和海蜇皮的氨基氮含量高值分别为15.25%和48.13%,对羟基自由基的清除率分别为77.95%和78.72%,其中DPPH自由基的清除率分别为52.41%和59.24%,其还原力大小用吸光值表示分别为0.459和0.507.
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砒霜酶解工艺研究
目的:研究砒霜有效成分三氧化二砷(As2O3)的佳酶解工艺.方法:本实验研究所用试剂为分析纯的As2O3,采用半仿生酶解法,按照进入消化系统顺序,先筛选出仿胃的佳酶解工艺,在此基础上进行仿肠酶解.以酶底比、酶解时间和pH值为考察因素,设计正交试验,用二乙基二硫代氨基甲酸银法测定可溶解的相对砷离子含量,以砷转化率为指标,选择佳酶解工艺.结果:仿胃以A2B1C2酶解后砷转化率高,仿肠以A2B2C3酶解后砷转化率高.结论:仿胃在pH＜2.0的环境,酶底比为1,酶解时间为60 min的酶解工艺佳,砷的转化率高.仿肠在pH=7.5,酶底比为1.5,酶解时间为360 min时的酶解工艺佳,砷转化率高.
