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体外心肌细胞缺氧/复氧模型损伤及参元丹干预的影响
目的:建立体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,观察益气逐瘀组方参元丹(SYD)对模型心肌细胞存活率和细胞损伤程度的影响,以进一步探讨其改善冠心病围手术期心肌损伤的作用机制.方法:体外培养大鼠乳鼠原代心肌细胞,建立缺氧复氧细胞模型并予分组处理,CCK法检测心肌细胞存活率,酶法检测各组细胞培养上清波中磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果:模型组存活率低于正常组(P＜0.05),而CPK、LDH释放量高于正常组(P＜0.05);SYD含药血清组、PDTC+ SYD组以及PDTC+空白血清组细胞存活率均高于模型组和空白血清组(P＜0.05),细胞酶释放量均低于模型组和空白血清组(P＜0.05),此3组间的数据比较,差异不具有统计学意义.结论:参元丹能够提高心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的细胞存活率,降低细胞损伤程度;其机制可能通过抑制核因子NF-κB及其介导的氧化应激和炎性反应降低细胞损伤;提示参元丹可能具有围手术期心肌损伤的保护作用.
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吸入制剂体内外相关性评价模型的概述
吸入制剂体内外相关性研究,是通过建立体外模型预测药物在体内的作用特征,指导和优化处方设计,调整制剂工艺,评估药效和安全性,从而提高研发效率,节约研发成本.本文总结了吸入制剂体内外相关性研究中常用的体外模型,包括用于预测药物肺部沉积的呼吸道物理模型,预测药物体内药代动力学的计算机模型,以及预测药物安全性和体内过程的体外细胞和3D器官模型,并探讨不同模型的应用范围、优势和局限性.
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子宫内膜腺上皮及基质细胞分离、培养作为子宫内膜异位症体外细胞模型的探索
目的:探索在位子宫内膜腺上皮及基质细胞的分离、培养作为子宫内膜异位症(EMs)的体外细胞模型.方法:通过酶解、系列过滤、沉降及贴壁纯化等技术,分离、纯化及培养15份EMs患者的在位子宫内膜腺上皮细胞及其基质细胞,并拟传代.结果:11份标本获得成功;每1g新鲜子宫内膜组织可得到(8～12)×106个原代基质细胞及(4～8)×106个原代腺上皮细胞;基质细胞纯度率可达95%以上,腺上皮细胞的纯度率约为90%.基质细胞可以有限的传代,腺上皮细胞不能传代.通过改良步骤,可提高基质细胞的产量.结论:在位子宫内膜腺上皮及其基质细胞的分离、培养可作为EMs的体外细胞模型之一.
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肺部给药吸收评价方法的研究进展
目的：：综述评价药物肺部吸收转运常用的方法、技术手段。方法：通过查阅Pubmed、中国知网等数据库，系统地介绍评价药物肺部吸收的体外细胞模型、离体肺泡模型和体内动物模型，并对这些模型的优缺点及其应用进行综述。结果：根据研究目的及药物的性质选择合适的肺部吸收评价模型。结论：为肺部给药制剂的研究与开发提供理论基础和研究思路。
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顺铂联合伊立替康注入综合疗法对HeLa细胞和HEK-293细胞的影响
目的 研究顺铂(DDP)联合伊立替康(Irinotecan)注入综合疗法对HeLa细胞和HEK-293细胞的影响,以评估该模型作为检测方法的有效性,为中晚期宫颈癌的综合化疗提供优化线索.方法 不同浓度DDP,Irinotecan,及双药联合作用于对数生长期的HeLa或HEK-293细胞,通过形态学观察、四甲基偶氮唑盐法(MTT)细胞活力测定,Ki67染色等检测药物对细胞的影响.结果 自10μg/mL DDP对HeLa和HEK-293细胞生长均有抑制作用.自10μM Irinotecan对HeLa细胞生长抑制明显.10μ g/mL DDP与低至2.5μMIrinotecan联合对HeLa细胞抑制作用显著强于同浓度单药.相同联合用药对HEK-293细胞的抑制作用明显较弱.结论 DDP与Irinotecan联合应用,不但提高了DDP综合疗法的效果,而且降低了化疗药物的使用剂量,此类联合治疗可望减轻患者的不良反应.相同联合方案对两种细胞的不同疗效提示了HeLa细胞作为宫颈癌体外模型的特异性.该研究可为宫颈癌综合疗法顺铂联合化疗方案的制定提供理论指导.
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食道鳞状上皮细胞癌转移体外细胞模型的建立
目的 建立一个适宜的食道鳞状上皮细胞癌(ESCC)体外转移研究模型.方法 将ESCC细胞系HK2置于未处理细胞培养皿中培养、传代,筛选出具有非锚定依赖生长能力的细胞株.以体外侵袭实验,软琼脂克隆形成实验比较、验证筛选细胞系与母代细胞的侵袭能力和非锚定依赖生长能力.利用比较蛋白质学的方法分析筛选细胞与母代细胞间的蛋白表达图谱差异.结果 成功筛选出具有较高转移能力并可传代培养的HK2-AD细胞株.HK2和HK2-AD细胞侵袭至小室膜反侧的细胞数分别为(16.7±2.5)和(28.7±7.4),软琼脂集落生成实验表明,HK2和HK2-AD细胞形成的集落数分别为(16.8±3.2)和(25±5.1),差异均有统计学意义(P＜0.05).HK2-AD细胞中一些与细胞运动、细胞无氧代谢及抑制凋亡相关的蛋白质分子表达明显上调.结论 利用肿瘤细胞的非锚定依赖生长特性建立了一个高转移能力、呈三维生长的HK2-AD细胞株,为ESCC肿瘤转移机制研究和药物筛选提供了一个有价值且易于操作的食道癌转移体外细胞模型.
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子宫内膜异位症体内、外模型的建立及应用
子宫内膜异位症病因及发病机制已成为妇产科领域研究热点.其体内、外模型的建立及应用是探索子宫内膜异位症的发病机制、疾病发展以及治疗措施的重要途径.本文就常用的子宫内膜异位症体内、外模型的建立及应用作一综述.
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子宫内膜异位症在位子宫内膜基质细胞体外蜕膜化模型的改良
目的:通过对目前常用的子宫内膜基质细胞体外蜕膜化模型进行改良,建立更准确和高效的子宫内膜异位症体外细胞模型,了解子宫内膜异位症患者在位内膜的蜕膜化能力,进而研究子宫内膜异位症与不孕的关系.方法:将子宫内膜异位症患者在位内膜细胞随机分为三组,第一组常规用E2(10nM)和P4(1μM)作用96 h(EP1组),第二组常规用E2(10nM)、P4(1μM)作用14 (EP14组),第三组改良组用E2(10nM)、P4(1μM)和8-溴-cAMP(0.5mM)作用96 h(EPC组),收集细胞后测定PRL(催乳素)和IGFBP1(胰岛素样生长因子结合蛋白1)的mRNA水平.结果:EPC组作用96 h后细胞形态发生明显变化,PRL和IGFBP1明显高于EP组.结论:与常规模型相比,8-溴-cAMP联合P4、E2能明显促进子宫内膜异位症在位子宫内膜基质细胞体外蜕膜化进程,使在位内膜体外蜕膜化能力明显优于常规体外模型组.
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体外肝摄取高密度脂蛋白(HDL)细胞模型的建立
目的:建立肝摄取HDL的体外细胞模型,用于促进胆固醇逆转运活性成分的高通量筛选.方法:以DiI(1,1-Dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocao cyanine per chlorate)荧光染料标记HDL,体外培养人HepG2肝细胞株,细胞贴壁后与2μg/ml DiI-HDL于37℃下恒温孵育,在动态细胞观察系统下连续观察细胞摄取HDL的实时状态,摄取完成后利用荧光显微镜照相并采用流式细胞术测定细胞的荧光值.结果:荧光显微镜和流式细胞术结果显示,5h后HepG2细胞摄取HDL饱和.结论:通过体外培养HepG2细胞摄取DiI标记HDL建立的细胞模型并利用流式细胞术测定荧光值,可用于促进胆固醇逆转运活性成分的高通量筛选.
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吸烟相关疾病模型的研究进展
吸烟对呼吸系统、消化系统、生殖系统、感官系统等多系统造成危害,可导致各种疾病的发生、发展.为了研究烟草与人类疾病的相关性,吸烟相关疾病模型的建立及完善越来越受到人们的关注,目前吸烟相关疾病模型主要包括体外吸烟细胞模型、动物吸烟模型和临床样本吸烟模型3类.本文就吸烟疾病模型的发展过程和研究进展作一综述.
