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实时荧光RT-PCR方法检测水及水产品中霍乱弧菌
[目的]探索实时荧光RT-PCR方法在霍乱弧菌检验方面是否比传统方法有优势.[方法]用深圳太太基因工程有限公司提供的霍乱弧菌实时荧光RT-PCR试剂盒方法进行检验.[结果]用实时荧光RT-PCR方法从样品的2次增菌液中检出2个样品为霍乱弧菌通用型阳性.用传统的微生物生理、生化培养法,从上述2个样品中分离出3株菌株.根据血清分型、API鉴定和荧光RT-PCR,确认所分离的菌株有2株是国际检疫传染病的病原-O1群霍乱弧菌;1株是非O1/非O139群霍乱弧菌.[结论]实时荧光RT-PCR方法在霍乱弧菌的检验方面具有快速、灵敏、特异性强等优势,有利于提高霍乱弧菌的检出率.
关键词： 弧菌 霍乱 实时荧光RT-PCR API鉴定 -
实时荧光PCR方法检测水产品中沙门菌
[目的]探索沙门菌快速检验法,加快水产品检验检疫通关速度,促进外经贸经济的发展.[方法] 用深圳太太基因工程有限公司提供的沙门菌实时荧光PCR试剂盒对水产品样本进行检验.[结果]用实时荧光PCR从多个水产品样品的增菌液中检出9份样品沙门菌阳性,用传统的微生物生理生化培养法从该9份样品中分离出9株沙门菌.根据血清分型、棚鉴定和荧光PCR结果,确认所分离的菌株中有沙门菌B群3株、Cl群4株、D群1株、其他群1株.[结论]实时荧光PCR方法在沙门菌的检验方面较传统方法具有快速、灵敏、特异性强等优势,有利于提高沙门菌的检出率,具有广阔的运用前景.
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Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测肠球菌方法评估
目的用Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统(简称Phoenix-100系统)检测肠球菌并评估此检测系统.方法收集50株临床分离肠球菌,用Phoenix-100系统进行鉴定及药敏试验,通过与API鉴定系统、药敏纸片法和E-test法[筛选耐万古霉素肠球菌(VRE)]比较,对Phoenix-100系统进行评估.结果与API鉴定系统相比,Phoenix-100系统鉴定肠球菌的一致率为90.0%.与药敏纸片法相比,Phoenix-100系统检测肠球菌对庆大霉素(筛选耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌)、氨苄西林、环丙沙星、红霉素、呋喃妥因、万古霉素和肽可霉素药敏结果的完全符合率分别为94.0%、94.0%、88.0%、94.0%、70.8%、64.0%和92.0%.与E-test法相比,Phoenix-100系统筛选VRE的完全符合率为84.0%;未出现极大错误,大错误率为12.0%,小错误率为4.0%.结论用Phoenix-100系统检测肠球菌是一种简便、快速和比较准确可靠的方法.
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原代鸡胚成纤维细胞中的污染微生物分析
目的 检测鸡胚细胞中微生物污染情况,初步分析污染源头并提出相应的防污染措施.方法 利用API系统分别对分离自原代鸡胚成纤维细胞中的3种常见的微生物菌株进行鉴定.结果 经鉴定3株污染菌株分别为木糖氧化产碱菌(Alcaligenes xylosoxidans)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus.结论 从鉴定的结果分析,产生微生物污染的因素是多方面的,但其中工作人员没有严格执行操作规范,自身携带的微生物是导致微生物污染的主要因素,其次是洁净室环境、设施及日常清洁消毒工作不到位.因此,严格执行各项规章制度,规范人员操作,彻底消毒洁净室通风系统和相关设施并做好日常清洁消毒工作对于防止原代细胞污染至关重要.
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食品中李斯特菌检测方法探讨及药敏结果分析
目的探讨食品中李斯特菌(LM)检测的方法,以提高李斯特菌检出率. 方法以国标法、Mini VIDAS和改良方法平行检测,结果经API鉴定;药敏试验用琼脂扩散法. 结果在8类食品45件样品中,国标法检出7株可疑菌株,改良方法检出9株可疑菌株,经国标生化法鉴定其中均有1株为默氏李斯特菌,其他均为LM,而检出的所有菌株经API鉴定均为LM.Mini VIDAS法均未检出LM.药敏试验显示LM对万古霉素、红霉素、麦迪霉素、先锋Ⅴ、SMZ、庆大霉素、氨苄青霉素等全部敏感;而对萘啶酸、头孢氨塞肟、头孢克肟、奥普托欣、多粘菌素B等则全部耐药. 结论改良方法对LM检出高于国标法,Mini VIDAS检测LM需进一步摸索,API法鉴定LM方便快捷.
关键词： 李斯特菌 API鉴定 Mini VIDAS 药敏试验
