首页 > 文献资料
-
肠道病毒EV71及CA16在不同细胞系中细胞病变作用的研究
目的研究CA16和EV71在4种细胞系中细胞病变作用的差异.方法随机选择滴度相似的EV71轻症、EV71重症和CA16轻症毒株各1株,分别感染RD、Vero、U251和SY5Y细胞,比较3株病毒在细胞病变的形态及程度、感染后的细胞存活率、病毒在细胞中的复制水平和病毒所致凋亡蛋白相关mRNA的表达水平等方面的差别.结果3株病毒的感染在同一细胞系中表现相似.镜下从形态学上无法对三株病毒加以区别;感染后病毒载量均表现为从高到低依次为Vero、RD、SY5Y细胞到U251细胞的顺序;病毒感染后细胞存活率的顺序与细胞内复制水平与相反,两者之间存在类似负相关的趋势.3株病毒的感染在3种细胞系中均有凋亡蛋白caspase-8、9和3相关mRNA的表达,提示可能3种细胞系中凋亡启动的途径相同.结论细胞水平的感染,提示这两种病毒感染所致临床表现的差异性并非单独由病毒所决定.
-
液相芯片检测3种发热伴出疹病毒方法的建立
目的 建立一种能同时检测发热伴出疹症候群中的肠道病毒71(EV71)、柯萨奇病毒A组16(CA16)和麻疹病毒(MV)的高通量液相芯片检测方法.方法 针对EV71、CA16和MV全基因组序列,分别设计特异性引物和探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,建立EV71、CA16和MV高通量核酸液相芯片检测方法.并对该方法灵敏度、特异度进行验证.结果 液相芯片检测方法对EV71、CA16和MV的检测结果与多重PCR的检测结果一致.该方法能同时完成对其中任何1种及3种病毒的检测,特异性好,灵敏度低可达2.14 pg/μl.结论 该方法用于3种发热伴出疹症候群病毒的检测具有较高的灵敏度和特异性,可用于EV71、CA16和MV的实验室检测.
-
肠道病毒71型北京分离株VP4基因序列及蛋白抗原性分析
为探讨肠道病毒71型(EV71)VP4基因序列与手足口病(HFMD)不同临床类型之间的关系,分析重组蛋白EV71 VP4的抗原性,并初步探讨其与柯萨奇病毒A16(CA16)重组蛋白VP4是否存在交叉反应性,对2007～2009年从北京息HFMD儿童标本分离到的10株EV71的VP4基因进行克隆测序,运用生物学软件对测序结果进行比较分析,并选择其中1株与1株同期分离的CA16的VP4分别进行原核表达;用表达产物对189份正常体检的成人及来首都儿科研究所就医的非HFMD患儿血清中的IgG进行Western Blot检测,并分析14份确诊为EV71感染和12份CA16感染患者急性期血清中的IgM抗体.分析表明这10株EV71 VP4基因核苷酸同源性为94.20%～100.00%,所推导的氨基酸序列则完全相同,从重症与轻症患儿分离的毒株之间VP4的核苷酸序列未见一致性的差异,基于EV71 VP4基因核苷酸序列的进化树分析表明2007～2009年北京地区所流行的毒株均属于C4亚型;本研究中EV71和CA16的VP4核苷酸序列的同源性为69.6O%,所推导的氨基酸序列的同源性为78.60%,在运用Western Blot检测189份血清中的VP4特异性IgG时,EV71 VP4的血清阳性率为38.10%,说明其具有良好的抗原性,CA16 VP4的血清阳性率为58.20%,两者差别具有显著统计学意义(x2=15.30,P＜0.01,提示EV71 VP4与CA16 VP4没有交叉反应性;在用表达的VP4检测已确诊为相应病毒的特异性IgM时,两者皆为阴性,提示感染后机体对VP1和VP4产生不同的反应.
-
2006～2010年泰安市手足口病流行特征分析
目的 了解2006～2010年泰安市手足口病流行病学特征. 方法 应用描述流行病学方法对泰安市2006～2010年手足口病疫情资料进行分析. 结果 2006～2010年泰安市累计报告手足口病19 213例,死亡4例,年均发病率为68.95/10万,死亡率为0.01/10万,病死率为0.02％；发病呈逐年上升趋势,其中2006年623例,发病率为11.29/10万；2010年8 337例,发病率为147.67/10万.手足口病每年5～8月发病较多,个别年份10～12月可再次发生流行,并可使次年手足口病流行提前；经济发达及沿交通干线分布的区域为手足口病的高发地区；手足口病发病以散居儿童为主,占全部报告病例的69.47％,1～2岁发病率高,报告病例占全部报告病例的46.07％;2008和2009年以EV71为优势流行毒株,2010年以CA16为优势流行株. 结论 秋冬流行峰的出现预示来年手足口病流行将提前,EV71与CA16交替流行使手足口病疫情居高不下.
-
手足口病病例及其密切接触者病原检测与基因特征分析
目的 了解广东省手足口病病例及其密切接触者病原体基因型,为科学防控手足口病提供依据.方法 采集手足口病病例及其密切接触者的粪便标本,采用荧光定量PCR检测病原体基因,采用RDa细胞进行病毒分离,对毒株进行VP1区全序列分析.结果 EV71或CA16感染病例密切接触者均分别检出EV71或CA16,阳性率分别为25.64％和38.03％;EV71毒株与C4亚型的C4a群同源性高(98.5％～98.7％);5株CA16毒株与B1亚型的B1b群同源性高(94.9％～97.1％);16株CA16毒株与B1亚型的B1a群同源性高(97.4％～98.1％);病例与其密切接触者的EV71或CA16毒株核苷酸同源性分别为99.9％～100.0％和99.8％～100.0％.结论 2010年广东省手足口病病原体EV71属C4亚型C4a群;CA16属B1亚型,包括B1a和B1b两个群;病例与其密切接触者病毒分离株的VP1区核苷酸高度同源,但存在变异现象.
-
389例手足口病例EV71和CA16型肠道病毒感染情况调查
目的 调查389例儿童手足口病例肠道病毒(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染情况,为手足口病的防控提供指导. 方法 以2016年河南省郑州儿童医院确诊的582例手足口病患儿为研究对象,收集患儿咽拭子、肛拭子和粪便标本,对EV71、CA16以及肠道病毒通用型(EV-G)进行特异性核酸检测,对手足口病患者的流行特征进行描述性分析. 结果 582例手足口病病例中肠道病毒阳性389例,其中EV71感染119例,占30.59％,CA16感染83例,占21.34％;其他肠道病毒感染187例,占48.07％.春、夏、秋、冬四季手足口病病例数分别为154、79、65和91例,其中EV71感染致手足口病病例数分别为47、24、16和32例,CA16感染病例数分别为31、16、13和23例.6～月龄患儿110例,EV71、CA16及其他肠道病毒致手足口病例数分别为31、16和63例;12～月龄患儿201例,病例数分别为60、43和98例;24～36月龄患儿78例,病例数分别为28、24和26例.男性患儿217例,占55.78％,女性患儿172例,占44.22％.幼托儿童、散居儿童及其他儿童肠道病毒感染病例数分别为297、59和33例,EV71感染分别为84、27和8例,CA16感染分别为53、19和11例,其他肠道病毒感染分别为160、13和14例. 结论 手足口病患儿感染肠道病毒类型以EV71型为主,春季为肠道病毒感染高峰期,12～24月龄男童为高发人群;儿童聚集环境应及时通风消毒等,控制病毒传播.
-
柯萨奇病毒A6型所致手足口病流行特征分析
目的 对柯萨奇病毒A6型(CA6)所致手足口病患儿流行特征及临床表现进行分析,为该病的预防控制提供科学依据. 方法 收集2016年1～12月海南省妇幼保健院儿科手足口病患儿的临床资料进行描述性流行病学分析;采集患儿肛拭子标本,使用荧光定量PCR试剂盒进行病毒核酸检测,分析其结果. 结果 1 368例手足口病患者中检出EV71感染287例(占20.98％),CA16感染228例(占16.67％),CA6感染179(占13.08％％).CA6感染组男女比例为1.89∶1,CA16感染组男女比例为1.23∶1差异有统计学意义(x2=4.620,P＜0.05);CA6感染组平均年龄为(2.91±2.12)岁,EV71及CA16感染者平均年龄分别为(3.49±2.19)岁和(3.38±2.11)岁,差异均有统计学意义(P＜0.05);CA6组皮疹易出现在躯干,与其他两组相比差异有统计学意义(x2=9.568,P＜0.05);CV6组与EV71组相比皮疹较少出现在足部,两组间差异有统计学意义(x2 =5.614,P＜0.05);CA6组发热率75.61％,与EV71组(51.22％)和CA16(47.37％)比较差异均有统计学意义(x2 =23.339,P＜0.05);EV71组和CA16组病例主要集中发生在4～8月份,CA6组主要发生在7～10月,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 CA6为儿童手足口病新的流行病原之一,其发病的平均年龄较小,多数患儿有发热症状,皮疹呈多样性,且多出现在躯干,流行高峰期为7～11月份.
-
手足口病患者肠道病毒感染特征分析
目的 调查手足口病患者肠道病毒感染情况,指导临床疾病预防和控制. 方法 收集183例手足口病患儿临床资料及标本,样本经前处理后提取RNA,采用荧光PCR试剂盒检测EV71、CA16以及其他肠道病毒,并对结果进行统计学分析. 结果 2016年确诊的183例手足口病患儿中,肠道病毒阳性86例,其中EV71感染46例(占53.49％),CA16感染27例(占31.40％),其他肠道病毒感染13例(占15.12％);0～岁组51例(占59.30％),1～岁组13例(占15.12％),3～岁组22例(占25.58％),0～岁组与其他组相比,差异有统计学意义(x2 =5.9535,P=0.0147).男性患儿57例(占66.28％),女性患儿29例(占33.72％),男、女性差异有统计学意义(x2=18.2326,P=0.0000).57例肠道病毒感染手足口病男性患儿中,EV71感染33例,CA16感染16例,其他肠道病毒感染8例;29例女性患儿中,EV71感染13例,CA16感染11例,其他肠道病毒感染5例.春季感染患者31例(36.05％),夏季感染患者17例(19.77％),秋季感染患者14例(16.28％),冬季感染患者13例(27.91％),差异有统计学意义(x2=13.3953,P=0.0003).手足口病发热、手部皮疹、足疹、口腔疱疹、住院患者各73例(84.88％)、65例(75.58％)、62例(72.09％)、54例(62.79％)、17例(19.77％),平均住院时间5d. 结论 手足口病患儿肠道病毒感染类型以EV71为主,以0～岁、男性患儿多发,且以春季为发病高峰期,主要临床表现有发热、皮疹等.
-
肠道病毒、EV71及CoxA16多重PCR检测方法的研究
目的 建立多重聚合酶链反应(multiplex polymerase chain reaction)方法,检测手足口病患者粪便、咽拭子标本中的肠道病毒(Pan-enterovirus,PE)、肠道病毒71型(Enterovirs 71 EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus,CoxA16).方法 设计3对寡核苷酸引物,分别在同一体系中扩增PE、EV71及CoxA16特异性基因片段,优化反应体系,测定该方法的灵敏性,并用乙型脑炎病毒、轮状病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型检测其特异性.结果 对临床标本作多重PCR检测,EV71(+)标本可见264 bp和440 bp两条特异性条带,CoxA16(+)标本可见440 p、550 bp两条特异性条带,PE(+)EV71(-)CoxA16(-)标本可见440 bp 1条特异性条带.病毒cDNA低检出浓度分别为4.78、2.36和43.27 μg/ml.提取乙型脑炎病毒、轮状病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型核酸,进行同体系、同条件多重PCR扩增,均为阴性.结论 多重PCR方法能在一个反应体系和反应条件下同时检测PE、EV71、CoxA16,且特异性强,灵敏度高,可用于手足口病的临床诊断和流行病学调查.
-
2010年泰安市手足口病病原学检测分析
目的 对2010年泰安市手足口病病例进行病原体检测和分析.方法 对临床收集的手足口病病例的粪便标本437份、咽拭子标本25份,采用实时荧光PCR筛选出肠道病毒通用引物阳性标本,分别用CA16和EV71型的特异引物进行分类检测.结果 肠道病毒总阳性率为82.47%(381/462),其中CA16阳性率为38.31%(177//462),EV71阳性率为19.48%(90/462),CA16的阳性率显著高于EV71.粪便标本的阳性率为84.67%(370/437),显著高于咽拭子的44%(11/25)(χ2 = 27.05,P< 0.01).本研究病例发病年龄多为1～5岁,男性略多于女性.结论 2010年度泰安市手足口病疫情以CA16感染为主,粪便标本的阳性率较高,采用分子生物学方法检测手足口病病原体对手足口病的监测及防控具有重要意义.
-
CD8+T细胞在CA16感染手足口病中的表达变化及潜在作用
目的:对比分析15～24个月及2～5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot andmouth disease,HFMD)患者外周血中CD8+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素.方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿童HFMD病例外周血标本共72例,其中普通型32例,危重症40例,采用流式细胞术对患者外周血CD8+T淋巴细胞亚群进行检测分析.结果:15～24个月普通型HFMD患者外周血CD8+T淋巴细胞百分比略高于正常健康儿童参考值,而危重症患者CD8+T细胞略低于正常参考值.此外,与正常参考值相比,2～5岁普通型及危重症患者外周血中CD8+T淋巴细胞百分比均减低,其中危重症患者略低于普通型患者.结论:CA16感染后,不同年龄、不同病情的HFMD患者外周血中CD8+T细胞的表达变化不太明显,说明CA16感染后,患者体内的CD8+T细胞基本能够发挥正常的抗病毒免疫效应.而在危重症时,两个年龄段患者CD8+T细胞百分比略低或减低,说明CA16的持续性感染可能对机体CD8+T细胞的表达产生了影响,使其杀伤病毒效应减低,这可能是CA16感染诱导神经系统并发症发生的免疫病理因素之一.
-
佳木斯地区2009年1-8月手足口病病原体检测分析
目的 对2009年1-8月佳木斯地区手足口病病例进行病原体检测.方法 临床诊断为手足口病病例的咽拭子标本357份,分别使用PE通用、CA16和EV71型的特异引物进行RT-PCR检测.结果 总肠道病毒阳性率为18.50%,CA16阳性率为4.80%,EV71阳性率为5.30%.阳性率较高的年龄为2～5岁,男性略多于女性.结论 分子生物学方法可用于手足口病的病原体检测、EV71和CAl6分型,对手足口病的监测及防控具有重要作用.
-
实时荧光RT-PCR快速检测手足口病病原体结果分析
目的 建立手足口病的实时荧光RT-PCR检测技术平台,开展手足口病病原学检测工作,为手足口病防控提供实验依据.方法 用实时荧光RT-PCR法检测河池市2010-2011年手足口病EV、EV71和CA16病毒核酸.结果 共检测578例手足口病临床诊断病例样本,421例EV阳性,阳性率为72.84％；其中EV71阳性109例(25.89％),CA16阳性198例(47.03％),其他肠道病毒阳性114例(27.08％)；6岁以下儿童EV阳性占所有感染者的99.05％；2010和2011年儿童EV71、CA16、其他肠道病毒阳性率分别为47.86％、10.00％、18.57％和9 59％、42.01％、20.09％；重症病例EV71阳性率为65.38％.结论 实时荧光RT-PCR法,适合于手足口病快速确诊及常规监测,特别是重症病例诊断的重要依据.该市不同年度手足口病感染型别有差异,2010年的主要病原体为EV71,其次是其他肠道病毒；而2011年的主要病原体为CA16,其次其他肠道病毒.6岁以下儿童是EV感染的高危人群；EV71是引起重症病例的主要病原体.
关键词： 手足口病 EV71 CA16 实时荧光RT-PCR -
2010年河池市手足口病病原体检测分析
目的 通过对河池市手足口病病例进行病原体检测,明确河池市手足口病流行的主要病原体,为手足口病的诊治、监测及防控提供依据.方法 对2010年4-10月份140例临床诊断为手足口病患者的肛拭子和咽拭子标本203份,采用实时荧光PCR法同时检测EV、EV71和CA16病毒核酸.结果 140例病例中EV核酸阳性107例,阳性率76.43％,其中EV71阳性率47.86％ (67/140),CA16阳性率10.00％ (14/140),其他肠道病毒阳性率18.57％ (26/140).重症病例72例,为5岁以下儿童,其中EV71病毒50例,其他肠道病毒12例.结论 ①2010年河池市手足口病流行的主要病原体为EV71病毒;②实时荧光PCR法检测EV、EV71和CA16病毒核酸方法简便,速度快,是一种较好的检验方法.
-
锡林郭勒盟2010年手足口病病原体RT-PCR检测分析
目的 对2010年锡林郭勒盟手足口可疑标本进行病原体检测.方法 疑似手足口病病例的咽拭子或肛拭子标本143份,分别使用CA16和EV71型特异引物进行RT-PCR检测.结果 总肠道病毒阳性率为44.05%,CA16阳性率为9.09%,EV71阳性率为14.68%.结论 RT-PCR方法可用于手足口病的病原体检测、EV71和CA16分型以及接触者的排查,有利于感染者的早发现、早隔离,对手足口病的监测及防控有重要作用.因此,应当采用分子生物学方法对手足口病进行病原学检测.
-
RT-PCR检测运城市手足口病患儿肠道病毒结果分析
目的：了解本地区手足口病病毒感染情况，为临床医师治疗手足口病提供基础数据。方法选取我院感染性疾病科收治的手足口病患儿86例，用实时荧光定量 PCR （RT-PCR）检测患儿咽拭子肠道病毒通用型（EV）、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果 EV、EV71、CA16阳性率为分别为44.2%，20.9%，3.5%；男女患儿EV、EV71、CA16阳性率分别为44.4%和43.9%，17.8%和24.4%，2.2%和4.9%；<1岁手足口病患儿，EV、EV71、CA16阳性率分别为46.2%，7.7%，0%；1岁~2岁患儿，EV、EV71、CA16阳性率分别为37.2%，20.9%，2.3%；≥2岁患儿，EV、EV71、CA16阳性率分别为53.3%，26.7%，6.7%。结论运城市手足口病病原以EV71型为主，女患儿EV71感染阳性率高于男患儿，≥2岁患儿病毒检出阳性率高。
-
2016年长春市手足口病病原学监测结果分析
目的 了解2016年长春市手足口病的流行特点,为及时防治手足口病工作提供科学依据.方法 采用实时定量PCR(Real-time PCR)法对手足口病例标本进行核酸检测.结果 2016年1月-12月共采集623份病例标本,阳性率为64.53％,高发期在5-10月,其中95.02％病例在6岁以下.结论 长春市2016年手足口病原的优势株为柯萨奇6型(CA6),其次是柯萨奇CA16型及其他非EV71和非CA16型.
-
EV71和CA16感染的手足口病患儿临床特征及干预对策
目的 探讨EV71和CA16感染的手足口病患儿临床特征和危险因素,制定相应的干预对策.方法 选取2016年1-12月在本院就诊的EV71、CA16感染所致手足口病患儿80例,其中43例经对症治疗后回归社区.根据再次住院情况分为复诊住院组14例,对照组66例.观察并记录患儿临床症状指标,Logistic回归分析复诊住院的危险因素,针对性提出干预对策.结果 患儿平均就诊时间(2.26±0.69)d,血白细胞计数平均(8.86±3.73)×109,平均体温(37.59±1.27)℃,检出EV71感染71例、CA16感染19例.复诊住院组与对照组患儿感染病毒类型、接触史之间差异无统计学意义(P＞0.05);就诊时间、就诊体温、白细胞计数、并发症情况两组间差异有统计学意义(P＜0.05).Logistic多因素回归分析显示,就诊时间≥3 d、就诊体温＞38.5℃、白细胞计数＞10×109、存在并发症均为EV71、CA16感染所致手足口病患儿复诊住院的独立危险因素.结论 应增强对存在独立危险因素的患儿回归社区后的日常监察与照护,当症状未明显好转或存在并发症时立即到医院就诊,防治病情向重症发展.
-
2009与2010年佳木斯市手足口病监测结果分析
手足口病(Hand-foot-mouth Disease, HFMD)是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,是我国法定报告管理的丙类传染病.其病原体主要为小RNA病毒科肠道病毒属的一组肠道病毒,包括柯萨奇病毒A组的4、5、7、9、10、16型,B组的2、5、13型,埃可病毒(Echo)以及人肠道病毒71型,尤以人肠道病毒71型(human enterovious 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CoxA16)为常见[1～3].一般预后良好;少数病例,特别是EV71感染引起HFMD,而且可引起严重中枢神经系统并发症,如脑膜炎、脑炎、急性迟缓性瘫痪等[4].
-
2010年盐城地区手足口病例肠道病毒型别调查
目的 对盐城地区2010年手足口病患儿及其临床重症病例进行病原学调查.方法 采集手足口病患儿咽拭子和肛拭子,对其病毒核酸进行肠道病毒检测定型.结果 481例(含重症52例)患儿采集的咽拭、肛拭标本中,共检测出病毒核酸阳性326例,阳性率为67.78％,其中CA16型44例(13.50％)、EV71型179例(54.91％)、未定型103例(31.59％). 52例重症病例中共检测出病毒核酸阳性45例,阳性率为86.54％,其中EV71型32例(71.11％)、未定型13例(28.89％)、CA16型0例.326例病毒核酸阳性患儿中男214例,女112例；45例病毒核酸阳性重症患儿中男33例,女12例.结论 盐城地区手足口病患儿检测到的主要病原体是CA16和EV71等,EV71感染率高于CA16感染率,肠道病毒EV71是引起重症病例的主要病原体.
