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广东地区人微小病毒B19母婴传播及异常胎儿和新生儿人微小病毒B19感染的研究
目的为研究人微小病毒B19在广东地区母婴及异常胎儿和新生儿中的感染状况。方法应用PCR方法检测700份孕妇外周血和新生儿脐血，PCR结合限制性内切酶分析以及原位杂交检测24份异常胎儿和新生儿组织。结果孕妇和胎儿血清中B19病毒的检出率分别为1.14％(4／350)和0.28％(1／350);17例异常胎儿和7例新生儿中，分别有5份胎儿和3份新生儿组织PCR结果阳性。PCR产物经限制性内切酶HaeI酶切分析，证实为PVB19特异的DNA片段。用原位杂交的方法，在部分异常胎儿的脑或脾组织小血管内或周围的原始红细胞核中检测到DNA阳性颗粒。结论广东地区孕妇B19病毒的感染可引起母婴传播，并可能对胎儿造成一定的危害，但其感染率很低。在评估B19病毒感染时，应有可靠方法区分现症感染和既往感染。
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妊娠期人微小病毒B19感染对母婴的影响
人微小病毒B19是动物病毒中体积小、结构简单的DNA病毒,妊娠期人微小病毒B19感染与自然流产、死胎、胎儿水肿、新生儿疾病等有关,学者们对它进行了较深入的研究,现对妊娠期人微小病毒B19感染对母婴的影响作一综述.
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人微小病毒B19与乙肝病毒相关肝病的临床关系
目的 探讨人微小病毒B19在乙肝病毒相关肝病患者中的感染情况及其对这些疾病的影响.方法 应用ELISA技术检测原发性肝癌、肝硬化、慢性乙型肝炎三组患者(各50例)和健康对照组(50例)血清中HPV B19特异性抗体IgM(B19-IgM),同时检测其丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肝功能Child-Pugh评分,分析HPV B19感染对肝脏功能的影响.结果 乙肝病毒相关肝病组人微小病毒B19感染率(16.7%)远高于正常对照组(2%),差别有显著性(P<0.05);原发性肝癌人微小病毒B19-IgM阳性率(28%)远高于慢性乙型肝炎组(10%)、肝硬化组(12%)及正常对照组(2%)(P<0.05);肝硬化组人微小病毒B19-IgM抗体阳性率明显高于正常对照组(P<0.05);原发性肝癌组中人微小病毒B19-IgM阳性患者转氨酶(ALT、AST)水平、肝功能Child-Pugh评分及肝癌分期较阴性者高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 乙肝病毒相关肝病患者合并人微小病毒B19的感染常见,其中原发性肝癌组感染率高;且转氨酶的水平及肝功能Child-Pugh评分高于未感染者,提示受人微小病毒B19感染的原发性肝癌患者肝功能受损将更严重.
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B19 VP2抗原真核表达载体的构建及免疫原性观察
目的:探讨以B19 VP2基因为靶基因构建的真核表达载体作为基因疫苗的免疫原性.方法:用PCR方法以pGEM1-B19为模板扩增出B19 VP2目的基因;将其重组入真核表达载体pcDNA3;将重组子pcDNA3-VP2及空质粒分别用脂质体包裹接种家兔;ELISA方法检测家兔血清中B19 VP2抗体产生情况.结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3-VP2;其作为基因疫苗接种家兔后可产生滴度较高,持续时间较长的抗体.结论:B19 VP2基因可作为B19病毒基因疫苗构建的靶基因.
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郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19感染情况测定
目的:了解郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19的感染情况.方法:采用ELISA和PCR方法分别检测郑州市237例正常孕妇及29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA表达情况.结果:29例流产或死胎孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别为51.7%(15/29)、6.9%(2/29)和13.8%(4/29),237例正常孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别30.4%(72/237)、1.3%(3/237)和2.5%(6/237),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:郑州市孕妇中存在人微小病毒B19的感染,可能导致不明原因流产或死胎.
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人微小病毒B19 VP2蛋白抗原在大肠杆菌中的表达
目的:利用原核系统表达人微小病毒B19的重组蛋白抗原,为建立ELISA方法诊断B19病毒感染提供特异性抗原.方法:采用PCR方法扩增B19 VP2基因,将之插入到T载体中进行测序,验证序列正确后再重组入原核表达载体pET-30a(+),并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达.用SDS-PAGE分析表达产物.表达 产物经亲合层析柱纯化得到VP2重组蛋白抗原.用B19 VP2 IgG对该蛋白进行了Western-Blot分析.结果:筛选出2株B19 VP2蛋白抗原高表达菌株,经IPTG诱导后,表达VP2重组蛋白量占菌体总蛋白量的24.6%.结论:VP2重组蛋白具有良好的抗原活性.
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HBsAg和人微小病毒B19 VP2联合抗原的克隆及表达
目的构建乙肝表面抗原-人微小病毒B19 VP2融合蛋白的原核表达系统,并检测其表达蛋白的抗原反应性.方法用PCR扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因及B19病毒VP2基因,分别重组入pGEM-T,构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pQE30表达载体中,得到pQE30-HBs;再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pQE30-HBs中,得到pQE30-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定.结果pQE30-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,Western-blot检测结果显示所表达融合蛋白均可与抗-HBs和抗-VP2结合反应.结论成功构建pQE30-HBs-VP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的HBsAg和VP2蛋白的双重抗原的反应原性.从而建立了表达B19和HBV的联合抗原表达系统,同时给HBV和B19病毒重组联合疫苗的研制和复合诊断试剂提供了抗原参考.
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结直肠癌中人微小病毒B19衣壳蛋白的表达与COX-2的关系
目的 检测人微小病毒B19基因与COX-2表达的关系,揭示该病毒在结直肠腺癌中可能的作用机制.方法 选取37例结直肠癌石蜡标本,采用免疫组织化学方法 分别检测B19病毒衣壳蛋白VP1/VP2和COX-2的表达,并进行统计学分析.运用免疫组织化学双标记法检测抗原表达定位关系.采用Western blot方法 检测转染pCDNA3.1/VP1u的结肠癌Lovo细胞COX-2的表达.结果 衣壳蛋白和COX-2在结直肠腺癌组织中表达率的吻合度具有统计学意义.免疫组织化学双标记结果 直观显示两种蛋白表达的定位关系,衣壳蛋白主要定位于细胞核内,COX-2定位细胞质内.Western blot结果 示VP1u细胞转染组COX-2的表达水平明显较空载体转染组上调.结论 人微小病毒319衣壳蛋白的表达与COX-2表达具有相关性,B19病毒可能通过VP1u上调COX-2的表达从而在结直肠腺癌中发挥一定作用.
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微小病毒B19与早期自然流产关系的研究
目的:应用聚合酶链反应(PCR)技术检测早期自然流产和正常早期妊娠孕妇血清中人微小病毒B19(B19病毒)非结构蛋白DNA,对比分析早期自然流产的原因.方法:收集40例早期自然流产和70例正常早期妊娠孕妇的血清,应用套式PCR技术检测两组孕妇血清中的B19病毒非结构蛋白DNA.结果:40例早期自然流产孕妇血清中,5例(12.5%)B19病毒阳性,70例对照组孕妇血清中1例(1.43%)B19病毒阳性.两者比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:B19病毒是导致早期自然流产的原因之一.
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无偿献血员血清人微小病毒B19感染情况调查
目的了解当地献血员中人微小病毒B19(HPV B19)感染情况,为预防HPV B19感染提供初步依据;方法随机抽查110名无偿献血员所供血液;以聚合酶链反应技术检测血清中HPV B19-DNA的表达.结果测出HPVB19DNA阳性23名,阳性率达20.9%.结论初步表明献血员中HPV B19感染率较高.
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2012-2014年苏南地区育龄妇女人类微小病毒B19感染状况调查
目的 分析苏南地区育龄妇女微小病毒B19感染的状况,为本区妇幼保健提供基础数据.方法 采用酶联免疫检测法(ELISA)检测2012-2014年苏南地区育龄妇女血清中特异性的IgM抗体.结果 8927例育龄妇女的微小病毒B19 IgM抗体阳性率为13.83％,近三年差异无统计学意义(x2=0.35,P＞0.05);不良妊娠结局组、正常妊娠组和婚检组感染率分别为16.37％、12.59％和13.39％,差异有统计学意义(x2=16.76,P＜0.05);感染组与非感染组不良妊娠结局发生率差异有统计学意义(x2=38.71,P＜0.05).结论 妊娠期HPV B19感染可引起不良妊娠结局.2012-2014年苏南地区育龄妇女感染率并不低,相关的妇幼保健单位应加强微小病毒B19的感染监测,开展全面检查,提高人口素质.
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人微小病毒B19感染与自然流产的关系
目的 通过分析自然流产与正常妊娠晚期待产孕妇人微小病毒B19(HPV B19)DNA及IgM抗体检测情况,探讨HPV B19与自然流产的关系.方法 采集自然流产孕妇(观察组,28例)与正常待产孕妇(对照组,33例)的静脉血,以聚合酶链反应(PCR)法检测HPV B19 DNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HPV B19 IgM抗体.结果 观察组HPV B19 DNA阳性率为28.57%(8/28),对照组为9.09%(3/33),两组HPV B19 DNA阳性率比较,差异有统计学意义(x2=3.98,P＜0.05).观察组检测出1例(3.57%,1/28)HPV B19 IgM抗体阳性,对照组未检测到阳性者(0.00%).结论 自然流产孕妇HPV B19感染率高于妊娠晚期待产孕妇,推测HPV B19感染可能是导致自然流产的原因之一.
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儿童噬血细胞综合征与人微小病毒B19感染的相关性及临床特征分析
目的：探讨儿童噬血细胞综合征（HPS）与人微小病毒B19（HPVB19）感染可能存在的相关性，并对其临床特征进行分析。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量PCR法对65例HPS患儿（HPS组）及65例健康体检儿童（对照组）进行HPVB19 IgM、IgG及HPVB19 DNA检测，并根据HPVB19 DNA检测结果将HPS患儿分为HPVB19感染组（n=14）和非感染组（n=51），比较两组患儿临床资料。结果 HPS组HPVB19-IgM阳性率（26％，17/65）显著高于对照组（9%，6/65）（P=0.011）；而HPVB19-IgG阳性率（38%，25/65）与对照组（29%，19/65）比较差异无统计学意义（P=0.266）。HPS组HPVB19感染率（22％，14/65）明显高于对照组（3％，2/65）（P=0.001）。与HPVB19非感染组HPS患儿比较，感染组患儿入院时血小板计数与血红蛋白水平显著降低，肝功能损伤更严重，发病时间更早，病程迁延时间更长（均P<0.05）。结论 HPVB19感染与HPS发病可能具有相关性。HPVB19感染的HPS患儿起病更急，临床表现更为严重，病程迁延时间更长。
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人微小病毒B19感染与儿童特发性血小板减少性紫癜关系的meta分析
目的 综合分析人微小病毒B19感染与儿童特发性血小板减少性紫癜(ITp)的关系.方法 计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库,检索时间从1994～2008年,纳入人微小病毒B19感染与儿童ITP关系的病例对照研究,对文献数据进行meta分析.结果 共纳入8个研究,其中病例组516例,对照组246例.meta分析显示人微小病毒B19感染在病例组的表达高于对照组(OR=13.71,95% CI=7.07～26.59,Z=7.75,P<0.01).结论 人微小病毒B19感染与儿童ITP的发病有密切相关性.
关键词： 人微小病毒B19 特发性血小板减少性紫癜 Meta分析 儿童 -
人微小病毒B19非结构蛋白1损伤细胞机制的研究进展
人微小病毒B19(human parvovirus B19)于1975年在筛选健康献血者血液中乙型肝炎病毒时偶然发现,并因此而得名.该病毒是一种DNA病毒,无被膜,长约5.5 kb,分子质量约50～80 ku,是对称二十面体,平均直经约25 mm,它是微小病毒科微小病毒属的成员(微小病毒科还包括依赖性病毒属和浓核病毒属),是该属病毒中惟一能使人类致病的病毒,也是动物病毒中体积小、结构简单的DNA病毒.B19病毒有两种衣壳蛋白VPl(83 ku)、VP2(58 ku)及一个主要非结构蛋白(non-structural protein-1 NS1).VP2的氨基酸序列包含在VP1氨基酸序列中,它们组成衣壳包裹在B19的DNA表面,构成B19病毒的抗原性,而NS1则与B19病毒毒力有关.
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湖南湘潭地区育龄妇女人微小病毒B19流行病学调查
目的 了解湖南省湘潭地区育龄妇女人微小病毒B19 (HPVB19)感染状况及特点,并探讨不良妊娠结局与妊娠期HPV B19感染的关系.方法 采集湘潭地区育龄妇女静脉血,用酶联免疫吸附法检测2011-2012年湘潭地区育龄妇女血清B19-IgM抗体,PCR法检测HPV B19抗体阳性的妇女DNA的表达情况.比较不良妊娠结局、妊娠和婚检妇女的感染率.并进一步进行随访调查,分析不良妊娠结局与B19感染的相关性.结果 5065例育龄妇女,B19感染率为12.62％,不良妊娠结局组、妊娠组和婚检组感染率分别为18.59％,11.12％和10.55％,不良妊娠结局组和其他两组感染率差异有统计学意义(P＜0.01);感染组与非感染组不良妊娠结局发生率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 妊娠期HPV B19感染是引起不良妊娠结局的重要原因之一.湘潭地区育龄妇女HPV B19感染率较高,应加强育龄妇女HPV B19感染监测.
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母婴血细胞人微小病毒B19感染的检测
目的:配对调查母婴血细胞B19病毒感染情况.方法:用套式PCR分别检测孕妇外周血单个核细胞(PBMC)和新生儿脐血有核细胞(CBNC)B19病毒DNA.结果:孕妇PBMC B19病毒DNA阳性率3.06%(3/98),新生儿脐血CBNC B19病毒DNA阳性率1.12%(1/89).结论:孕妇PBMC和新生儿CBNC存在B19病毒感染,但母婴垂直传播B19病毒风险较低.
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人微小病毒B19 VP1独特区蛋白的表达及纯化
目的:利用原核表达系统表达人微小病毒B19的VP1独特区蛋白, 大量发酵培养细菌后纯化蛋白, 为制备VP1蛋白的mAb奠定基础.方法:构建重组质粒VP1-PQE30, 转化大肠杆菌M15, 测序正确后发酵培养、 IPTG诱导表达, 通过SDS-PAGE及Western blot分析表达产物, 表达蛋白经AKTA explorer 100快速纯化系统纯化.结果:成功地构建原核表达系统VP1-PQE30-M15, 经IPTG诱导发酵培养细菌可大量表达VP1蛋白, 纯化后蛋白纯度达95%以上.结论:重组表达质粒可表达VP1独特区蛋白, 高纯度蛋白对制备VP1 mAb及疫苗具有重要意义.
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南宁地区育龄妇女人类微小病毒B19流行病学调查
目的 了解南宁地区育龄妇女人微小病毒B19(B19)感染状况及特点.方法 用酶联免疫吸附法检测2008～2010年南宁地区育龄妇女血清B19-IgM抗体,比较不良妊娠结局、妊娠和婚检妇女感染率及各年、季度感染情况.结果 10 125例育龄妇女,B19感染率为13.04%,不良妊娠结局组、妊娠组和婚检组感染度分别为17.69%,12.61%和10.82%,三组间感染率差异有统计学意义(P<0.01).各年感染率分别为12.20%,13.18%和13.68%,各年、季度感染率差异无统计学意义(P>0.05).感染组与非感染组不良妊娠结局发生率差异有统计学意义(P<0.01).结论 南宁地区育龄妇女B19感染率较高,应加强育龄妇女B19感染监测.
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Toll样受体3与人微小病毒B19在桥本氏甲状腺炎发病机理中的作用
目的:探讨Toll样受体3(TLP3)和人微小病毒B19(B19)在桥本氏甲状腺炎(HT)发病机理中的作用,以进一步明确其发病机制.方法:选取33例桥本氏甲状腺炎患者的石蜡标本,分别采用免疫组化SP法及免疫组化双染法检测TLR3和B19在HT中的表达与定位,分析两者与HT发病的关系.结果:TLR3和B19主要表达在HT的甲状腺滤泡上皮细胞内,且大多数(62％)位于同一细胞内.在33例HT病例中,TLR3染色18例以胞浆表达为主,15例以胞核表达为主;B19染色18例主要表达于胞浆,11例主要表达于胞核,4例为阴性表达.统计学分析表明,TLR3和B19在HT中的表达具有相关性(r=0.565,P=0.001).结论:TLR3和B19在HT甲状腺滤泡上皮细胞呈共表达,表明TLR3可能通过特异性识别人微小病毒B19复制过程中产生的dsRNA,使促炎症因子及辅助刺激分子释放,引起自身免疫性疾病.
