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聚合酶链反应方法检测鼠疫耶尔森菌的内部对照研究
目的避免聚合酶链反应(PCR)方法检测鼠疫菌发生假阴性.方法通过克隆,将16SrRNA引物的扩增产物与鼠疫菌F1抗原基因克隆子相连,并以其作为内部对照模板进行PCR试验.结果得到了在包含F1抗原基因中连接有16S rRNA扩增产物的质粒,并初步确立了作为内部对照质粒的参照标准浓度.结论在采用PCR方法检测鼠疫菌时,加入适宜浓度的内部对照质粒作为模板与待检样品同时扩增,可避免假阴性的发生.
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免疫组织化学质量控制(二)
1.6 内部阳性和阴性对照除了要检测阴性对照片和多幺且织蜡块对照片之外,还要注意到待测病例组织理论上为阳性的部分(内部阳性对照)和理论不与-抗反应的部分(内部阴性对照).内部对照所包含的目标抗原不仅位于着重观察的组织上,如肿瘤组织,也存在于周围正常组织成分中.
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常用血清学ELISA试剂内部对照的有效性与结果判定
血清免疫学诊断用ELISA试剂盒内部对照一般包括阳性对照、阴性对照和空白对照.按照试剂说明书要求,每次每板都应设立三项对照(空白对照有的ELISA试剂盒不要求做),对照OD值在说明书要求或质控范围方能对检测标本的阴性或阳性做出判断,结果才具有真实性.
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出入境体检常用血清学ELISA试剂内部对照的有效性与结果判定
文章分析了传染病监测体检项目常用血清学ELISA试剂内部对照的有效性与实验结果判定之间的关系,尤其是阳性对照、阴性对照及空白对照与实验结果之间的关系,提高了血清学检测的质量.
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Epstein-Barr病毒抗体室内质量控制血清的制备及评价
Epstein-Barr病毒(EBV)为疱疹病毒科嗜淋巴细胞病毒属,在全球范围内引起感染。感染后常终生携带,并建立潜伏感染状态。EBV感染与传染性单核细胞增多症、鼻咽癌、儿童淋巴瘤、霍奇金病、艾滋病相关淋巴瘤等发生有密切相关[1]。被列为可能致癌的人类肿瘤病毒之一,其中广东省为高发地区之一[2]。实验室检查可发现淋巴细胞增多,转氨酶升高,血小板减少等,但确诊需找到EBV DNA和其表达产物(RNA或蛋白)的存在。若抗早期蛋白IgA效价增加,则极大地增加了患者患鼻咽癌的危险性。为加强EBV-IgA检测工作的质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性,每次试验必须有内部对照质量控制血清和外部对照质量控制血清,并且以外部对照质量控制血清进行室内质量控制。由于外部对照质量控制血清较难得到,我们根据工作中的实际情况,利用EBV-IgA阳性标本制备了EBV-IgA弱阳性外部对照质量控制血清。
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多重PCR检测方法在鼠疫监测中的应用
目的 验证在鼠疫疫源地调查中应用多重PCR方法快速检测鼠疫菌的实用性.方法 在14个省的17个鼠疫监测点采集标本2524份.选用针对鼠疫菌特异序列的引物,并加入内部对照模板,直接从鼠肝、脾等脏器标本中进行鼠疫核酸检测,与细菌分离培养结果相比较并进行统计学分析.结果 两种检测方法的符合率为92.67%.PCR方法阳性检出率为10.38%,较细菌培养阳性检出率(4.48%)高(χ2=682.25,P<0.01).结论 多重PCR方法可应用于鼠疫监测中,比传统方法迅速、灵敏,但还有待于优化.