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  • 小鼠卵巢蛋白质双向凝胶电泳蛋白谱系的初步建立及其功能分析

    作者:马翔;钱云;谢满鑫;侯振;孟艳;刘金勇;翟永宁;朱叶飞;周作民;沙家豪;刘嘉茵

    目的:初步建立性成熟小鼠卵巢蛋白质图谱,并对其中的蛋白质功能进行研究.方法:通过双向电泳和质谱技术分析性成熟小鼠卵巢蛋白质组,并对其中的一种蛋白质进行免疫组化研究.结果:(1)获得高重复性和高分辨率小鼠卵巢蛋白图谱.软件分析显示,3个不同卵巢样品24 cm银染蛋白凝胶上的蛋白点均有±2 000点,胶重复性好,大部分蛋白点位于相对相同的位置.(2)质谱共鉴定出52种蛋白质,按功能对其进行分类:参与细胞代谢、细胞信号传导/交流、细胞结构/运动、细胞/器官防御与抗氧化作用、调节RNA合成、调节蛋白表达及未分类.(3)通过对其中的一种蛋白(GRP78)行免疫组化分析,发现随着卵巢由卵泡早期逐渐生长到排卵前卵泡期成熟并转向黄体期,其在颗粒细胞中的表达信号增强.结论:(1)3个不同卵巢样品蛋白质双向电泳图重复性好.我们通过质谱分析共鉴定出约52种蛋白质,初步构建了小鼠卵巢双向电泳蛋白图谱,对研究卵巢病理与生理、发育过程有着重要的参考价值.(2)行免疫组化分析结果显示,在卵巢周期变化过程中,GRP78蛋白对颗粒细胞的增生、分化、形成黄体颗粒细胞起着重要的调控作用.

  • SET在小鼠睾丸组织中的表达

    作者:代晓南;朱倩;刘珊;邵丽;高超;高莉;刘嘉茵;崔毓桂

    目的:检测不同年龄段小鼠睾丸组织中SET蛋白和mRNA的表达,讨论其在精子发生及睾酮生成方面的潜在功能.方法:实验中用1周龄的ICR雄性小鼠作为幼年期组(相当于人类幼年期,n=12),4周龄的ICR雄性小鼠作为性发育期组(相当于人类的青春期前,n=12),12周龄的ICR雄性小鼠作为成年期组(相当于人类成年期,n=12),12个月龄的ICR雄性小鼠作为中老年组(相当于人类的中老年,n=12).免疫组织化学法观察SET在各年龄段小鼠的定位表达;实时逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)和蛋白质印迹(Western Blot)分别检测睾丸中SET mRNA和蛋白水平表达.结果:SET蛋白表达定位于生精小管中的精原细胞、精母细胞,在性发育期组和成年期组的单倍体和四倍体生殖细胞中高表达;成年期组和中老年组的睾丸间质细胞中也有SET的表达;支持细胞中很少量表达.性发育期组SET mRNA与幼年期组相比表达量升高(P=0.020),而成年期组小鼠睾丸中SET蛋白的表达水平高.结论:SET主要表达于精原细胞和精母细胞,少量表达于支持细胞,表明SET可能与精子发生有关.SET还表达于睾丸间质细胞,与睾酮生成有关.

  • 荷肝癌小鼠血浆和肿瘤组织支链氨基酸代谢变化

    作者:陆伟;杨晶;金玉坤;张旭;刘颖;钱绍诚

    目的:探讨荷肝癌小鼠游离支链氨基酸(BCAA)代谢变化,为肝癌患者氨基酸失衡疗法提供理论依据.方法:采用HITACHI L-8800型氨基酸分析仪,检测10例荷肝癌H22的ICR小鼠血浆和肿瘤组织游离BCAA,以10例正常ICR小鼠作为对照组,比较2组血浆BCAA浓度,对肿瘤组织与对应血浆BCAA浓度及肿瘤体积进行相关分析.结果:荷瘤组血浆缬氨酸、亮氨酸、总BCAA低于对照组[(107.38±25.39)、(62.74±21.55)、(228.86±56.42)vs(150.64±26.18)、(90.84±25.96)、(300.89±58.44)μmol/L],差异有统计学意义(t分别为3.751、2.630及2.804,P<0.05或P<0.01),2组异亮氨酸比较差异无统计学意义.肿瘤组织缬氨酸(0.192±0.020)μmol/L、亮氨酸(O.105±4).019)μmol/L与血浆对应氨基酸呈负相关(r分别为-0.726和-0.671,P<0.05),异亮氨酸与血浆对应氨基酸无明显相关性;肿瘤组织异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸与肿瘤体积呈正相关(r分别为0.936、0.933、0.897,P<0.01).结论:肝癌对3种支链氨基酸的代谢有区别,其中缬氨酸可能是肝癌的必需氨基酸.

  • 不同品系小鼠急性胰腺炎并发肺损伤模型的比较

    作者:仇小涛;王西墨;江涛

    目的:比较小鼠的品系对诱导急性重症胰腺炎并发肺损伤模型的影响.方法:将昆明白、ICR及Balb/c 3种品系小鼠各24只于各品系内均分为12、20 h对照组及12、20 h实验组,每组6只.将3种不同品系小鼠各实验组腹腔内注射雨蛙素诱导并建立急性重症胰腺炎模型,雨蛙素(50 μg/kg)稀释于生理盐水中,每小时注射1次,连续腹腔注射12 h、20 h;各相应对照组腹腔注射等量生理盐水.各组末次注射后1 h下腔静脉取血测血淀粉酶,取胰腺、肺脏组织行病理学检查.观察不同品系小鼠注射雨蛙素12h、20h后胰腺、肺组织形态学及血淀粉酶水平差异.结果:昆明白12h实验组及ICR20h实验组仅出现胰腺轻微损伤.Balb/c 12h、20h实验组及昆明白20h实验组造模成功,胰腺腺泡广泛变性、坏死及空泡化,炎症细胞大量浸润;肺部间质及部分肺泡腔有炎细胞浸润、肺不张、肺泡间隔增宽.各品系内12 h、20 h实验组与相应对照组血淀粉酶比较差异有统计学意义(P<0.05).Balb/c 12 h、20 h实验组各测量值比较差异无统计学意义(P>0.05).Balb/c 12 h实验组与昆明白20 h实验组病理学检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:Balb/c小鼠对药物反应灵敏,用药量少,更适用于急性重症胰腺炎模型的研究.

  • 玉米须提取物的小鼠急性毒性实验及降血糖作用观察

    作者:贾淑杰;王蕾;李旭

    目的:研究玉米须乙醇及水提取物灌胃给药对小鼠的急性毒性作用,并观察其降血糖作用.方法:改良寇氏法计算玉米须提取物半数致死量(LD50)及其95%可信区间(CI).观察玉米须提取物对正常小鼠、葡萄糖致高血糖模型小鼠、肾上腺素致血糖升高小鼠的降血糖作用.结果:玉米须乙醇提取物LD50=203.106 g/kg(95% CI 188.665~218.652 g/kg);水提取物LD50=105.203 g/kg(95% CI 95.249~116.197 g/kg).玉米须水提取物和乙醇提取物对正常小鼠血糖无影响;乙醇提取物30 g/kg可明显降低葡萄糖导致的小鼠血糖升高(P<0.01);水提取物与乙醇提取物30 g/kg可明显降低肾上腺素致小鼠升高的血糖值(P<0.05或P<0.01),且乙醇提取物可明显升高高血糖小鼠的肝糖原含量(P<0.01).结论:玉米须水和乙醇提取物为无毒级中药提取物.两种提取物对正常小鼠无降低血糖作用,对高糖和肾上腺素所致的小鼠高血糖有降低作用,同时具有促进糖异生,调节糖代谢的作用.

  • VEGF和bFGF联用对小鼠卵巢组织移植后的影响

    作者:高江曼;严杰;于洋;闫丽盈;李蓉;乔杰

    目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对同种异体卵巢移植后卵泡的存活和血管再生的作用.方法 将18日龄ICR雌性小鼠卵巢移植到成年ICR雌鼠的颈后皮下,将小鼠分为4组,分别皮下注射10 μL生理盐水、bFGF、VEGF和bFGF+VEGF,每日1次,连续注射4 d,于7 d后处死取材,用HE染色观察卵泡的形态和数目,CD31抗体免疫组织化学染色观察血管密度.结果 移植前新鲜的小鼠卵巢组织内各级卵泡数目多,卵泡结构形态好.与移植前相比,各组移植后的卵巢组织内一些卵泡结构出现异常,各级卵泡数目及卵泡总数显著减少.VEGF+bFGF组始基卵泡数和移植物血管密度均优于bFGF和VEGF组,差异有统计学意义.结论 VEGF和(或)bFGF干预,能够促进卵巢组织移植后血管生成,减少卵泡丢失,从而改善卵巢组织移植后的质量.

  • 原花青素对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

    作者:孔妮;刘超;杨方浩;张腾元;王宝堃;高慧婕

    目的 探究原花青素(PC)对环磷酰胺(Cy)致免疫抑制小鼠的免疫调节作用及其对白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 选用40只ICR小鼠,随机均分为正常对照组、Cy模型组、PC高剂量组(100 mg/kg)和PC低剂量组(80 mg/kg).灌胃给药,7 d后测定各组小鼠胸腺(脾脏)指数、血清溶血素水平、迟发型超敏反应性;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血IL-10和TNF-α的表达;RT-qPCR测定小鼠脾脏TNF-α和IL-10 mRNA的表达.结果 PC能够提高小鼠胸腺、脾脏指数,一定程度恢复免疫抑制小鼠的迟发型超敏反应能力,提高血清溶血素含量;同时PC也可降低外周血IL-10的表达,升高TNF-α的表达;降低脾细胞IL-10 mRNA的水平,升高TNF-αmRNA的水平.结论 原花青素可以提升机体免疫功能,其调节机制可能是通过对细胞因子TNF-α和IL-10的调节来完成的.

  • 丹参软胶囊对提高机体耐缺氧作用的实验研究

    作者:魏巍;张宪党

    丹参软胶囊具有活血化瘀、理气止痛之功效,临床用于气滞血瘀所致的胸痹,胸中憋闷,冠心病和心绞痛.本实验通过丹参软胶囊对小鼠耐缺氧能力的影响,验证丹参软胶囊对提高机体缺氧耐受力的作用.

  • 山柰酚对苯并芘致不育模型小鼠精液质量的影响及其作用机制

    作者:孙小伟;邰贺;宁实;刘涛

    目的:探讨山柰酚对苯并芘致不育模型小鼠精液质量的影响及其作用机制。方法选取性成熟雄性ICR小鼠60只,随机分为3组,每组20只,B组予苯并芘2 mg/( kg·d)灌胃,C组予山柰酚200 mg/( kg·d)+苯并芘2 mg/(kg·d)灌胃,A组予相同体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。30 d后处死小鼠取出睾丸组织,观察3组精子密度、活率、活力、各项动态参数及睾丸组织细胞色素P450( CYP450)酶、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-PX)、超氧化物歧化酶( superi oxide dismutase, SOD)活性。结果 C组精子密度、活率、活力及各项动态参数均优于B组(P<0.05),部分指标低于A组(P<0.05);C组睾丸组织中CYP450酶活性明显低于B组(P<0.05)、高于A组(P<0.05),GSH-PX、SOD活性明显高于B组(P<0.05)、低于A组(P<0.05)。结论山柰酚能通过提高抗氧化酶活力改善苯并芘致不育小鼠的精液质量,提高生育能力。

  • 成纤维细胞生长因子21对小鼠肝纤维化的作用及其机制

    作者:王大秀;韩继武

    目的 探索成纤维细胞生长因子(FGF)21对小鼠肝纤维化的作用及机制.方法 将40只雄性ICR小鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(CCl4处理)(n=15)、治疗组(CCl4+1.0 mg/kg FGF21处理)(n=15).连续处理36 d后取血清及肝组织.检测ALT、AST、ALP、TBil、IL-6、IL-1β、TNFα水平;Masson染色观察病理改变;4-羟脯氨酸(4-Hyp)试剂盒检测肝内4-Hyp水平;real-time PCR检测肝胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGFβ、IL-6、IL-1β、TNFαmRNA水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 Masson染色结果显示,模型组肝纤维化程度较对照组明显加重,治疗组肝纤维化程度较模型组明显减轻;生化检测结果显示,模型组小鼠血清ALT、AST、ALP、TBil水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);治疗组小鼠血清ALT、AST、ALP、TBil水平较模型组明显下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05).血清ELISA检测结果显示,模型组小鼠血清IL-6、IL-1β、TNFα水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);治疗组小鼠血清IL-6、IL-1β、TNFα水平较模型组明显下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05).4-Hyp及real-time PCR检测结果显示,模型组4-Hyp以及CollagenⅠ、α-SMA mRNA水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P值分别为0.004、<0.001、<0.001);治疗组4-Hyp以及CollagenⅠ、α-SMA mRNA水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P值分别为0.005、<0.001、<0.001);模型组小鼠肝内TGFβ、IL-6、IL-1β、TNFαmRNA水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P值均<0.001);治疗组小鼠肝内TGFβ、IL-6、IL-1β、TNFαmRNA水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P值均<0.001).结论 FGF21改善小鼠肝纤维化的作用机制与抑制肝内TGFβ和IL-6、IL-1β、TNFα等炎症因子表达有关.

  • 小鼠LIF编码基因的克隆与真核表达载体pcDNA3.1-LIF的构建

    作者:姜秋;艾永华;聂代邦;孙宏晨;欧阳红生

    目的:通过克隆小鼠LIF编码基因,构建pcDNA3.1-LIF真核表达载体,为下一步建立转基因动物模型奠定基础.方法:采用ICR雌性小鼠子宫组织,提取总RNA,运用RT-PCR技术,扩增出小鼠LIF基因全长编码序列,采用同源重组方法构建具有新霉素抗性的小鼠LIF真核表达载体peDNA3.1-LIF.结果:通过PCR获得了约612 bp大小的特异性cDNA片段.经核苷酸序列分析,扩增得到的片段与小鼠LIF cDNA序列同源性为100%.经PCR及酶切鉴定筛选阳性克隆菌,表明LIF编码序列正确连入pcDNA3.1载体中.结论:成功克隆了小鼠LIF编码基因,并构建了真核表达载体pcDNA3.1-LIF.

  • 脊髓背角细胞外信号调节激酶磷酸化参与调控2,4-二硝基氟苯诱导的小鼠慢性痒

    作者:吴品雯;张浩;方浩

    目的:探讨脊髓背角细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)磷酸化对2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的小鼠慢性痒的调控作用.方法:8~12周ICR雄性小鼠随机分为DNFB诱导组和丙酮对照组.DNFB组小鼠分别于面颊部和背部反复涂抹1.5% DNFB溶液,建立类似特异性皮炎的慢性痒模型.分别观察慢性痒模型建立后小鼠的自发性行为,以及鞘内注射M EK抑制剂U0126后小鼠自发性慢性痒行为的变化.免疫组织化学染色法分析小鼠脊髓组织磷酸化 ERK(phosphrylated ERK,pERK)的表达情况.结果:面颊部诱导模型中,DNFB组小鼠的搔抓次数明显高于丙酮对照组(P<0.05),而擦涂行为无差异,证实DNFB诱发的是痒觉;颈背部诱导模型中,DNFB组小鼠表现出剧烈的搔抓行为,而丙酮对照组的搔抓行为不明显.背部慢性痒模型建立后,分别在第1、3、7和14天鞘内注射 M EK 抑制剂U0126,小鼠的搔抓行为受到明显抑制(P<0.05),且脊髓背角pERK的表达水平也明显降低(P<0.05).pERK活化主要表达于小鼠脊髓背角Ⅰ ~ Ⅱ层,且与神经元标志物NeuN共标,与星形胶质细胞标志物GFAP和小胶质细胞标志物Iba1不共标.结论:脊髓背角浅层神经元 ERK磷酸化可能参与调控DNFB诱导的慢性痒.

  • 葡聚糖硫酸钠自由饮用与定量灌胃诱导小鼠急性结肠炎模型的比较研究

    作者:黄循铷;王承党;王瑞幸

    背景:自由饮用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的鼠类急性结肠炎模型均一性欠佳,动物死亡率较高.目的:评估2% DSS 自由饮用或定量灌胃诱导的小鼠急性结肠炎模型模拟人类溃疡性结肠炎(UC)的效果和均一性.方法:予ICR小鼠2% DSS自由饮用或定量灌胃建立急性结肠炎模型,检测并比较正常对照组和两组模型小鼠的症状出现时间和频率、疾病活动指数(DAI)、DSS消耗量、死亡率、结肠长度、结肠损伤大体评分(MACD)、结肠组织病理学表现以及外周血白细胞计数和分类.结果:两组模型小鼠均出现类似人类UC的症状和组织病理学改变,结肠显著短缩,DAI、MACD以及外周血白细胞计数和中性粒细胞百分比显著高于正常对照组.与DSS自由饮用组相比,DSS定量灌胃组小鼠症状出现时间更为一致,症状出现率显著增高,动物死亡率和DSS消耗量显著减低.结论:2% DSS定量灌胃诱导的小鼠急性结肠炎模型能较稳定地模拟人类UC,均一性高,动物死亡率低.

  • 含CpG基序的单链寡核苷酸增强感染人轮状病毒乳鼠的细胞免疫应答

    作者:徐志伟;陈益平;石海矾;狄军波

    目的 探讨含CpG基序的单链寡核苷酸(CpG ODN)干预对感染人轮状病毒(HRV)乳鼠细胞免疫应答的影响.方法 将40只ICR乳鼠随母鼠按窝随机均分为对照组、HRV感染组、CpG ODN预处理组和CpG ODN治疗组,每组10只.病毒攻击后第4天处死乳鼠,无菌取小肠、脾,对小肠组织按统一损伤标准评分,测定乳鼠脾脏指数,噻唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞刺激指数,ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4的含量,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群.采用单因素方差分析比较各组数据.结果 HRV感染组、CpG ODN预处理组和CpG ODN治疗组肠黏膜损伤评分分别为4.00±1.31、2.75±1.28和2.87±0.99,各组间比较,差异有统计学意义(F=11.32,P<0.01),与HRV感染组比较,CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组的小肠组织黏膜损伤评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,HRV感染组脾淋巴细胞刺激指数、CD8+T淋巴细胞所占百分比升高,CD4+T淋巴细胞所占百分比、CD4+/CD8+降低,Th1细胞因子IFN-γ表达增强,CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组的脾脏指数、脾脏淋巴细胞刺激指数、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞所占百分比、IFN-γ均升高(P<0.05);与HRV感染组比较.CpG ODN预处理组、CpG ODN治疗组的脾脏指数、脾脏淋巴细胞刺激指数、CD4+T淋巴细胞所占百分比、CD4+/CD8+和IFN-γ均升高(P<0.05).结论 CpG ODN增强感染HRV乳鼠的细胞免疫应答,以Th1型细胞免疫应答为主.

  • 裸质粒介导人胰岛素原突变基因在糖尿病小鼠中的表达和治疗效果

    作者:吴文君;邹大进;贺晨霞;丁友法;曲伸;卢大儒

    目的研究含有人胰岛素原突变基因(mhINS)的裸质粒在链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠中的表达及其治疗效果.方法应用放射免疫法检测含有人胰岛素原突变基因的表达质粒pcDNA3-mhINS的L02细胞株表达胰岛素情况;通过尾静脉大容量快速注射法将其转染到糖尿病小鼠体内,利用PCR,RT-PCR检测pcDNA3-mhINS的组织分布及表达情况,同时监测糖尿病小鼠血糖、体重等指标的变化.结果糖尿病小鼠的血糖在注射pcDNA3-mhINS一天内迅速下降至正常,并在此后的三天内逐渐上升到原来的高血糖水平,第二次注射后出现相同的情况.注射林格液的糖尿病对照组则始终处于高血糖水平.结论含有人胰岛素原突变基因的裸质粒成功转染糖尿病小鼠,并有显著的短期降血糖效应.

  • 物体材质与检测间隔时间对小鼠新物体识别实验结果的影响

    作者:李盛建;黄竹燕;叶夷露;俞月萍;张纬萍;魏尔清;张琦

    目的:研究不同实验条件下,新物体识别实验(NOR实验)在ICR小鼠学习记忆能力评价中的应用效果.方法:将130只ICR雄性小鼠随机分为10组:4组用于不同间隔时间(10 min、90 min、4h、24 h)的测试,4组用于不同物体材质(木质-木质、塑胶-塑胶、塑胶-木质、木质-塑胶)的测试,2组用于重复测试(隔1d或3d测1次,共测3次).视频跟踪记录小鼠在开场内的活动轨迹,分析其探索新旧物体的时间,计算小鼠对新物体的分辨比(DR)和分辨指数(DI),评价各组小鼠的学习记忆情况.结果:检测间隔时间为10 min和90 min组的小鼠对新物体的DR和DI较旧物体显著加大(均P<0.01);新旧物体不同材质对小鼠探究物体的时间、DR和DI影响较大,选择同一材质物体可使小鼠对新物体保持较为稳定的DR和DI;NOR实验可在同一批小鼠中重复测试,小鼠可持续保持对新物体的探究兴趣.结论:进行NOR实验时,选择较短的检测间隔时间和选用相同材质的物体可较好地评价小鼠学习记忆能力.NOR实验可重复测试.

  • 和厚朴酚对癫痫小鼠学习记忆能力的改善作用

    作者:王青梅;舒敏;徐千姿;谢一乙;阮盛哲;王健达;曾玲晖

    目的:探索和厚朴酚对癫痫小鼠学习记忆能力的改善作用并探讨其机制.方法:5周龄雄性ICR小鼠采用腹腔注射红藻氨酸(38 mg/kg)的方式建立癫痫模型.治疗组小鼠腹腔注射和厚朴酚(3、10、30 mg/kg)10 d.Fluoro-Jade B染色法检测神经元活性;Morris水迷宫和Y迷宫实验观察小鼠学习记忆能力;蛋白质印迹法检测乙酰化超氧化物歧化酶(SOD)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62蛋白表达水平;硫代巴比妥酸法和WST-1法分别测定丙二醛和SOD等氧化应激产物的含量.结果:与对照组比较,模型组神经元凋亡数量增加,学习记忆能力下降,乙酰化SOD和丙二醛表达量增加,SOD活性下降,LC3-Ⅱ和P62蛋白表达量增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,和厚朴酚10 mg/kg和30 mg/kg均可减少神经元凋亡数量,改善学习记忆能力,并可逆转癫痫发作所致的丙二醛和SOD乙酰化水平,降低LC3-Ⅱ和P62的表达量(P<0.05或P<0.01),且药物剂量为30 mg/kg时效果更加显著.结论:和厚朴酚可缓解癫痫发作导致的氧化应激和自噬降解障碍,减少神经元凋亡,从而改善癫痫小鼠的学习记忆能力.

  • 巨细胞病毒先天性感染对ICR鼠胚胎生长及脑组织发育的影响

    作者:柳燕;王明丽;周勇

    目的探索人巨细胞病毒(HCMV )先天性感染对胎鼠胚胎生长及脑组织发育的影响。方法 10周龄的ICR ♀♂鼠按1∶1配对,实验组于交配前及妊娠3天(E3)、7天(E7)、15天(E15)腹腔内接种HCMV悬液,对照组接种HF细胞上清液。于E0、E3、E6、E9、E12、E15、E19称取孕鼠体重。临产时剖腹取胚胎的大脑皮质,用常规组织切片及HE染色,检测组织的病理变化,同时取部分组织进行病毒分离。结果各实验组(除E15组)孕鼠自E15后体重较对照组明显降低。组织病理学检查发现,各实验组ICR胎鼠大脑皮质血管扩张、充血、出血,脑实质有单核细胞浸润,部分神经细胞变性坏死或凋亡及噬神经细胞现象,软化灶形成;受染的神经细胞核内出现HCMV特征性包涵体。E0、E3、E7、E15实验组大脑皮质病毒分离阳性率分别为60%、62%、67%、25%,组间差异显著(χ2=13.475,P<0.05),E15组低于其他3组。结论不同孕期ICR胎鼠大脑皮质均可先天性实验感染HCMV且大脑皮质损伤明显,胚胎发育迟缓。

  • 芪麦汤对糖尿病模型小鼠降血糖作用的实验研究

    作者:李唯佳;童晔玲;杨锋;戴关海

    目的 观察芪麦汤对糖尿病模型小鼠的降糖及降糖增效作用,初步探索该方在糖代谢调节方面的药效.方法 四氧嘧啶高血糖模型小鼠随机分为芪麦汤低、中、高剂量组,芪麦汤低、中、高剂量+二甲双胍组,二甲双胍对照组,模型对照组及正常对照组.给药30 d,结束后测空腹血糖及糖负荷后2h血糖.结果 中、高剂量芪麦汤组对糖尿病模型小鼠空腹血糖[( 15.56±9.32) mmol/L,t =2.43;(17.16±8.03) mmol/L,t=2.19]、糖负荷后2h血糖[(15.57±8.13) mmol/L,t =3.83;( 16.41±8.15) mmol/L,t =3.63]均有明显的降低作用(P<0.05 ~0.01);中、高剂量芪麦汤+二甲双胍组明显降低模型小鼠空腹血糖[(12.18±7.32) mmol/L,t =2.68;( 12.97±6.95) mmol/L,t =2.54]、糖负荷后2h血糖(15.19±7.52) mmol/L,t=2.68;( 12.96 ±5.93) mmol/L.t=3.25]与单用二甲双胍差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).芪麦汤单用或与二甲双胍合用均可减少模型小鼠饮水量与进食量(P<0.05或P<0.01),对模型小鼠体质量均无明显影响.结论 芪麦汤具有明显降低糖尿病模型小鼠空腹血糖及糖负荷后2h血糖的作用,具有增强二甲双胍降糖的作用.能减轻模型小鼠多饮多食状况.

  • 小鼠窦前卵泡的玻璃化冷冻方法研究

    作者:常娟娟;江一平;王明权

    目的 对性成熟前小鼠的窦前卵泡采用不同的方法 进行玻璃化冷冻,探讨不同冷冻方法 对卵泡复苏率的影响. 方法 用Ⅰ型胶原酶和脱氧核糖核酸酶Ⅰ分离10~14 d ICR雌鼠的卵巢,共进行A、B两个实验,每次实验对获得的卵泡分为4组,1组作为新鲜对照组,其余3组采用不同的冷冻方法 处理,试验A采用常规玻璃化法、-205 ℃玻璃化法和液氮网篮法;试验B采用-205 ℃玻璃化法、液氮网篮法和-205 ℃表面玻璃化法,卵泡复苏后进行台盼蓝染色,计算各组卵泡复苏率. 结果 液氮网篮和-205 ℃玻璃化冷冻的冷冻效果一致,两种方法 的卵泡复苏率差别无统计学意义;常规玻璃化的冷冻效果差,-205 ℃表面玻璃化冷冻的冷冻效果好,其冷冻小鼠窦前卵泡的复苏率达(83.02±4.10)%. 结论 -205 ℃表面玻璃化是一种较好的冷冻窦前卵泡的方法.

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