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硫酸锌糖浆含量测定方法的改进
锌是人类必需的微量元素之一.近年来,含锌药物及其制剂的研究已引起药学界的广泛重视,锌的含量测定方法有原子吸收分光光度法[1]、示波极谱滴定法[2]、乙二胺四醋酸二钠滴定法等,其中乙二胺四醋酸二钠络合滴定法为简单、方便、省时,尤其适合于医院制剂的快速检验.
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基于颜色判定的环介导恒温扩增技术快速检测铜绿假单胞菌的研究
目的 建立了一种基于颜色判定的,能够快速准确地检测铜绿假单胞菌的LAMP方法.方法 针对铜绿假单胞菌OprL基因设计3对LAMP引物,通过引物特异性识别OprL的8个独立区域来快速检测铜绿假单胞菌.如果在反应前添加荧光染料羟基萘酚蓝(HNB)或钙黄绿素(Calcein),其结果可以通过肉眼观察反应前后颜色变化来判定并经琼脂糖凝胶电泳验证.对该技术进行特异性、灵敏度分析,利用LAMP和PCR同时检测临床标本.结果 设计出针对铜绿假单胞菌OprL基因的恒温扩增检测方法.本恒温扩增检测法只扩增铜绿假单胞菌DNA,对其他菌不扩增,显示出良好的特异性.其低检测限为17.414 pg/μl,PCR方法低检出限为174.414 pg/μl,LAMP方法检测灵敏度是PCR方法检测灵敏度的10倍,灵敏度高.LAMP法对临床阳性标本检出率与PCR法相当(27/27).结论 LAMP方法用于快速检测铜绿假单胞菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨别、灵敏度高和特异性强的特点,适合用于现场和基层检疫及医疗单位的快速诊断.
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野战快速检验的课堂教学设计改进
临床检验基础是医学检验本科学生的专业课,但作为我军唯一的<临检>学科,本教研室积极贯彻新军事战略方针,突出针对性教学.按照未来军事斗争卫勤保障要求,调整改革教学内容.将本专业课的重心向野战快速检验方向移动.以<现场快速检验>、<军事检验医学>(部分内容)为教材,逐步溶入本科生的教学,并不断的将其教学内容充实到网络课程中,其涉及的主要内容是部队基层、野战条件所需的检测项目.这就需要我们不断的改进现有的课堂教学设计.
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结核分支杆菌扩增体系的建立、优化及评价
目的 建立并优化结核分支杆茵PER反应扩增体系,并对所建立的体系进行评价.方法 根据GenBank找到结核分支杆茵基因序列,在Primer Premier V5.0软件上设计结核分支杆菌特异性引物.并对反应体系中MgCl2、引物、dNVTP浓度以及引物退火温度优化后建立结核分支杆茵PCR反应扩增体系.通过对TB标准株、TB临床分离株和临床阳性标本扩增产物的直接测序、灵敏性试验以及特异性试验对PCR反应体系进行综合评估.结果 TB PCR反应体系阳性扩增结果 为在琼脂糖凝胶电泳上出现245bp的条带.MgClM2、引物以及dNTP在TB PCR体系中优化后佳终浓度分别为:4rmnol/L、0.04μmol/L以及0.3mmol/L.TB PCR体系的退火温度优化后为55℃.TB标准株及TB临床分离株和临床阳性标本扩增产物的直接测序结果 与GenBank中公布的序列完全一致.TB PCR反应体系对其它细茵无交叉反应.检测限度为10拷贝/μl的DNA.结论 TB PCR反应体系能够快速对,IB标准株、TB临床分离株及临床标本进行结核分支杆菌的鉴别.
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野战条件下医学检验的开展现状与对策
随着新军事变革的日益深入和军事医学的快速发展,现代战争对卫勤保障提出了更多新的要求.笔者多次参加濒海与山地野战医疗演练,并负责医学检验的相关工作,现对目前野战条件下的医学检验开展现状与对策进行探讨.
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建立快速检验结核分枝杆菌复合群的方法
近年来，非典型结核分枝杆菌病的发病率呈上升的趋势。这种病的临床表现、X线特征和痰液涂片抗酸染色与结核病极其相似，很难鉴别。原用的非典型分枝杆菌生化反应方法繁琐，历时2个月，影响诊断与治疗。故建立快速检验结核分枝杆菌复合群的方法有极其重要的意义。现将该方法介绍如下：1 材料与方法1.1 标本为本院住院已确诊为肺结核病人痰标本80例。经过L-J氏培养基或米氏7H-10培养基或BACTEC-960培养的分离株，提取分离株DNA，(同一般DNA提取法，略)，置零下20 ℃保存备用。结核标准株(H37RV)与各种非结核标准株由北京结核防治研究所提供。
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基于近红外光谱技术不同产地肉桂子模型的建立
目的：采用近红外光谱技术结合化学计量学方法建立肉桂子药材的定性模型，达到快速鉴别不同产地肉桂子的目的。方法采用近红外漫反射光纤光谱结合SIMCA、主成分分析法、聚类分析等方法识别不同产地的肉桂子。结果对肉桂子药材原始光谱全波长进行主成分分析，前2个主成分累积方差贡献率为99％，很好地解释了原始光谱99％的信息，和田、喀什、伊宁和乌鲁木齐4个产地聚类效果较好，广西与越南2个产地部分样本出现混淆现象，基本可以区分6个产地样品；采用聚类分析法建立的肉桂子模型对样品进行预测时，正确率为100％；SIMCA法建立的模型对样品进行预测时，只有越南1个产地的样品没有被识别，总识别率为97．22％。结论近红外漫反射光谱技术结合化学计量学方法可以初步实现肉桂子药材的产地鉴别。
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胸腔积液腺苷脱氨与癌胚抗原联合检测在鉴别良恶性积液中临床应用价值的初步探讨
目的 探索一种快速,便宜又有一定敏感性和特异性的用于鉴别胸腔积液良恶性的检验方法,并评估其临床应用价值.方法 结合本院2009年1月～2011年10月期间在本科进行胸腔积液检验的167例疑似肺结核或肺癌患者的检验结果以及临床信息,进行回顾性分析.结果 分析表明,确诊结核病患者ADA浓度大多明显增高,CEA多数正常,而肺癌患者ADA多数不高,CEA明显增高.结论 利用ADA+CEA联合检测可以在癌性还是结核性胸水的鉴别诊断中,特别是在排除肺癌的鉴别诊断中起到非常大的作用,特别适合在基层结核病门诊使用.
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异硫氢酸铵荧光素标记鼠疫F1McAb染色法快速检验鼠疫菌
免疫荧光染色法广泛用于临床疾病的诊断和病毒、细菌的鉴定,我们用异硫氢酸铵荧光素标记鼠疫F1McAb,建立了免疫荧光染色快速检验鼠疫菌的方法,现简报如下.
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化学性食物中毒事件的现场调查、采样和中毒样品快速检验
食品安全是重要性不断增加的公共卫生问题.由食品安全引起的公共卫生事件给社会造成很大的影响,给国家造成重大损失.重大食物中毒属于公共卫生突发事件,由化学性物质引起的食物中毒在各类食物中毒事件中占有相当的比重[1].准确、快速处理食物中毒事件已成为卫生部门应急反应能力建设的关键.本文就化学性食物中毒事件的现场调查、采样、快速检验做简要论述.
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沙门氏菌的快速检验
沙门氏菌是兽医临床和食品工业中的重要检测对象之一,因此其快速检测有重要意义,本文综述了关于沙门氏菌快速检测方面的一些研究情况.
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C18短柱在中药快速检验中的应用
目的:通过一系列比较试验,确定C18色谱短柱在中药快速检验中应用的可行性.方法:以长度分别为75mm和150 mm的2支ZORBAX SB-C18(柱径均为4.6mm,粒径均为3.5μm)高效液相色谱柱为载体,参照相关标准收载或自拟的制样方法和色谱条件,对7种中药材和7种中成药与中药保健品进行色谱分离比较.结果:在相等进样量和相同色谱条件下,柱长为75 mm的色谱柱对所有中药材和中成药与中药保健品中指标成分能得到满意的分离效果,且分析时间比柱长为150 mm的色谱柱的减少一半.结论:柱长为75mm的色谱柱可以用于多数中药材和中成药与中药保健品的快速检验.
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中药制剂和保健品中11种化学降糖药的快速检验
目的:建立检测中药制剂和保健品中非法掺入化学降糖药的专属性方法.方法:采用液相色谱-离子肼质谱联用法.色谱条件:Agilent TC C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.01%三氟乙酸-乙腈为流动相,柱温30℃,流速0.6 mL·min-1,检测波长230 nm;质谱条件:电喷雾离子源(ESI)正离子检测,扫描方式采用全扫描一级质谱、选择离子二级质谱(MS/MS),质荷比范围50～800m/z,干燥气温度350 ℃,干燥气流速8 L·min-1,雾化气压力206.7 kPa,分流比1:1.结果:11种化学降糖药实现了时分离与专属鉴定;利用本法,从42个样品中检测出6种非法添加化合物.结论:本法可以有效地用于快速检测中药制剂和保健品中非法添加的化学降糖药.
关键词： 中药制剂 保健品 高效液相色谱-离子肼质谱 降糖药 快速检验 -
超高效液相色谱法同时测定丹参酮提取物中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA
目的:建立超高效液相色谱法同时测定丹参酮提取物中特征性的3个脂溶性成分(隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA)含量.方法:采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱(1.7 μm,2.1 mm×100 mm),预柱为Phenomenex SecurityGuard C18Cartridges Polar-RP(4 mm×3.0 mm),以乙腈(A)-5％乙腈水溶液(含0.1％甲酸,pH2.5)(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min,52％A→70％A;5 ～7 min,70％A→80％A;7～ 10 min,80％ A→52％ A; 10 ～ 12 min,52％A),流速0.25 mL· min-,柱温35 q℃,进样量5μL,检测波长269 nm.结果:隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA3个被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r＞0.999);平均回收率(n=6)分别为96.7％(RSD=1.3％),96.4％(RSD=0.94％),98.5％(RSD=1.2％);丹参酮提取物中主峰与其他共存组分达到基线分离.结论:与常规液相色谱法比较,本方法分离效率高,重复性好,可作为实验室方法改进的参考依据,为丹参酮提取物的质量标准的提升做准备.
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X-射线荧光元素分析技术快速筛查化妆品中铅、汞、砷、锑
目的:用X-射线荧光元素分析技术建立快速筛查化妆品中铅、汞、锑、砷的方法.方法:本方法采用便携式X射线荧光元素分析仪,研究了乳液、霜及粉底对待测元素的基体影响,研究了元素间的干扰,考察了测量模式、测试时间和样品厚度对测量结果的影响.结果:样品不需预处理,采用校正工作曲线法,均获得了非常好的线性,铅、汞、锑、砷回收率分别为98.3％、94.0％、89.1％、102.6％,检出限为铅2 mg·kg-1、砷2 mg·kg-、汞3 mg·kg-、锑4 mg·kg-1.对12种市售样品进行检测,并与ICP-AES数据比较,数据结果t检验分别为0.107、0.134,大于0.05,2种方法无显著性差异.结论:该方法适用于快速筛查化妆品中的铅、汞、砷、锑.
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快速筛查检验保健食品及中成药中的12种化学降糖药
目的:建立HPLC-DAD法快速筛查检验降糖类保健食品及中成药中添加的12种化学药品,为保健食品和中成药中添加的化学降糖药提供检测方法.方法:Agilent Extend-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以0.014％三氟乙酸、乙腈、0.21％庚烷磺酸钠为三元梯度洗脱流动相,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长为220 nm.结果:12种化学降糖药实现了同时分离与专属性鉴别；利用本法,从18种28批样品中检出7种11批非法添加化学药品.结论:本法可以有效地用于快速筛查和定量检验降糖类保健食品及中成药中添加的12种化学降糖药.
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冰点下降法快速测定门冬氨酸钾注射液的含量
目的:采用冰点下降法快速测定门冬氨酸钾注射液的含量.方法:将本品用水稀释6倍后,依法测定.结果:门冬氨酸钾的线性范围为0.01668～0.1668 g·mL-1(r =0.9996),平均回收率(n=9)为100.0％,用15个样品进行外部验证,外部验证平均绝对偏差为0.1％,平均相对偏差为0.1％.结论:该法具有快速、简便、结果准确的特点,可用于门冬氨酸钾注射液的快速检验.
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首届国际药品快速检验技术论坛随笔
中国药品生物制品检定所于2009年11月4日至5日在广州主办首届国际药品快速检测技术论坛.本文概述了论坛有关专家、作者对药品快检技术的研究、应用和发展演讲及讨论的内容.
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抗结核药物含量测定方法研究进展
结核病是全世界由单一致病菌导致死亡高的疾病,严重危害人类健康,因此保证抗结核类药物的质量具有重要意义.本文以常用抗结核药物为例,从国内外药典及文献报道两方面介绍了其含量测定方法,重点介绍高效液相色谱法,为建立快速、准确的高效液相色谱快速检验方法奠定基础.
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荧光分析法快速检测水产品中副溶血性弧菌
[目的] 提出一种新颖、简便、快速检测水产品中副溶血性弧菌的方法.[方法] 本方法用阿拉伯糖-葡萄糖醛酸盐培养基(AG)在37℃下对副溶血性弧菌进行增菌,以苯甲基-L-精氨酸-7-氨甲基-香豆素(Bz-Arg-7AMC)作荧光底物,用荧光分析法检测该菌的胰蛋白酶样活性,通过判读胰蛋白酶样活性,确定水产品中是否污染有副溶血性弧菌.[结果] 该方法的灵敏度为20个/g,相关分析表明:荧光分析法与5管MPN计数法呈正相关,相关系数为0.86.[结论] 用本方法只需8个小时就可完成水产品中的副溶血性弧菌的检验,操作简便,灵敏度较高,适于快速检测需要.
