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洗胃致急性胃穿孔1例
1 病例介绍患者,女,28岁,农民.2001年4月25日中午空腹服下低毒的抗生素农药井冈霉素约80 ml,即送入我院急诊.查体:神志清,血压120.0/82.7 mmHg,脉搏84次/min,呼吸 20次/ min,双侧瞳孔等大等圆直径约3 mm.既往无胃病史,考虑轻度农药中毒.立即给予电动洗胃 ,洗胃液清水约5 000 ml,后吸出胃内容物为血性液体,停止洗胃.终止洗胃后病人感腹胀、腹痛,呈持续加重.约3 h后予摄腹部平片报告膈下大量游离气体,诊断为急性胃穿孔.即予剖腹探查术,术中见胃小弯后壁约5 cm长斜形裂口,腹腔内吸出2 500 ml液体,手术顺利.2 讨论
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吸水链霉菌5008中谷氨酸脱氢酶SHJG_7666的性质表征
谷氨酸脱氢酶可在NAD(P)H辅因子协助下催化α-酮戊二酸和谷氨酸之间的转化,是氮代谢途径的关键酶.基于基因组BLAST分析预测,吸水链霉菌5008(S5008)中SHJG_7666 是谷氨酸脱氢酶的编码基因.本研究在大肠杆菌中对SHJG_7666蛋白进行了异源表达,并对其酶学性质进行了表征.系统发育树及同源建模结构分析显示SHJG_7666 具有保守的谷氨酸、α-酮戊二酸结合域以及经典的GXGXXG二核苷酸结合基序,其活性中心由Lys60,Lys78,Asp120催化功能位点及Ser36,Gly38,Gln119,Asp166,Asn300,Ala330谷氨酸、α-酮戊二酸结合位点组成,属于Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶家族;体外生化实验显示,其催化α-酮戊二酸转化为谷氨酸的适pH和温度分别为7. 5和37 ℃,对底物α-酮戊二酸Km为(25. 3 ±9. 1 )μmol/L, kcat为(3 ±0. 8)×10 -5s-1.本研究验证了SHJG_7666谷氨酸脱氢酶的催化功能,揭示了其活性中心关键氨基酸残基,为利用蛋白质工程手段对SHJG_7666进行分子设计以提高其催化活力,进一步利用代谢工程手段对宿主氮代谢进行调控奠定了基础.
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井冈霉素及其分解产物的开发利用
井冈霉素可酶解为井冈霉亚基胺A、井冈胺和井冈霉胺.井冈霉亚基胺A是昆虫的海藻糖酶抑制剂,可开发为生物杀虫剂;井冈胺和井冈霉胺是糖苷酶抑制剂,是合成其他新酶抑制剂类降糖药的重要医药中间体.本文就井冈霉素的高附加值产品井冈霉亚基胺A、井冈胺和井冈霉胺的结构、特性以及制备方法作一综述.
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微生物转化法裂解井冈霉素生产井冈霉亚基胺A
分析了生产过程中各参数对井冈霉亚基胺A产率和井冈霉素转化率的影响,确定了生产井冈霉亚基胺A的适培养条件:T30 C.pH6.0,[S]=80g/L,接种量10%,t=36h.同时得到了菌体生长、基质消耗和产物合成动力学,模型的拟合结果和实验值能较好的吻合.
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外循环气升式生物反应器气含率及其用于井冈霉素发酵的研究
对外循环气升式生物反应器的气含率进行了试验研究,得出了气含率与操作条件之间的关联式.在此基础上,进行了井冈霉素发酵试验,并与10L机械搅拌生物反应器进行了比较,实验结果表明:当外循环气升式生物反应器的空气喷嘴直径为1.5和3.0mm时,井冈霉素的发酵效价分别为19975和18950u/ml,而10L机械搅拌生物反应器的井冈霉素发酵效价为19630u/ml.因此,将气升式生物反应器应用于井冈霉素的发酵是一项值得研究的工作.
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芳香族氨基酸添加提高井冈霉素产量的研究
目的 通过添加芳香族氨基酸促进井冈霉素生物合成起始单位的供应,提高其发酵产量.方法 优化苯丙氨酸添加时间和浓度确定优添加条件,分析前体代谢相关的酶活考察其影响机制.结果 确定苯丙氨酸佳添加条件为在发酵第24h添加0.1g/L.发现37℃时苯丙氨酸的添加提高了井冈霉素A产量,但在42℃条件下提高幅度大大降低.通过分析6-磷酸葡萄糖脱氢酶酶活,发现芳香族氨基酸添加并未影响其酶活.结论 苯丙氨酸的添加能有效提高井冈霉素发酵产量近60％.苯丙氨酸的添加可能通过反馈抑制降低了戊糖磷酸途径中中间体的消耗,从而为井冈霉素合成提供了更加充足的7-磷酸景天庚酮糖.
关键词： 井冈霉素 吸水链霉菌 芳香族氨基酸 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 戊糖磷酸途径 -
一株转化井冈霉素产生井冈霉胺细菌的筛选与鉴定
目的 筛选以井冈霉素为底物,转化产生井冈霉胺的菌株.方法 通过以井冈霉素为碳源,富集培养能够利用井冈霉素的菌株,划线分离出单菌落.各种菌株转化井冈霉素后的产物经衍生化反应后以HPLC法分析.结果 经过对225株细菌、真菌和放线菌的筛选,终得到一株以井冈霉素为底物裂解产生井冈霉胺的菌株Y07B-0134.结论 经形态学、生理生化鉴定和16S rDNA基因序列对比分析,确定该菌株为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum).
