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二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应初探
目的 探讨二冬膏含药血清对人肺癌A549细胞的抑制效应.方法 采用中药血清药理学方法,选择高、中、低剂量的二冬膏水溶液以灌胃方式给药,获取二冬膏含药血清,以空白血清为对照,干预A549细胞,应用MTT法、划痕实验法及Transwell侵袭实验法检测二冬膏含药血清对A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.结果 二冬膏高、中、低剂量组干预A549细胞24h后均可不同程度抑制肺腺癌A549细胞增殖,差异有统计学意义(P＜0.05),并呈时间、剂量依赖性,以二冬膏中剂量组抑制作用明显;二冬膏高、中、低剂量组A549细胞的迁移距离较空白组缩短,差异有统计学意义(P＜0.05),中剂量组细胞迁移距离短;二冬膏高、中、低剂量组均能降低A549细胞的侵袭能力,差异有统计学意义(P＜0.05),中剂量组侵袭过膜的细胞数少.结论 二冬膏含药血清能抑制肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,中剂量抑制作用明显.
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不同滋阴中药对小鼠诱发性肺肿瘤发生及抗肿瘤免疫功能的影响
目的:研究六味地黄丸和二冬膏对乌拉坦诱发性肺肿瘤小鼠的肿瘤发生情况和抗肿瘤免疫功能的影响.方法:雌性昆明种小鼠33只,使用乌拉坦(1 g·kg-1·d-1)注射诱发小鼠肺肿瘤,随机分为对照组、六味地黄丸组(ig 1.56 g·kg-1·d-1)和二冬膏组(ig 0.78 g·kg-1·d-1),连续给药100 d后肉眼及病理切片和苏木精-伊红染色观察药物对小鼠肺肿瘤发生的影响,测定脾指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能以及测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠肺肿瘤诱发率明显降低,诱发率分别是63.6％,18.2％,36.4％.与对照组比较,六味地黄丸和二冬膏给药组小鼠脾指数、巨噬细胞活性明显增高(P ＜0.05或P＜0.01),小鼠血清中TNF-α含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:六味地黄丸和二冬膏均能通过提高小鼠的抗肿瘤免疫功能和减少炎症因子产生来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.
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二冬膏延缓胃癌发生的作用机制
目的:通过分析大鼠胃组织细胞凋亡和血浆差异代谢产物,探讨二冬膏延缓胃癌发生的作用机制.方法:大鼠随机分为正常组、模型组、维甲酸(12 ×10-3g·kg-1)组、二冬膏低、高剂量(6,12 g·kg-1)组,除正常组外,其余大鼠igN-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)0.2 g·kg-1建立模型,10 d/次,共9次.各组每天ig相应药物,正常组ig等体积生理盐水,治疗3个月后处理动物,苏木素伊红(HE)染色分析胃癌程度及病理变化的改善;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定胃组织中凋亡抑制基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2) mRNA表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测胃组织细胞凋亡;血浆代谢组学寻找差异代谢产物.结果:与模型组比较,二冬膏低、高剂量组病变主要在良性的乳头状瘤和乳头状增生,说明二冬膏能够改善胃癌病变程度;低剂量组能明显降低胃组织Bcl-2 mRNA的表达(P＜0.01),TUNEL显示二冬膏低、高剂量组胃组织细胞凋亡数比模型组高.二冬膏低剂量血浆代谢产物中发现的鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate),20-羟基-二十烷四烯酸(20-HETE),甘氨胆酸(Glycocholic acid)等与细胞凋亡相关.结论:二冬膏能够促进胃癌变大鼠胃组织发生细胞凋亡,延缓胃癌发生.
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二冬膏对急性肺损伤模型鼠TNF-α,IL-6含量及AQP-5蛋白表达的影响
目的:研究二冬膏对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)含量及水通道蛋白5(AQP-5)表达的影响.方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏高、中、低剂量组、地塞米松组,每组12只.除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉注射LPS 6 mg·kg-1复制ALI大鼠模型.首次给药在造模后0.5h,1次/d,连续4d.二冬膏高、中、低剂量组分别ig二冬膏10,5,2.5 g·kg-1;正常组与模型组ig生理盐水10 mL·kg-1,地塞米松组ip地塞米松0.01 g·kg-1.4d后处死大鼠,取血清和肺组织检测.采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测大鼠血清TNF-α,IL-6的含量,Western bloting测定大鼠肺组织AQP-5蛋白的表达,苏木素和伊红(HE)染色观察肺组织病理形态.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P＜0.01),肺组织AQP-5蛋白表达水平显著降低(P＜0.01)且肺部病理炎症增加.与模型组比较,二冬膏各组均能明显降低TNF-α,IL-6含量(P ＜0.05,P＜0.01),显著升高肺组织AQP-5蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01)并且减轻肺部病理炎症.结论:二冬膏通过降低ALI模型鼠促炎因子TNF-α,IL-6含量,升高肺组织AQP-5蛋白的表达,改善肺部病理炎症,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤.
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二冬膏抗NF-κB抑制介导的人肺癌细胞效应探讨
目的:探讨二冬膏的抗肿瘤效应,并研究核转录因子κB(NF-κB)在二冬膏抗肿瘤效应中的作用.方法:用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测二冬膏对A549细胞的增殖抑制效应(量效和时效关系);逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测二冬膏对A549细胞p65 mRNA表达的影响;采用免疫印迹法(Western blot)检测二冬膏对A549细胞p65蛋白表达的影响.结果:不同剂量组二冬膏含药血清均具有对肺腺癌A549细胞的明显增殖抑制作用(P＜0.05),且各自表现出一定时间和剂量相关性,给药干预24 h后细胞增殖均出现抑制,其中以二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预48 h后对细胞增殖的抑制作用明显.二冬膏中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞24 h后明显抑制p65 mRNA的表达;中剂量组(3.2 g·kg-1,bid)干预A549细胞后48 h对p65蛋白有显著抑制效应.结论:二冬膏可显著抑制人肺腺癌细胞系A549的增殖,通过对NF-κB的抑制介导其抗肿瘤活性.
关键词： 二冬膏 人肺腺癌A549细胞 核转录因子κB -
加减应用二冬膏
二冬膏方剂来源于明末儒医洪基所著的《摄生秘剖》卷四.为煎膏剂型.方药组成:天门冬(去心)500克,麦门冬(去心)500克.上药水煎取汁,再将滓水煎,以无珠为度,入蜜熬稠成膏滋,为口服剂.空腹时用开水冲服15毫升,一日2次,具有清心润燥,降火消痰,养阴润肺的功能,用于主治阴虚火旺,虚劳燥咳,心烦口渴,痰涩咳嗽,痰中带血,鼻干咽痛.
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古代皇宫里的七大保养美食
二冬膏原料:天门冬500克,麦门冬500克,川贝面120克.制法:加水熬成膏,加川贝面、蜜收成膏.每日早晨用4～5茶匙,白开水冲服.功效:此膏清心润肺,止咳化痰,滋阴降火,解渴除烦,除五脏之火,失血劳伤,元阴亏损,不可一日无此药.久服水升火降,阴与阳齐,则无病矣.
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二冬膏祛痰、抗炎及免疫作用的研究
二冬膏出自明朝洪基<摄生秘剖>[1],并由清朝张璐收入<张氏医通>[2],二冬膏从1963年新中国第二版药典,至2000年新版药典中均有收录.按药典方二冬膏由天冬、麦冬组成,经水煎、浓缩后与炼蜜混匀成棕黄色稠厚的半流体煎膏剂.功能养阴润肺,用于燥咳痰少、痰中带血、鼻干咽痛[3].
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大孔吸附树脂纯化二冬膏总皂苷工艺研究
目的：筛选大孔吸附树脂纯化二冬膏总皂苷的佳工艺。方法：以二冬膏总皂苷含量为指标，优选二冬膏总皂苷的纯化工艺条件。结果：D101型树脂纯化效果较好。通过树脂纯化后，二冬膏总皂苷的纯度由26.59％上升为62.07％，平均收率为73.09％。结论：本方法纯化效果好，且优化后的纯化工艺稳定可行。
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二冬膏对LPS致急性肺损伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6及AQP-1、AQP-5的影响
目的:研究二冬膏对LPS致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)含量及水通道蛋白-1(AQP-1)、AQP-5蛋白表达的影响.方法:将清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏10 g/kg组、二冬膏5 g/k组、二冬膏2.5 g/kg组、地塞米松组.除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉iv LPS 6 mg/kg复制急性肺损伤大鼠模型.首次给药在造模后0.5h,二冬膏分别ig二冬膏生药10、5、2.5 g/kg,正常对照组与模型组ig生理盐水l ml/100g,地塞米松组腹腔ip地塞米松0.01g/kg,1次/d,连续4d.末次给药后2h,处死大鼠,取肺组织检测.计算肺系数、肺湿干比(W/D);采用ELISA检测大鼠肺组织TNF-α、IL-6的含量;Real-time PCR检测大鼠肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA表达;Western bloting测定大鼠肺组织AQP-1、AQP5蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肺系数、肺湿干比(W/D)和肺组织TNF-α、IL-6含量明显升高,肺组织AQP-1、AQP6 mR-NA和AQP-1、AQP-5蛋白表达显著降低.与模型组比较,二冬膏10、5、2.5 g/kg组均能明显降低肺系数、肺湿干比(W/D)和TNF-α、IL-6含量,显著升高肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA和AQP-1、AQP-5蛋白的表达.结论:二冬膏通过降低急性肺损伤模型鼠促炎因子TNF-α、IL-6含量,提高肺组织AQP-1、AQP-5蛋白的表达,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤.
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二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生的影响
目的:研究二冬膏对乌拉坦诱导肺肿瘤模型鼠TNF-α、IL-10、TGF-β1及肿瘤发生情况的影响.方法:小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、二冬膏2.5g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏10g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组.除正常组外,其余各组采用小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制肺肿瘤小鼠模型.给药与造模同时进行,1次/d,连续15w.二冬膏10g/kg组、二冬膏5g/kg组、二冬膏2.5g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃给予生理盐水.15w后,取血清和肺脏检测.解剖肺脏,观察肺肿瘤发生率及肿瘤结节数;双抗体夹心-酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-10和肺组织TCF-β1的含量;免疫组化检测肺组织TGF-β1活性的表达.结果:二冬膏能使模型鼠肺肿瘤发生率从86.7％降至40.0～ 66.7％,平均肿瘤结节数从7.32降至3.97～ 5.53,降低程度明显,并可明显降低血清中TNF-α、IL-10含量,使肺组织中TGF-β1含量和活性的表达也显著下降.结论:二冬膏能通过降低TNF-α、IL-10、TGF-β1的表达来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.
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二冬膏对小鼠诱发性肺肿瘤发生及TNF-α、IL-6、IL-10、Foxp3的影响
目的:研究二冬膏对乌拉坦诱发性肺肿瘤小鼠的肿瘤发生情况和抗肿瘤免疫功能的影响.方法:雌性KM小鼠60只,分为5组:正常组(A)、模型组(B)、二冬膏0.78 g/kg组(C)、二冬膏1.56 g/kg组(C)、六味地黄丸1.56 g/kg组(E),每组12只.除正常组外,其余各组注射乌拉坦(1 g/kg/d)诱发小鼠肺肿瘤,造模后,正常组和模型组灌胃生理盐水,二冬膏0.78g/kg组、二冬膏1.56 g/kg组、六味地黄丸1.56 g/kg组灌胃给予等体积药物,每日给药1次,连续给药100天后处死小鼠,取血清和肺脏检测,HE染色光镜下观察药物对小鼠肺肿瘤发生的影响,用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10的含量,免疫组化检测肺组织中Foxp3活性的表达.结果:二冬膏能使模型小鼠肺肿瘤诱发率明显降低,并可明显降低血清中TNF-α、IL-6、IL-10含量,使肺组织中Foxp3活性的表达也显著下降.结论:二冬膏能通过提高小鼠的抗肿瘤免疫功能和减少炎症因子产生来延缓乌拉坦诱发肺肿瘤的发生发展.
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二冬膏中多糖类成分的提取工艺研究
目的 确定二冬膏中多糖的佳提取工艺.方法 采用正交设计法,以提取时间(A)、加水量(B)、提取次数(C)作为提取因素.结果 B因素和C因素对多糖含量的影响具有显著意义,A因素的影响不显著.结论 佳提取工艺为A1B2C2,时间分别为1、0.5、0.5 h,每时间段提取2次,加8倍量水.
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二冬膏多糖的含量测定
目的:测定二冬膏中多糖的含量.方法:采用苯酚-硫酸法测定.结果:大吸收波长为490 nm,多糖含量以葡萄糖计,在0.0016～0.0096 mg范围内与吸收度呈良好线,回归方程为:Y=-0.0112+1.845X(r=0.9994,P<0.01).测得二冬膏多糖含量为12.48%,平均回收率为100.19%,RsD为0.04%(n=5).结论:该方法快速、准确、重现性好、便于实际应用.
