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重组日本血吸虫信号蛋白14-3-3不同剂量对免疫保护性的影响
目的观察不同剂量重组日本血吸虫(中国大陆株)信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)的免疫保护性,以探讨佳的免疫剂量.方法以逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Sj14-3-3基因,并将其亚克隆入原核表达载体pET28a,然后转化大肠埃希菌进行诱导表达;用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、电洗脱和透析的方法制备纯化的rSj14-3-3蛋白,分5组(第1、2、3组为rSj14-3-3蛋白50μg、100μg和300μg实验组,第4、5组分别为福氏佐剂和生理盐水对照组)免疫BALB/c小鼠并进行攻击感染实验.在尾蚴攻击感染6周后,剖杀小鼠计算各组的减虫率和减卵率.并在试验过程中留取不同时期小鼠血清,检测抗Sj14-3-3特异性IgG抗体.结果成功表达出rSj14-3-3蛋白,纯化蛋白免疫小鼠行攻击感染后各实验组的减虫率为第1组28.20%、第2组43.10%、第3组40.00%;各组的减卵率分别为(按以上组序)41.80%、57.50%、55.70%.各实验组与对照组比较,差异有统计学意义(减虫率:第1组t=6.8、第2组t=8.7、第3组t=7.3,各组P值均＜0.01;减卵率:第1组t=11.23、第2组t=11.54、第3组t=7.99,各组P值均＜0.01);各实验组间两两比较,第1组与第2组间(减虫率:x2=8.96,P＜0.05;减卵率:x2=15.69,P＜0.05)、第1组与第3组间(减虫率:x2=6.52,P＜0.05;减卵率:x2=12.52,P＜0.05)差异有统计学意义;第2、3两组间差异无统计学意义(减虫率:x2=1.20,P＞0.05;减卵率:x2=0.93,P＞0.05).各实验组的抗Sj14-3-3特异性总IgG水平都有显著升高,所测的4个亚型中以IgG1和IgG2a亚型升高为主,IgG2b和IgG3亚型升高不明显.结论重组Sj14-3-3的免疫保护性与免疫剂量有一定关系,以100μg抗原量免疫小鼠获得的保护性好.
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RGS5在肿瘤抗血管生成的研究进展
G蛋白信号调节蛋白（RGS）是能够直接与激活的Gα亚基结合，负性调节G蛋白信号的一组多功能蛋白家族。在肿瘤领域，RGS5作为RGS家族一员，在多种肿瘤组织的血管周细胞中有高表达，在肿瘤形成过程中对血管的成熟和重构发挥着重要作用。RGS5基因的缺失可使肿瘤血管正常化并改善肿瘤血供，既可促进自体免疫细胞进入肿瘤也有利于改善乏氧增加放化疗敏感性。这可能为我们提供了肿瘤治疗的新靶点。
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G蛋白信号转导调节5和血小板衍生因子受体β在慢性脑白质损伤后的表达
目的 探讨慢性脑低灌注白质损伤后脑周细胞G蛋白信号转导调节5(RGS5)和血小板衍生因子受体β(PDGFR β)的表达.方法 32只SD大鼠随机分为假手术组(S组)8只和模型组24只,模型组大鼠造模后,于慢性脑低灌注白质损伤模型第7、14、30、60天处理,依次分为A、B、C、D组.采用Western blot方法检测大鼠脑周细胞RGS5和PDGFR β表达.结果 与S组RGS5表达(1.520±0.032)比较,B组明显下降(0.490±0.054,P＜0.05),C组和D组明显升高(3.820±0.072,4.890±0.057,P＜0.01);A组和B组PDGFR β表达无明显变化(P＞0.05);C组PDGFR-β表达至高峰(3.260±0.031,P＜ 0.01);D组PDGFR β表达仍高于S组(P＜0.05).结论正常生理条件下,RGS5和PDGFR-β在脑周细胞中有一定量的表达;慢性脑低灌注白质损伤后期阶段,脑周细胞中RGS5和PDGFR-β蛋白表达增强,且PDGFR-β先于RGS5达到表达高峰,两者表达存在时相关系.
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Gs蛋白α-亚基基因T393C多态性与原发性高血压病的关系
目的:分析Gs蛋白α-亚基(guanine nucleotide-binding protein,α-stimulating activity polypeptide 1,GNAS1)基因T393C多态性与中国天津地区原发性高血压病的关系.方法:按年龄配对的原发性高血压患者(高血压组)和非原发性高血压患者(对照组)各151例入选本研究.PCR-限制性片段长度多态性法分析GNAS1基因T393C多态性的频率分布.结果:研究样本的基因型频率和等位基因频率符合哈迪-温伯格平衡:(Hardy-Weinberg equilibrium).T393C多态性等位基因频率和基因型频率在高血压组和对照组间差异无统计学意义(χ2分别为2.576和2.664,P＞0.05).结论:GNASl基因T393C多态性与中国天津地区原发性高血压病无关.
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RGS4蛋白在小儿肾母细胞瘤组织中的表达及临床意义
目的：分析G蛋白信号调节蛋白4（RGS4）在小儿肾母细胞瘤组织和癌旁组织中的表达差异，探讨RGS4与小儿肾母细胞瘤发生发展的关系。方法收集37例小儿肾母细胞瘤患者术后肾癌组织及8例癌旁组织，采用免疫组织化学法检测RGS4蛋白的表达水平；另收集患者手术切除新鲜癌组织及对应癌旁组织标本各8例，采用qRT-PCR和Western blot分别检测RGS4 mRNA和蛋白的表达水平。结果免疫组织化学染色结果显示，RGS4蛋白在小儿肾母细胞瘤组织及癌旁组织中均存在阳性表达，其在小儿肾母细胞瘤组织中的高表达率低于癌旁组织[37.83%（14/37）vs.87.5%（7/8），χ2=4.675，P<0.05]；RGS4 mRNA在小儿肾母细胞瘤组织中的表达水平显著低于癌旁组织（1.064±0.549 vs.5.374±0.735，t=13.290，n=8，P<0.01）；Western blot结果显示，RGS4蛋白在小儿肾母细胞瘤组织中的表达量低于癌旁组织（0.301±0.092 vs.0.779±0.041，t=13.424，n=8，P<0.01）。结论 RGS4在小儿肾母细胞瘤组织中表达下调，可能与小儿肾癌的发生发展有关。
关键词： 肾肿瘤 RGS蛋白质类 小儿肾母细胞瘤 G蛋白信号调节蛋白4 基因表达 -
下调G蛋白信号调控因子2表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响
目的:探讨下调G蛋白信号调控因子2(GPSM2)表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响.方法:构建GPSM2低表达的胰腺癌MIA-PaCa-2细胞并鉴定;将16只裸鼠随机均分为两组,分别皮下接种GPSM2低表达与自然表达的MIA-PaCa-2细胞构建荷瘤模型,两组中分别一半注射吉西他滨(100 mg/kg),一半注射等体积生理盐水(腹腔注射,3次/周,共注射4周),绘制瘤体生长曲线,并于末次注射后第3天处死裸鼠,测量肿瘤体积.结果:成功构建GPSM2表达下调的MIA-PaCa-2细胞.移植瘤的生长速度与体积大小的趋势均表现为GPSM2自然表达+生理盐水组>GPSM2自然表达+吉西他滨组>GPSM2低表达+生理盐水组>GPSM2低表达+吉西他滨组.析因设计分析结果显示,单独吉西他滨或单独下调GPSM2基因表达对于抑制裸鼠瘤体生长的主效应均具有统计学意义(均P=0.000);吉西他滨联合下调GPSM2基因表达对于抑制裸鼠瘤体生长的交互效应尚未达到统计学意义(P=0.073);但吉西他滨联合下调GPSM2基因表达对于肿瘤生长的抑制作用相对于单独吉西他滨或单独下调GPSM2基因表达的单独效应均有统计学意义(P=0.000、0.003).结论:下调GPSM2基因表达是否有增强胰腺癌细胞化疗敏感性的作用尚不确定,但下调GPSM2基因表达的同时予以化疗对胰腺癌生长的抑制效果明显强于两者单独作用.
关键词： 胰腺肿瘤 RGS蛋白质类 化疗 异种移植模型抗肿瘤试验
