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锌转运蛋白ZnT家族的生理功能及在雄性生殖系统中的作用
目的:锌是哺乳动物必须微量元素之一,锌转运蛋白对维持机体锌稳态平衡具有至关重要的作用.锌转运蛋白ZnT家族对维持细胞内锌稳态是不可或缺的,发挥重要的生理功能.本文从锌与男性生育、ZnT的生理功能和ZnT在雄性生殖系统作用几方面的研究进展予以综述.
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锌转运蛋白家族SLC39A/ZIP与肿瘤相关性的研究进展
锌(Zn)作为人体必需的微量元素,参与人体多种酶的合成并对细胞的生长、增殖起到重要作用.在细胞水平,Zn2通过复杂的摄取、储存和排泄机制维持着动态平衡,其中包含了Zn转运蛋白家族发挥的作用.目前发现人类两个主要的Zn转运蛋白家族SLC30 (ZnT)家族和SLC39(ZIP)家族控制着细胞内外的Zn2平衡.ZnT家族主要将Zn转运出细胞,而ZIP家族主要负责摄取转运Zn至细胞内.研究发现后者与多种疾病相关.ZIP转运蛋白家族和肿瘤的进程、进展关系密切.近期的研究提示,在前列腺癌组织中ZIPI、ZIP2低表达,在乳腺癌组织中ZIP6、ZIP7和ZIP10高表达,在胰腺癌组织中ZIP3和ZIP4高表达,在食管癌组织中ZIP5和ZIP6高表达.因此,ZIP家族在前列腺癌中可能是抑癌基因,在胰腺癌、乳腺癌和食管癌中可能是癌基因.本文对SLC39转运蛋白家族与肿瘤相关的新研究进展进行综述.
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饲粮锌水平对肉仔鸡组织锌转运蛋白基因表达的影响
目的 研究饲粮中不同水平锌对肉仔鸡组织锌转运蛋白基因表达的影响.方法 选用1d龄从肉公鸡720只,随机分为8个处理组,每个处理6个重复,分别饲喂不加锌的玉米一豆粕型基础饲粮(对照组)和添加水平为20、40、60、80、100、120和140 rag/kg硫酸锌的饲粮,试验期21d,分为1～7 d龄,8～14 d龄和15～21 d龄三阶段进行.结果 各日龄胰脏锌转运蛋白-2的基因表达均受到饲粮锌水平显著的影响,7 d龄时随饲粮锌添加量的增加呈明显的渐近线变化趋势,而14d龄与21d龄均呈二次曲线变化趋势.本研究表明,胰脏ZnT2 mRNA水平可以敏感的反应肉仔鸡锌的营养状况,提供了一个新的锌营养标识;在肉仔鸡体内锌的稳恒调节作用中,ZnT2可能为第一道防线,当饲粮锌含量超过一定范围时,其它锌稳恒调节蛋白如MT等则发挥着重要的作用.蛄论胰脏ZnT2mRNA水平可以敏感地反应肉仔鸡锌的营养水平,在肉仔鸡体内锌起稳恒调节作用.
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ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠脑血管及脉络丛的一致性分布
目的 研究锌转运蛋白3(Zinc Transporter 3,ZnT3)与β-淀粉样蛋白(β-amyloid,A β)在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的定位分布,探讨ZnT3影响脑锌平衡从而参与AD发病的可能机制.方法 应用免疫荧光技术和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT3和A β在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的共存情况.结果 APP/PS1转基因小鼠侧脑室及第三、四脑室的脉络丛上皮细胞均呈ZnT3和A β染色阳性,二者共同表达于上皮细胞的胞质内,而细胞核未见任何着色.在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层中,几乎所有Aβ阳性的血管壁上均有ZnT3的表达,二者的分布同样具有一致性.结论 ZnT3与A β在APP/PS1转基因小鼠大脑血管及脉络丛上皮的一致性分布,提示ZnT3可能参与A β在大脑血管及脉络丛上皮的沉积.
关键词： APP/PS1转基因小鼠 锌转运蛋白 β-淀粉样蛋白 血管 脉络丛 -
游离锌离子在小鼠颈上神经节的分布
目的研究游离锌离子在小鼠交感节后神经元中的分布.方法应用ZnSe金属自显影技术和透射电镜检测硒酸钠注射1.5和24hr后小鼠颈上神经节内的游离锌离子.结果注射硒酸钠1.5 hr后的小鼠颈上神经节中几乎所有的神经元均有锌阳性反应产物分布,透射电镜下观察锌离子主要分布于神经元细胞核周围的高尔基复合体和小泡状结构内.注射硒酸钠24 hr后有锌阳性反应的神经元约为10%,提示锌离子在交感节后神经轴突内进行轴突运输.结论小鼠颈上神经节神经元胞体内含有丰富的游离锌离子,游离锌离子在轴突内进行轴突运输.
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锌转运蛋白1 siRNA转染骨髓间充质干细胞对肿瘤坏死因子α信号成脂通路的影响
背景:课题组前期研究已经证实乙醇能促进骨髓间充质干细胞成脂分化,上调肿瘤坏死因子α成脂通路蛋白PPARγ,aP2的表达.锌转运蛋白1(Zrt/Irt-like Protein 1,ZIP1)作为ZIP蛋白家族的成员与骨代谢和成骨分化有密切的关系.目的:观察ZIP1 siRNA转染的骨髓间充质干细胞对肿瘤坏死因子α信号成脂通路的影响.方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用0.03,0.09,0.15,0.21 mol/L乙醇进行培养,再使用ZIP1 siRNA转染骨髓间充质干细胞,同时对兔骨髓间充质干细胞进行ZIP1转染培养.结果与结论:①aP2,PPARγ蛋白的表达:不同浓度乙醇培养aP2,PPARγ蛋白表达均较明显升高(P<0.05);除0.03 mol/L乙醇组之外,其他浓度乙醇组三酰甘油水平明显升高(P<0.05);沉默ZIP1基因转染乙醇培养的骨髓间充质干细胞后,各乙醇浓度组aP2,PPARγ蛋白的表达量及三酰甘油水平均明显升高(P<0.05),而骨髓间充质干细胞经ZIP1表达载体转染后,aP2,PPARγ蛋白表达明显降低(P<0.05);②结果表明:沉默ZIP1表达能激活骨髓间充质干细胞的肿瘤坏死因子α信号成脂通路的表达,从而发挥促进细胞的成脂分化能力.
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锌转运蛋白4 cDNA稳定转染对前列腺癌DU145细胞株生物学行为的影响
目的 探讨锌转运蛋白(ZIP)4对前列腺癌细胞系生物学行为的影响.方法 比较3种不同的前列腺癌细胞系(22RVl、DU145、PC3),选择ZIP4低表达的细胞株,转染构建ZIP4过表达的前列腺癌细胞系,进一步应用MTT、Transwell及细胞划痕等试验检测ZIP4过表达后对前列腺癌细胞系增殖活性及侵袭转移能力的影响.结果 建立稳定表达ZIP4的DU 145前列腺癌细胞系;转染后的DU145-ZIP4细胞系的增殖活性及侵袭能力与转染空载体组相比均显著下降(P＜0.05),但其迁移能力与转染空载体组相比未见明显变化(P＞0.05).结论 ZIP4基因对前列腺癌细胞系的增殖活性及侵袭能力有显著抑制作用,ZIP4可能是前列腺癌的一个抑癌基因.
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锌转运蛋白ZIP8在骨关节炎中的表达及其机制研究
目的:探讨锌转运蛋白ZIP8在骨关节炎患者中的表达及其对软骨细胞生长及基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响.方法:收集20例骨关节炎患者(OA组)和20例非骨关节炎患者(对照组)血清和软骨组织;采用原子吸收分光光度计测定患者血清和软骨组织中锌离子的表达水平;MTT方法检测软骨细胞的生长活力;采用小RNA干扰沉默ZIP8基因的表达;实时荧光定量PCR方法检测ZIP8及金属基质蛋白酶MMP3、MMP9、MMP12和MMP13等基因的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹检测ZIP8及MMP3、MMP9、MMP12和MMP13等蛋白的表达水平.结果:OA组的血清和软骨组织中的锌离子浓度明显高于对照组(P＜0.01).OA组软骨组织中ZIP8的mRNA(P＜0.05)和蛋白(P＜0.01)表达水平显著高于对照组.ZIP8小RNA干扰片段可以有效的沉默ZIP的基因表达(P＜0.01);沉默ZIP8的表达促进骨关节炎患者来源的软骨细胞的生长(P＜0.05),并且降低基质金属蛋白酶包括MMP3,MMP9,MMP12和MMP13的表达水平(P＜0.05).结论:ZIP8与骨关节炎密切相关,沉默ZIP8的表达可以提高软骨细胞的生长活力,并且抑制基质金属蛋白酶的表达,为骨关节炎的治疗提供了新的靶点.
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锰中毒大鼠海马锌含量与锌转运蛋白的关系
[目的]探讨锰中毒大鼠海马区锰和锌含量变化及与锌转运蛋白3(ZnT3)之间的关系.[方法]将40只雄性SD大鼠随机分成4组,每组10只,即生理盐水对照组和染锰低剂量、中剂量、高剂量组.分别给予腹腔注射生理盐水及氯化锰溶液3、6、12mg/(kg·d)连续注射8周,锰中毒造模成功后取大鼠海马组织,做HE染色病理切片观察其病理改变,石墨炉原子吸收仪测定海马锰、锌含量变化,Western blot法检测大鼠海马区ZnT3含量,实时荧光定量PCR法测定大鼠海马区ZnT3 mRNA的表达.[结果]染毒后大鼠海马神经细胞均出现不同程度嗜酸性变,胞浆凝聚、结构不清,且出现细胞皱缩和嗜酸性小体.与对照组及低剂量组比较,高、中剂量组大鼠海马组织中锰及锌含量均明显增高(P＜0.05);而高剂量组锌含量也高于中剂量组(P＜0.01).高、中、低剂量组大鼠海马组织中ZnT3含量分别为1.01±0.03、0.80±0.02、0.65±0.13,均高于对照组(0.51±0.06)(P＜0.05).高、中剂量组ZnT3基因相对表达分别为3.40±0.36、2.88±0.69,均高于对照组及低剂量组(1.47±0.60)(P＜ 0.001).[结论]锰中毒可破坏大鼠海马神经元细胞结构,且海马组织中锌含量与ZnT3同步增高.
