首页 > 文献资料
-
回春偏瘫方对缺血再灌注大鼠脑内生长相关蛋白-43、突触素P38表达的影响
目的:探讨回春偏瘫方对缺血再灌注大鼠神经轴突再生和突触重建的作用机制.方法:以大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注大鼠模型为实验对象,采用免疫组织化学方法,分别以大鼠脑组织神经生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)、突触素P38(synaptophysin,SYN)为指标,观察回春偏瘫方对缺血再灌注大鼠神经轴突再生和突触重建的影响.结果:回春偏瘫方可增强GAP-43、SYN的表达,尤其以中、高剂量组增强明显.结论:回春偏瘫方可促进缺血性卒中后神经轴突的再生,诱导神经突触结构重建,有利于神经功能的恢复.
-
神经干细胞与脑微血管内皮细胞共移植体联合电刺激小脑顶核对局灶性脑缺血大鼠突触素P38表达的影响
背景:突触索P38广泛存在于机体所有神经终末,与神经生长、修复、再生和突触重塑密切相关.目的:实验假设细胞移植及电刺激治疗对突触素P38具有调节作用,拟验证这种作用对局灶性脑缺血大鼠突触素P38表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验及细胞观察.于2005-08/2007-02在佳木斯大学神经科学研究所完成.材料:清洁级8周龄Wistar大鼠96只,随机分为神经干细胞组、电刺激+神经干细胞组、共移植体组、电刺激+共移植体组,24只/组.另取新生24 h内Wistar鼠和1～7 d龄Wistar鼠各2只,分别用于神经干细胞、脑微血管内皮细胞的分离培养.方法:将传代的脑微血管内皮细胞按3×107 L-1密度接种在培养瓶中,贴壁后吸出脑微血管内皮细胞培养液,涂一层层粘连蛋白后接种于神经干细胞上,密度为6×108 L-1,待神经干细胞贴壁后吸出培养液,再涂以一层层粘连蛋白,接种3×107 L-1密度的脑微血管内皮细胞,共培养12～24 h,将细胞从瓶壁上依次刮起,适力吹打成1～3个脑微血管内皮细胞与5～18个神经干细胞相互包绕的细胞团,过滤后筛网上的细胞团即为神经干细胞-脑微血管内皮细胞的共移植体.各组大鼠均采用线栓法建立大脑中动脉缺血模型,其中电刺激+神经干细胞组、电刺激+共移植体组大鼠于造模前1d行小脑顶核刺激,电流强度50 μ A,频率100 Hz.时程0.5 ms,连续刺激1h.造模后3 d将培养的神经干细胞、共移植体溶解于磷酸盐缓冲液中,调整浓度为2X 1010 L-1,各组均于右侧纹状体缺血半暗带区移植对应悬液10μL.主要观察指标:移植后3,7,14,60d 免疫组织化学法检测缺血区突触紊 P38 的表达.结果:光学显微镜下突触素 P38 阳性细胞染色呈棕黄色点状或颗粒状沉积,分布较密集,主要分布在神经毡内,部分围绕在神经元胞体周围.移植后各时间点电刺激+神经干细胞组、共移植体组、电刺激+共移植体组脑缺血区突触素 P38 的表达均明显高于神经干细胞组(P<0．05);且电刺激+共移植体组升高幅度显著大于前 2 组 (JP<0．05)，并随移植时间的延长突触素 P38 表达逐渐增加(P<0．05).结论:电刺激小脑项核与共移植体整体干预有助于脑缺血区突触素 P38 的表达,作用优于单纯神经十细胞、单纯共移植体或电刺激+神经干细胞等移植方式.
-
丁苯酞改善血管性痴呆大鼠认知功能及其对海马区GAP-43和突触素表达的影响
目的：探讨丁苯酞对血管性痴呆（ VD）大鼠认知功能及对海马区GAP-43和突触素 P38表达的影响。方法选取雄性 Wistar大鼠90只，随机分为观察组、对照组、空白组各30只。空白组不采取任何操作；对照组大鼠制成VD模型，并予以生理盐水；观察组大鼠制成 VD模型后，予以丁苯肽注射液。治疗1个月后，采取 MG-Y-型迷宫检测其认知功能以及采用 Western印迹和 RT-PCR分别检测大鼠海马区内GAP-43和突触素P38的表达。结果观察组和空白组大鼠的错误反应次数均明显低于对照组（P均＜0.05），且空白组大鼠降低更明显（P＜0.05）。对照组和观察组的GAP-43在大鼠海马区内的mRNA中表达较空白组高（P均＜0.05），且观察组表达程度较对照组更高（P＜0.05）；观察组的突触素P38在大鼠海马区内的mRNA中表达较空白组和对照组均提高（P均＜0.05），而对照组和空白组之间表达无差异（P＞0.05）；观察组 GAP-43在大鼠海马区内的蛋白中表达较对照组和空白组均提高（P均＜0.05），对照组和空白组之间表达无差异（P＞0.05）；对照组和观察组的突触素P38在大鼠海马区内的蛋白中表达较空白组均提高（P均＜0.05），且观察组表达程度较对照组更高（P＜0.05）。结论对于VD大鼠，可予以丁苯酞注射液治疗，其可促进神经元的修复及再生，改善VD大鼠海马区GAP-43及突触素P38的表达，从而提供其认知功能，改善其预后。
-
乳化异氟醚对老龄大鼠术后认知功能的影响
目的 探讨乳化异氟醚对老龄大鼠术后认知功能(POCD)的影响.方法 36只24月龄雄性SD大鼠,进行Morris水迷宫定位航行训练7d,使其形成对隐蔽于水下平台定位的空间参考记忆,后随机分为3组:空白对照组(C组,n=6)、30％脂肪乳组(E组,n=6)和8％乳化异氟醚组(EI组,n=24).各组分别给予同等剂量生理盐水、30％脂肪乳、8％乳化异氟醚(1.5 ml/kg)静脉注射.C、E组于给药后6h时进行水迷宫实验,EI组分别于麻醉苏醒后6h、24h、72 h、7d时取6只大鼠,进行水迷宫实验,记录逃避潜伏期和平台象限停留时间.腹腔麻醉处死取脑,取海马区新鲜组织行Western印迹检测,检测脑环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB,p-CREB)及突触素P38的表达情况.结果 E组与C组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)；与C组比较,EI组麻醉苏醒后6 h、24 h时逃避潜伏期延长,平台象限停留时间缩短,海马CREB(p-CREB)及突触素P38表达下调(P＜0.05)；72h、7d时各指标变化无统计学意义(P＞0.05)；与6h时比较,72 h、7d时逃避潜伏期缩短及平台象限停留时间延长,海马组织CREB(p-CREB)及突触素P38含量增高(P＜0.05).结论 乳化异氟醚可导致老年大鼠一过性POCD,72 h后认知功能基本恢复,其机制与影响海马CREB(p-CREB)及突触素P38表达有关.
-
大鼠小脑皮质内突触素P38免疫反应产物的分布及年龄变化
用免疫组织化学方法结合图像分析研究突触素p38免疫反应产物在Wistar大鼠小脑皮质的分布及年龄变化,结果显示:小脑皮质内的突触素p38免疫反应产物呈板层分布,各层之间反应产物密度差异很大;在三个年龄组,小脑Ⅴ、Ⅶ叶分子层突触素p38免疫反应产物校正光密度(COD)值以青年组大,成年组次之,老年组小,各组间差异显著(P＜0.01).和青年组比较,成年组、老年组COD值在小脑皮质平均降低25.43%、47.40%.结果表明,突触素p38在大鼠小脑皮质的分布具有区域性,随着年龄的增加,突触素p38含量逐渐减少.
-
大鼠海马CA3区突触素的增龄性变化
目的 探讨海马CA3区突触素P38免疫反应产物的分布及增龄性变化的规律.方法 SD大鼠分为幼年组(1～2月龄)、青年组(4～5月龄)、中年组(11～12月龄)和老年组(≥24月龄),常规石蜡海马连续冠状切片.尼氏染色、突触素P38免疫组织化学染色,图像分析仪测量其免疫反应阳性产物的光密度值.结果 海马GAS区P38免疫反应阳性产物呈板层分布,主要分布在辐射层,其平均光密度(AOD)值以青年组大,与之比较成年组、老年组均减少,以老年组减少显著,各组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠海马CA3区辐射层突触素P38含量随增龄而逐渐减少.
-
慢性高眼压大鼠外侧膝状体神经元的损伤
目的观察在持续高眼压状态下大鼠外侧膝状体(lateral geniculate nucleus,LGN)细胞结构的变化及其与视神经纤维丢失的关系.方法通过烧灼大鼠巩膜表层静脉诱导建立大鼠慢性高眼压模型,左眼为实验眼,右眼为对照眼,分别于2、4、6个月后经心脏灌注内固定取材,对两侧LGN及视神经进行形态学观察;通过突触素P38单克隆抗体免疫组化技术,利用计算机图像分析,对LGN视神经末梢突触分布情况进行检测.并对两侧LGN及视神经的观察结果进行比较.结果随高眼压持续时间的延长,大鼠左眼视神经轴突数目以及右侧LGN神经元大小、密度显著减小;LGN内突触素P38免疫反应阳性产物平均光密度值呈下降趋势;LGN神经元的损伤与视神经轴突数目及突触素光密度值显著相关.结论持续性眼压升高对大鼠LGN有明显损伤作用;高眼压大鼠LGN的损伤继发于视神经的损伤.
-
黄芪多糖含药血清对神经干细胞增殖和分化的影响
目的:观察黄芪多糖及其含药血清对神经干细胞增殖和分化的影响.方法:将神经干细胞随机分为空白对照组、空白血清组、黄芪多糖组、黄芪多糖含药血清组,培养7d后,采用间接免疫荧光法检测Nestin,β-tubulin Ⅲ和GFAP,通过CCK-8检测细胞增殖,Elisa检测VEGF,Western Blot法检测PI3K、P-Akt和突触素p38表达.结果:黄芪多糖含药血清与黄芪多糖均能诱导神经干细胞增殖和向NSE分化,提高VEGF含量及PI3K、P-Akt和突触素p38表达.结论:黄芪多糖含药血清通过调节VEGF含量,活化PI3K/Akt信号通路,促进Akt磷酸化,调节下游靶基因,促进神经干细胞增殖;通过VEGF影响钙离子通道,提高突触素p38表达,促进神经干细胞向神经元分化.
-
妊娠期癫(癎)发作和抗癫(癎)药物对胎儿脑神经元突触素的影响
目的 探索妊娠期癫(癎)发作和抗癫(癎)药对胎儿脑神经元突触素p38(synaptophysin)的影响,以加深对妊娠期癫(癎)发作危害胎儿脑发育的认识.方法 6月龄引产胎儿分为3组:1组为妊母正常组(6例),2组为妊母应用抗癫(癎)药物控制发作组(6例),3组为妊母未应用抗癫(癎)药物控制发作组(6例).运用免疫组化法检测突触素p38在各组胎儿脑部颞叶海马旁回的变化.结果 1组免疫组化切片阳性表达产物光密度值(OD)为0.17±0.05,2组为0.16±0.08,3组为0.11±0.07,1、2组阳性表达产物无显著差异(P＞0.05),而1、2组分别与3组比较,均有差异(P＜0.05),p38在妊母未应用抗癫(癎)药物控制发作组胎儿海马旁回中的表达较妊母正常组及妊母应用抗癫(癎)药物控制发作组明显减少.结论 研究结果表明妊期癫(癎)发作对胎儿脑发育的危害比抗癫(癎)药物对胎儿的毒性更大.
-
丁苯酞注射液对血管性痴呆大鼠海马区生长相关蛋白-43及突触素P38表达的影响
目的:观察丁苯酞注射液对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马区生长相关蛋白-43(GAP-43)和突触素P38在mRNA及蛋白表达水平的影响.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法制备模型.80只大鼠随机分为假手术组、VD组、丁苯酞组.Y-型迷宫观测学习记忆能力,RT-PCR和Western Blot检测GAP-43及突触素P38的mRNA和蛋白表达.结果:VD组和丁苯酞组GAP-43 mRNA较假手术组升高(均P ＜ 0.05),丁苯酞组较VD组升高更明显(P ＜ 0.05);丁苯酞组GAP-43蛋白较假手术组和VD组均升高(均P ＜ 0.05),VD组和假手术组相比差异无显著性(P ＞ 0.05).丁苯酞组突触素P38 mRNA较假手术组和VD组上调(均P ＜ 0.05),假手术组和VD组相比差异无显著性(P ＞ 0.05);VD组和丁苯酞组突触素P38蛋白较假手术组明显下调(均P ＜ 0.05),VD组下调更明显(P ＜ 0.05).结论:丁苯酞注射液能提高VD 大鼠海马区突触素P38及GAP-43基因及其蛋白的表达,从而改善其认知功能.
