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“双固一通”电针对老年阳虚大鼠抗疲劳能力及肝脏线粒体呼吸功能的影响
目的:探讨“双固一通”电针治疗对老年阳虚模型大鼠抗疲劳能力及其肝脏线粒体呼吸功能的影响.方法:SD雄性大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、“双固一通”电针组、电针对照组.除正常对照组外,其余3组大鼠每日皮下注射D-半乳糖再肌肉注射氢化可的松制作老年阳虚模型.“双固一通”电针组取“关元”“后三里”“百会”,电针对照组取“中极”“阴陵泉”“印堂”,每次治疗15 min,每周治疗6次,共4周.以游泳力竭实验潜伏期判定大鼠抗疲劳能力；采用Clark氧电极法检测肝脏线粒体的呼吸功能,包括Ⅲ态呼吸耗氧速率(R 3)、Ⅳ态呼吸耗氧速率(R 4)、呼吸控制率(RCR)以及磷氧比值(P/O).结果:各组大鼠平均游泳力竭时间比较,模型组较正常对照组明显缩短(P＜0.01),“双固一通”电针组比模型组明显延长(P＜0.01),且“双固一通”电针组与电针对照组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).大鼠肝线粒体R3各组间未显示明显差异；模型组R4较正常对照组明显增加(P＜0.01),“双固一通”电针组较模型组明显降低(P＜0.01),且“双固一通”电针组与电针对照组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05)；各组大鼠肝线粒体RCR和P/O比较,模型组两项指标较正常对照组均明显降低(P＜0.01),而“双固一通”电针组两项指标较模型组均明显升高(P＜0.01,P＜0.05),电针对照组两项指标与“双固一通”电针组比较明显降低(P＜0.05).结论:“双固一通”配穴电针治疗能明显改善老年阳虚模型大鼠抗疲劳能力,可能与其能降低老年阳虚模型大鼠肝脏细胞线粒体R4,提高其RCR及P/O,改善肝脏线粒体呼吸功能,继而改善机体代谢有关,且“双固一通”电针疗效优于“中极”“阴陵泉”“印堂”配伍电针治疗.
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电压门控钙通道蛋白在循经部位组织细胞兴奋传导中的作用研究
目的:探索循经感传的物质基础.方法:SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为常态组、常态针刺组、维拉帕米阻断组和0.9%NaC1溶液阻断组(对照组),每组15只.常态组及常态针刺组大鼠首先于足阳明胃经股骨段循经受观测部位(简称循经受观测部位)及邻近非经受观测部位(简称非经受观测部位)注射Fluo 3-AM(钙离子荧光探针)后孵育;维拉帕米阻断组先于循经受观测部位及非经受观测部位用维拉帕米注射液局部注射,再在循经和非经受观测部位注射Fluo3-AM后孵育;对照组用0.9%NaC1溶液局部注射,再在循经和非经受观测部位注射Fluo 3-AM后孵育.分别记录各组注射后的循经与非经受观测部位细胞内Ca2+成像变化大于20 min.后3组均在上述操作完成后,立即针刺"后三里",并连接电针1 min,记录循经受观测部位和非经受观测部位细胞内Ca2+成像变化大于20 min.结果:常态组循经受观测部位细胞内Ca2+荧光强度高于非经受观测部位;常态针刺组循经受观测部位针刺后细胞内Ca2+荧光强度较针刺前明显增强,非经受观测部位针刺前后细胞内Ca2+荧光强度未见明显变化;维拉帕米阻断组维拉帕米注射液局部阻断后,循经受观测部位细胞内Ca2+荧光强度针刺后未见增强,非经受观测部位针刺前后细胞内Ca2+荧光强度未见明显变化;对照组0.9% NaC1溶液局部注射后,循经受观测部位及非经受观测部位细胞内Ca2+荧光强度未见明显变化,针刺前后细胞内Ca2+荧光强度未见明显变化.结论:循经部位电压门控钙通道(voltage-gated calcium channels,VGCCs)状态与循经部位组织细胞兴奋传导具有高度相关性.
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切断大鼠胃经沿线脂肪条带结构远心端的针刺效应
目的:观察切断大鼠胃经沿线脂肪条带结构远心端后对针刺镇痛效应的影响.方法:沿大鼠"后三里"腧穴下方8mm处的胃经沿线脂肪条带结构上,手术切除6mm,2周后针刺"后三里",测定针刺前后痛阈,并与术前针刺痛阈进行对比.结果:切断大鼠胃经沿线脂肪条带结构远心端,针刺前的痛阈(6.77±1.38)与针刺后的痛阈(7.13±1.19)比较,未发现有意义的变化(P＞0.05),与切断前针刺痛阈对比具有统计学意义(P＜0.001).结论:大鼠胃经沿线脂肪条带结构的连通和完整性与胃经的针刺镇痛效应具有重要的相关作用.
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针刺对痛觉迟钝大鼠痛阈的调节作用
目的:观察针刺痛觉迟钝大鼠"后三里"腧穴对其痛阈的调节作用.方法:采用大鼠热水甩尾测痛方法筛选出痛觉迟钝大鼠,手针针刺其"后三里"腧穴,分别测定针刺前后的痛阈.结果:痛觉迟钝大鼠的"后三里"腧穴针刺前(10.46±0.60),针刺后(7.44±0.40),针刺前后痛阈差值配对t检验差异显著(t=9.8850,P=0.0001).结论:针刺"后三里"腧穴对痛觉迟钝大鼠的痛阈具有明显的调节作用.
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针刺大鼠"关元"穴对建立甩尾测痛模型的作用
目的:探讨针刺"关元"腧穴对建立针刺大鼠热水甩尾测痛模型的作用.方法:手针针刺大鼠"关元"腧穴,以50℃热水测量大鼠甩尾潜伏期.并与针刺"后三里"腧穴后的大鼠甩尾潜伏期进行对比.结果:"后三里"腧穴针刺前(3.79±0.32)、针刺后(8.28±1.54),针刺前后配对t检验比较差异显著(t=9.7402,P＜0.001);"关元"腧穴针刺前(3.63±0.71);针刺后(8.08±1.83),针刺前后配对t检验比较差异显著(t=10.4099,P＜0.001).结论:针刺"关元"与"后三里"腧穴对建立针刺大鼠热水甩尾测痛模型具有相近似作用.
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不同配比甲苯胺蓝染液对小鼠“后三里”穴区肥大细胞的染色效果观察
目的:观察4种不同配比的甲苯胺蓝染液对穴区肥大细胞的染色效果.方法:选用昆明系健康雄性小鼠(SPF级)12只,随机分为4组,分别取各组小鼠“后三里”穴区皮肤肌肉组织,制作石蜡切片,各组切片分别用50％酒精、高锰酸钾、蒸馏水、柠檬酸钠-盐酸溶液配制成的甲苯胺蓝染液进行染色,观察肥大细胞染色效果.结果:柠檬酸钠-盐酸组、高锰酸钾组、50％酒精组的甲苯胺蓝染液染色效果优于蒸馏水组.其中柠檬酸钠-盐酸组的背景颜色对比效果好;高锰酸钾组的染色时间短,但着色较深,不易分色;酒精组的染液配制简便,但胞质内颗粒不甚清晰.结论:不同配比的甲苯胺蓝染液对穴区皮肤组织肥大细胞的染色效果优劣不一.
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针刺大鼠胃经沿线脂肪条带结构的特异性镇痛效应
目的:观察针刺大鼠胃经沿线脂肪条带结构后的痛阈变化有无特异性.方法:在大鼠胃经沿线脂肪条带结构上选择包括"后三里"在内的三个位点,分别进行针刺前后的痛阈测定,并与脂肪条带结构旁两个对照位点针刺前后痛阈进行比较.结果:在胃经沿线脂肪条带结构上三个位点针刺前后痛阈变化明显,在脂肪条带结构旁两个对照位点上针刺前后痛阈未见有意义改变.结论:正常大鼠胃经沿线脂肪条带结构上具有针刺镇痛效应的特异性.
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穴位区细胞外基质在针刺始动中的作用
目的 探讨穴位区细胞外基质在针刺信号转导中的作用机制.方法 SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,每组10只,以大鼠热辐射甩尾实验的温度变化为观察指标.实验组大鼠"后三里"区注射人工合成的五肽甘氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬酰-酪氨酸GRGDY(Gly-Arg-Gly-Asp-Tyr)30 min后再针刺,以大鼠基础痛阈组、"后三里"区注射0.9%NaCl组及针刺后三里组为对照.结果 GRGDY注射后30 min再针刺,大鼠甩尾的温度与针刺组相比未见明显改变.结论 GRGDY未能阻断针刺效应,针刺效应的初始机制可能与细胞外基质与整合素特异性的结合位点RGD无关.
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大鼠后三里针刺前后细胞外基质的差异性基因表达
目的:探讨穴位区针刺前后细胞外基质的差异性基因表达及其在针刺信号转导中的作用机制.方法:SD大鼠10只,分针刺组和针刺对照组2组,手法针刺大鼠"后三里"30 min,立即取材;针刺对照组也取左侧后三里相应区域的组织.所取组织经RNA提取及纯化后,采用Agilent大鼠cDNA芯片比较2组大鼠细胞外基质的差异性基因表达,对差异性表达的基因进一步采用实时定量PCR法验证.结果:大鼠后三里区针刺前后细胞外基质具有差异性表达的基因有4条,针刺前后的整合素无差异性基因表达.结论:针刺前后穴位区细胞外基质存在部分差异性表达基因,细胞外基质在针刺始动中的具体作用途径及机制还有待进一步研究.
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大鼠后三里重新定位实验研究
目的:为大鼠后三里的针灸实验提供较为实用的定位标准和详实的解剖学参考数据.方法:①用解剖学方法制作SD大鼠胫、腓骨标本,观测大鼠小腿骨形态学变化,据此并参照人的骨度分寸法和足三里"地"的位置,对大鼠后三里进行定位,用游标卡尺测量与后三里定位相关的数据.②根据本研究后三里定位对大鼠进行针刺甩尾实验,以验证针刺疗效.结果:新测得的后三里进针点的位置高于传统后三里1.84寸,位于腓骨头下方0.84 mm向前3.34 mm处.结论:建立了一个新的实用的大鼠后三里定位标准,供针灸实验应用.
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手针针刺时程对大鼠痛阈影响的实验观察
目的 通过手针针刺不同时程对大鼠痛阈影响的实验观察,了解合适的针刺时程在建立针刺动物实验模型以及临床针刺治疗中的科学作用.方法 分别采用平补平泻手法针刺SD大鼠“后三里”穴5,10,15,20,25 min,采用热水甩尾测痛方法检测大鼠针刺前后的痛阈,利用统计学STATA 10.0处理分析数据.结果 ①针刺5 min,针刺前痛阈值(6.12±0.26)针刺后痛阈值(7.95±0.27);针刺10 min,针刺前痛阈值(5.31±0.51)针刺后痛阈值(9.27±0.44);针刺15 min,针刺前痛阈值(5.44±0.24)针刺后痛阈值(10.57±0.45);针剌20 min,针刺前痛阈值(5.29±0.22)针刺后痛阈值(10.34±0.34);针刺25 min,针刺前痛阈值(4.55±0.32)针刺后痛阈值(9.87±1.01);经配对t检验比较,均显示出有意义的差异(p＜0.01).②针刺5 min后痛阈值(7.95±0.27)与针刺10 min后痛阈值(9.27±0.44)配对t检验比较,有统计学意义的改变(P＜0.05);针刺5 min后痛阈值(7.95 ±0.27)与针刺15 min后痛阈值(10.57±0.45)配对t检验比较,具有显著意义的改变(P＜0.05).③针刺15min后痛阈值(10.57±0.45)与针刺20 min后痛阈值(10.34±0.34)以及针刺25min后痛阈值(10.8 ±0.89)分别配对t检验比较,未见有统计学意义的改变(P =0.658 3;P=0.686 2).结论 手针平补平泻针刺大鼠“后三里”腧穴15 min、即可达到较佳的调节大鼠痛阈的针刺效果.
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针刺小鼠后三里对热水、冰水甩尾痛阈的影响
目的 探讨针刺"后三里"穴对小鼠热水、冰水甩尾痛阈的影响.方法 手针针刺小鼠"后三里"穴,以50℃热水和0℃冰水浸鼠尾测量小鼠甩尾潜伏期,并进行对比.结果 热水浴组针刺前痛阈(4.02±1.07)s、针刺后痛阈(10.03±5.33)s,针刺前后配对t检验比较差异显著(t=3.822,P=0.031<0.05);冰水浴组针刺前痛阈(64.14±54.65)s,针刺后痛阈(108.86±83.58)s,针刺前后配t检验比较差异显著(t=1.185,P=0.076>0.05);两组痛阈变化百分率的差异无统计学意义(F=21,P=0.083>0.05).结论 针刺镇痛,热水甩尾痛阈测定方法优于冰水.
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电针对SAMP8小鼠外周血树突状细胞CD40、CD80分子表达的影响
目的 观察电针关元、后三里穴对SAMP8小鼠外周血树突状细胞CD40、CD80分子表达的影响.方法 将30只SAMP8小鼠随机分为快速脑老化组(Control组)、电针组(EA组)、假电针组(ShameEA组),每组10只.取“关元”、双侧“后三里”穴电针处理,每周6次,共治疗4周.治疗结束,眼眶采血,经细胞培养后,光镜观察细胞形态,并用流式细胞术检测树突状细胞CD40、CD80分子表达的差异.结果 各组外周血单核细胞贴壁后,用含rhIL-4(1000 U/mL)、rhGM-CSF(1000 U/mL)、10％FBS的RPMI-1640培养液培养5d后,光镜下可见细胞表面有明显的树突状突起;经流式细胞术检测,与Control组相比,EA组树突状细胞CD40+CD80+共表达有显著差异(P＜0.01).结论 电针关元、后三里穴与增强SAMP8小鼠免疫力及提高外周血树突状细胞CD40、CD80分子表达有关.
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针刺大鼠后三里与三阴交对热水甩尾痛阈的影响
目的:观察针刺大鼠"后三里"与"三阴交"对热水甩尾测痛模型的影响.方法:分别针刺大鼠胃经线上"后三里"和脾经脉线上"三阴交"腧穴,以热水甩尾测痛方法分别测定其针刺前后的痛阈,并对结果进行统计学分析.结果:"后三里"腧穴针刺前(5.90±0.38)后(9.28±0.32)配对t检验比较差异显著(P=0.0001);"三阴交"腧穴在针刺前(5.95±0.42)后(9.27±0.42)配对t检验比较差异显著(P=0.0001);"后三里"和"三阴交"针刺前后痛阈差值比较,未发现有统计学意义的改变(t=0.4550,P=0.6682).结论:针刺胃经线上"后三里"和针刺脾经线上"三阴交"腧穴,对大鼠热水甩尾模型具有相似的作用影响.
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大鼠脂肪条带结构针刺镇痛效应特异性的生物学基础
目的:观察大鼠脂肪条带结构针刺镇病效应特异性的生物学基础.方法:选择大鼠胃经沿线脂肪条带结构上后三里以及脂肪条带结构旁两个对照位点(A1、A2),分别进行针刺,针刺结束后立即断头处死,分高出胃经沿线 脂肪条带结构,制备匀浆液,采用放免法测定样本中的β-内啡肽(β-EP)、强啡肽A(DynA)、P物质(SP)含量.结果:β-EP针刺后三里(19.08±7.42)与针刺A1、A2位点(2.27±1.99)经成组t检验比较,两者差异显著(t=5.5374,P＜0.01).DynA针刺后三里(23.08±8.61)与针刺A1、A2位点(2.19±1.81)经成组t检验比较,两者差异显著(t=5.8194,P＜0.01);SP针刺后三里(1.57±0.49)与针刺A1、A2位点(1.05±0.60)经成组t检验比较,两者差异不显著(t=1.6330,p＞0.05).结论:针刺正常大鼠后三里腧穴,可使胃经沿线脂肪条带结构上特异性针刺镇痛效应物质β-EP、DynA含量升高.
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大鼠针敏现象与脂肪条带结构上神经肽物质的变化
目的:观察针刺敏感和不敏感大鼠胃经沿线脂肪条带结构上部分神经肽物质的变化.方法:针刺"后三里"穴,以热水甩尾测痛法筛选出针刺敏感和不敏感大鼠,并以放免法测定大鼠针刺侧胃经沿线脂肪条带结构上神经肽物质强啡肽、β-内啡肽、SP物质含量.结果:SP物质针刺敏感(1.57±0.49)与不敏感(3.19±1.43)经成组t检验比较,两者差异显著(P＜0.05);DynA针刺敏感(23.08±8.61)与不敏感(54.63±23.39)经成组t检验比较,两者差异显著(P＜0.05);β-内啡肽针刺敏感(19.08±7.42)与不敏感(42.70±26.91)经成组t检验比较,两者差异不显著(P＞0.05).结论:大鼠针刺镇痛不敏感现象并非是脂肪条带结构上强啡肽和SP物质的水平低于针刺敏感大鼠所导致.
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针刺治疗长春瑞宾外渗损伤的实验研究
目的探讨针刺治疗对长春瑞宾损伤修复作用.方法建立SD大鼠长春瑞宾外渗损伤模型,设针刺治疗实验组、损伤实验对照组、中药金银花治疗对照组;针刺SD大鼠"后三里";每日一次,同时测定针刺前、后SD大鼠的痛阈值,并与其它两组进行对比观察.结果针刺治疗实验组与损伤实验对照组对比疗效显著,而且针刺镇痛效应明显;针刺治疗实验组与金银花治疗对照组实验结果基本一致.结论针刺治疗具有明显的促进长春瑞宾外渗损伤修复作用.
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电针家兔后三里、睛明、趾间穴对高眼压作用的比较
电针家兔后三里、睛明、趾间三个不同穴位对水负荷造成的高眼压都有一定的降压作用,其中睛明组的起效较快,后三里组作用缓而持久,趾间组的作用稍弱.在造模90分钟后,三个不同穴位组之间的降眼压值有显著差别,并且主要在后三里与睛明、后三里与趾间组之间有差别.
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温和灸对大鼠后三里穴局部形态及CGRP、SP、VIP表达的影响
目的:探讨温和灸对大鼠后三里穴施灸局部的温通效应及生物学基础.方法:以高脂血症模型大鼠后三里穴为观察对象,运用HE染色法和免疫组化法,观察温和灸热刺激下,后三里穴局部皮肤形态结构以及皮肤组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)表达的变化.结果:温和灸组与对照组比较,后三里穴局部皮肤组织形态结构明显发生变化,角化层极薄或消失,表皮层断裂不完整,真皮层胶原纤维排列疏松;施灸后穴位局部皮肤CGRP较多表达在真皮层结缔组织,SP较多表达在毛囊,VIP较多表达在真皮层结缔组织以及表皮中.结论:温和灸热刺激可以改变后三里穴局部形态结构、影响后三里穴局部皮肤中CGRP、SP、VIP的分布表达,这些效应可能与艾灸以温促通的生物学基础相关.
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针刺不敏感大鼠在诺维本损伤后的针效变化
目的观察针刺不敏感大鼠经诺维本损伤后的针刺镇痛效应变化.方法以针刺"后三里"穴的镇痛痛阈为指标,筛选出针刺不敏感大鼠,对针刺不敏感大鼠行诺维本损伤后再针刺"后三里",测定针刺前后痛阈.结果针刺不敏感大鼠经诺维本损伤处理后针刺痛阈提高非常明显.结论损伤作用可能能激发大鼠的针刺敏感性.
