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子宫内膜癌微小RNA的表达特点及其临床意义
目的 探讨典型子宫内膜样癌组织微小RNA(miRNA)的表达特点及与子宫内膜癌相关分子改变的内在关联性及其临床意义.方法 以TaqMan低密度芯片分析2例子宫内膜样癌组织miRNA的表达特点.筛选表达显著差异的miRNA,采用即时荧光定量聚合酶链反应技术检测73例子宫内膜癌组织中这些miRNA的表达.免疫组织化学法检测miRNA的预测靶基因PTEN表达.结果 (1) miRNA表达谱分析显示相对于增殖期内膜,典型Ⅰ型癌组织共有47个miRNA存在差异表达,其中26个表达降低,21个表达升高.(2)进一步筛选8种miRNA验证其表达:8种miRNA在58例Ⅰ型癌中的表达与表达谱结果一致,其中表达升高的3种miRNA(miR-141、miR-200a、miR-205)及表达降低的两种miRNA(miR-143和miR-145),差异均有统计学意义(P＜0.05),但此5种miRNA在Ⅱ型内膜癌中变化不显著.(3)Ⅰ型内膜癌中miR-141、miR-200a高表达组的PTEN失表达率更高,且miR-200a与PTEN表达呈负相关(P＜0.05).结论 Ⅰ型子宫内膜癌有相对特异的miRNA表达谱；miR-200a、miR-205、miR-141、miR-143、miR-145在Ⅰ型癌中变化显著,但在Ⅱ型癌中变化不显著,提示Ⅰ/Ⅱ型癌发病中发挥作用的miRNA不尽相同.Ⅰ型癌中miR-141和miR-200a可能通过对抑癌基因PTEN的靶向调控,参与子宫内膜癌的形成及演进.
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非特指型外周T细胞淋巴瘤microRNA表达谱分析及其靶基因预测
目的 通过分析非特指型外周T细胞淋巴瘤(PTCL-NOS)肿瘤组织中microRNA(miRNA)的表达情况,探索其分子改变特征.方法 收集21例PTCL-NOS,发生于淋巴结内15例,淋巴结外6例；炎性反应增生性淋巴结组织13例；其中6例PTCL-NOS和3例炎性反应增生性淋巴结的石蜡包埋组织,应用TaqMan低密度芯片分析754种miRNA的表达差异；采用Targetscan与miRanda软件对显著差异的miRNA进行靶基因预测分析,应用生物信息学方法对靶基因进行显著的基因本体(GO)和信号通路分析.应用即时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进一步验证3种miRNA(miR-511、miR-1291、miR-572)在15例PTCL-NOS与10例炎性反应增生性淋巴结中的表达情况.结果 芯片检测发现7种miRNA(miR-886-3p、miR-511、miR-1291、miR-572、miR-27a-3p、miR-25-3p、miR-886-5p)在PTCL-NOS中表达上调,而miR-182-5p表达下调(P＜0.05).预测靶基因显著性GO有63个、信号通路61条.3种miRNA的qRT-PCR结果与芯片分析miRNA表达趋势相同,其中miR-572和miR-1291在PTCL-NOS中表达上调,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 这8种miRNA在PTCL-NOS中表达异常,可能参与该肿瘤发生发展的分子调控；其中涉及多种靶基因与复杂的信号通路.
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ALK 阴性间变性大细胞淋巴瘤与 CD30阳性非特殊型外周T细胞淋巴瘤的microRNA 表达
目的：探讨microRNA（miRNA）在间变性淋巴瘤激酶（ALK）阴性的间变性大细胞淋巴瘤和CD30阳性非特殊型外周T细胞淋巴瘤中表达的差异性及miRNA在ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤发病机制中的作用。方法应用高通量miRNA芯片技术对3例原发于淋巴结的ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤，3例原发于淋巴结的CD30阳性非特殊型外周T细胞淋巴瘤和3例反应性增生的淋巴结进行检测；筛选出7种重要miRNA，应用即时定量聚合酶链反应方法检测这7种miRNA在15例原发于淋巴结的ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤和15例原发于淋巴结的CD30阳性非特殊型外周T细胞淋巴瘤中的表达。结果 miRNA表达谱分析显示，ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤和CD30阳性非特殊型外周T细胞淋巴瘤两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）的miRNA有13种。其中5种 miRNA 验证结果与表达谱结果差异性表达趋势一致：miR-664b-5p、miR-1275、miR-4739、miR-4736和miR-504-5p，表达差异有统计学意义（P值分别为0.004、0.021、0.031、0.009和0.007）。与反应性增生的淋巴结相比在ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤中miR-664b-5p、miR-1275、miR-4739为下调表达，miR-4736和miR-504-5p为上调表达。结论检测miR-664b-5p、miR-1275、miR-4739、miR-4736和miR-504-5p有助于鉴别ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤和CD30阳性的非特殊型外周T细胞淋巴瘤。 miR-4739、miR-4736和miR-1275可能通过靶基因TNFRSF8和TMOD1在ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤的发病中起重要作用。
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miR-181c-3p和miR-5692b在食管癌患者中的表达水平及其临床意义
目的 探讨miR-181c-3p和miR6692b在食管癌患者中的表达水平及临床意义.方法 应用基因芯片技术对食管癌组织的特异性microRNA进行筛查,然后利用即时荧光定量PCR技术对55例食管癌及癌旁对照组织的miR-181c-3p和miR6692b表达情况进行检测.结果 (1)癌组织中miR-181c-3p与miR-5692b的表达水平均较正常组织升高.(2)miR181c-3p和miR-5692b表达水平均与肿瘤大小、浸润深度及临床分期相关(均P＜0.05).(3)miR-181 c-3p和miR-5692b高表达组总生存率明显低于低表达组(均P ＜0.05).(4)多元Cox回归分析结果表明高表达miR-181c-3p和miR-5692b均为食管癌的预后不良因素.结论 miR-181c-3p和miR-5692b的表达与食管癌的临床病理特征及预后存在显著相关性,可作为食管癌进展和预后的潜在预测指标.
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microRNA-221及白细胞介素-17在甲状腺乳头状癌中的表达及相关性
目的 检测microRNA-221(miR-221)及白细胞介素(IL)-17在甲状腺乳头状癌中的表达并分析其相关性,探讨其在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用及相关机制.方法 用real-time逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学EnVision法检测40例甲状腺乳头状癌、20例结节性甲状腺肿和20例癌旁正常甲状腺组织中miR-221及IL-17的表达并分析其相关性.结果 (1)miR-221在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织,并且与肿瘤TNM分期、包膜侵犯及淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤大小及个数、腺内播散和脉管侵犯无关,而结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);(2)real-time RT-PCR及Western blot结果显示甲状腺乳头状癌组织中IL-17 mRNA及IL-17蛋白的表达量也明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织(P<0.05),而结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学染色结果显示IL-17在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达,而在结节性甲状腺肿及癌旁正常甲状腺组织中为阴性,并且IL-17的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小及个数、腺内播散和脉管侵犯无关,而与肿瘤TNM分期、包膜侵犯及淋巴结转移相关;(3)在甲状腺乳头状癌中microRNA-221与IL-17的表达呈显著正相关(r=0.524,P=0.001).结论 miR-221可能通过影响多种细胞因子和炎性细胞调控IL-17的表达,参与甲状腺乳头状癌的发生、发展及侵袭等过程,不仅可以作为判断甲状腺乳头状癌预后的新指标,而且可作为一种潜在的分子靶点,为甲状腺乳头状癌的治疗提供一种新的思路,从而改善患者的预后.
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miR-449a:WNT亚型髓母细胞瘤潜在的表观遗传学标志物
目的 筛选可能受甲基化调控的,与髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)WNT分子亚型相关的微小RNA(miRNA)分子标志物.方法 采用NanoString技术对45例原发性MB石蜡样本进行了包含22个经典MB亚型特异性基因的mRNA表达水平的检测,从而对肿瘤进行分子亚型鉴定.同时通过miRNA表达芯片检测去甲基化药物处理前后MB细胞系(Daoy、D283、D341)的miRNA表达情况,筛选出可能受甲基化调控的miRNA分子标志物,并用甲基化特异性PCR(MSP)和即时荧光定量PCR方法对其甲基化状态和表达水平分别进行验证.后,对照分子亚型找到与MB亚型相关的受甲基化调控的miRNA.结果 45例MB除1例无法准确划分亚型外,其余44例中4例为WNT组,8例为SHH组,16例为Group3,16例为Group4.miR-449a在去甲基化药物处理前后的MB细胞系中表达水平具有明显差异,生物信息学分析确认了其启动子区CpG岛的存在,MSP方法进一步证明了部分肿瘤受启动子高甲基化的调控,且WNT亚型MB肿瘤样本中发现miR-449a存在相对高表达.结论 基于金标准(NanoString技术)对MB肿瘤进行分子亚型鉴定,并发现miR-449a在MB细胞系中受到甲基化调控,其可能为WNT亚型MB的分子标志物.
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microRNA383调节人髓母细胞瘤Daoy细胞系中PRDX3的表达
目的 探讨microRNA383( miR-383)对人髓母细胞瘤Daoy细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等的影响.方法 应用即时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测人髓母细胞瘤组织(15例)、Daoy细胞系、对照脑组织(5例)中miR-383及PRDX3mRNA表达水平；采用Western blot法检测人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系、对照脑组织中PRDX3基因蛋白表达水平；人工合成miR-383模拟体(mimics)转染人髓母细胞瘤Daoy细胞系,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、流式细胞术等实验方法检测转染后各组Daoy细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化.结果 15例人髓母细胞瘤组织中13例(13/15) miR-383表达水平较对照脑组织明显下调,14例( 14/15) PRDX3 mRNA表达水平较对照脑组织显著增高.miR-383、PRDX3mRNA在人髓母细胞瘤Daoy细胞系中表达水平分别为对照脑组织的0.353、1.315倍.PRDX3蛋白表达水平在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中较对照脑组织增高.miR-383mimics转染后24、48 h,实验组miR-383平均显著高于空白对照组,且48 h更加显著；而PRDX3mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组显著降低.CCK-8法检测提示实验组中细胞增殖率较对照组明显降低(P＜0.05).Annexin VFITC法检测转染后48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率(11.60±0.30)％明显高于空白对照组(2.30±0.20)％(P=0.000).细胞内活性氧水平检测结果显示转染后24、48 h实验组较空白对照组细胞内活性氧水平明显升高,且48 h更加显著.线粒体膜电位水平检测结果显示转染后24h实验组线粒体膜电位水平较空白对照组明显降低.结论 与对照脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤组织、Daoy细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高.上调miR-383可降低Daoy细胞系中PRDX3基因表达,并有效抑制Daoy细胞增殖活性,促进Daoy细胞凋亡,出现Daoy细胞内活性氧水平升高,线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化.
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lincRNA?ROR作为一个内源竞争RNA通过结合miR?145调节Oct4、Sox2和Nanog对结直肠癌干细胞生物学特性的影响及临床意义
目的 探讨长链非编码RNA(lincRNA)?ROR作为一个内源竞争RNA(ceRNA)结合miR?145对下游干性相关基因Oct4、Sox2和Nanog的表达,及对结直肠癌干细胞生物学特性的影响,并阐明这种分子调控网络的临床意义.方法 收集2014年至2016年间河南省南阳市中心医院及南阳市第二人民医院胃肠外科结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织共52例,采用即时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测52例临床患者结直肠癌组织标本及结直肠癌细胞系中lincRNA?ROR、miR?145的表达;分析lincRNA?ROR和miR?145的表达与结直肠癌临床病理特征的相关性;流式细胞术从SW1116中分离CD44-CD133-和CD44+CD133+细胞;qPCR检测细胞中CD44、CD133、Oct4、Sox2、Nanog表达及CD44+CD133+细胞贴壁黏附后CD44、CD133、lincRNA?ROR、miR?145表达;生物信息学分析miR?145与lincRNA?ROR及核心转录因子Oct4、Sox2、Nanog之间靶向调控关系,双荧光素酶报告基因实验、qPCR、Western blot进行验证;噻唑蓝法、克隆形成检测沉默lincRNA?ROR对结直肠癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响.结果 结直肠癌组织中lincRNA?ROR高表达,miR?145低表达,两者呈显著负相关(P<0.05);lincRNA?ROR表达与肿瘤大小、淋巴结转移、远端转移有关(P<0.05),miR?145表达与肿瘤大小、肿瘤位置有关(P<0.05);流式细胞术成功分选出 CD44+CD133+和 CD44-CD133-细胞, CD44+CD133+细胞中 CD44、CD133、Oct4、Sox2、Nanog、lincRNA?ROR 较 CD44-CD133-细胞高表达, miR?145低表达(P<0.05);贴壁黏附后CD44、CD133、lincRNA?ROR表达明显降低,miR?145表达增加(P<0.05);lincRNA?ROR能够结合miR?145调控Oct4、Sox2和Nanog表达;沉默lincRNA?ROR可显著抑制结直肠癌干细胞增殖克隆形成能力,增加其对顺铂、紫杉醇敏感性.结论 lincRNA?ROR结合miR?145调控核心转录因子Oct4、Sox2和Nanog表达来影响结直肠癌干细胞增殖及化疗敏感性,为后续研究结直肠癌发生发展中遗传网络组分之间相互作用的病理生理功能提供了新见解,为结直肠癌治疗提供新思路.
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应用基因芯片检测喉鳞状细胞癌甲醛固定石蜡包埋组织microRNA表达谱
目的 建立以甲醛固定石蜡包埋组织为材料、基于基因芯片技术的microRNA(miRNA)表达谱的分析方法 ;筛选与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)生物学特征密切相关的差异表达miRNA.方法 从喉癌甲醛固定石蜡包埋组织中制备总RNA,经质量鉴定后进行荧光标记.采用Agilent公司的容纳723条人类miRNA探针的基因芯片完成杂交实验,以获得喉癌的miRNA表达谱.以GeneSpring GX和R-Project软件处理分析基因芯片实验数据,筛选与喉癌转移相关的差异表达miRNA.结果 从24例甲醛固定石蜡包埋组织标本中获得了符合基因芯片实验质量标准的RNA样品,并完成了基因芯片杂交及数据分析.从中共鉴定到319个miRNA,有96个miRNA在24例喉癌中均有表达,其中与淋巴结转移密切相关的(检错率<0.05)差异表达miRNA有5个,分别为miR-23a* 、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425.结论 甲醛固定石蜡包埋组织可以提供符合基因芯片分析质量要求的miRNA,是研究miRNA的重要样品资源.从喉癌的miRNA表达谱中筛选出的转移相关差异表达miRNA(miR-23a*、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425)有可能成为评估喉癌转移风险的新型分子标志.
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miR-150-5p抑制胰腺癌细胞生长
目的 探讨miR-150-5p对胰腺癌细胞生长及凋亡的影响.方法 即时定量PCR(qRT-PCR)法检测11例胰腺癌及对应癌旁正常组织和4个胰腺癌细胞系中miR-150-5p的表达,脂质体介导的化学合成miR-150-5p类似物转染PANC-1、MIA PaCa-2、BxPC-3和AsPC-1细胞系,并采用qRT-PCR法在PANC-1、MIAPaCa-2细胞系中检测转染效率；采用CCK-8检测miR-150-5p对胰腺癌细胞生长的影响；在PANC-1和MIA PaCa-2中分别使用PI/FITC双染法和PI单染,流式细胞术检测miR-150-5p对细胞周期和凋亡的影响.结果 miR-150-5p在11例胰腺癌组织中的表达低于癌旁正常胰腺组织,在4种细胞系中的表达低于正常胰腺组织(均P ＜0.05).转染miR-150-5p mimics可有效提高4种胰腺癌细胞中miR-150-5p RNA量(P＜0.01).转染72 h后miR-150-5p可显著抑制AsPC-1、BxPC-3、MIA PaCa-2和PANC-1细胞生长,与正常对照组相比,抑制率分别为50.7％、48.6％、30.8％和42.3％(P＜0.01).与对照组比miR-150-5p能够促进胰腺癌细胞凋亡(P＜0.01).MIAPaCa-2中与对照组比miR-150-5p能够显著升高G1期细胞百分比(P＜0.01),MIA PaCa-2和PANC-1中与对照组比miR-150-5p能够显著降低S期细胞百分比(均P＜0.01).结论 miR-150-5p在胰腺癌中表达下调,过表达miR-150-5p可以抑制胰腺癌细胞生长,阻断细胞周期,促进细胞凋亡.
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胰腺癌中miR-27a靶基因PSMA1的预测及鉴定
目的 软件预测并筛选miR-27a可能的靶基因,结合胰腺癌比较蛋白质组学结果中表达下调的蛋白,进一步检测胰腺癌中miR-27a的靶基因并进行验证.方法 采用生物信息学预测软件TargetScan、PicTar以及miranda预测miR-27a的靶基因,结合前期比较蛋白质组学的结果,筛选出miR-27a的可能靶基因；构建靶基因3'非翻译区(UTR)的表达载体,双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-27a对靶基因的靶向作用；胰腺癌肿瘤细胞系PANC-1和BxPC-3中转染miR-27a mimics或微小RNA阴性对照序列,Western blot检测靶蛋白的表达情况.结果 软件预测与蛋白质组学分析结合筛选出miR-27a的靶基因为PSMAl.双荧光素酶报告基因检测系统显示,与对照组相比miR-27a对野生型PSMA1的3'UTR具有靶向作用,实验组较阴性对照组相对活性值下降19.14％,差异具有统计学意义(P=0.016)；而对突变型PSMA1 3'UTR的靶向作用消失,实验组与阴性对照组相比差异无统计学意义(P=0.249).Western blot分析显示转染miR-27a mimics组PSMA1蛋白的相对表达量明显低于阴性对照组,PANC-1细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.71±0.01;BxPC-3细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.58±.0.04,P值均＜0.01.结论 胰腺癌中PSMA1是miR-27a的直接靶基因.
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miR-23a-27a表达载体构建及功能初探
目的 构建miR-23a-27a簇真核表达载体并初步探讨该簇的靶基因及其功能.方法 应用分子克隆的方法构建联合表达pre-miR-23 a-27a簇及单独表达pre-miR-23a、pre-miR-27a的真核载体,应用双荧光素酶报告基因试验和real-time PCR验证该载体表达的有效性,应用microRNA靶基因预测软件和双荧光素酶报告基因试验寻找及鉴定pre-miR-23a-27a的靶基因,应用Western blot和real-time PCR的方法在乳腺癌细胞MCF-7中初步探讨miR-27a的功能.结果 (1)pre-miR-23a-27a-pcDNA3.1、pre-miR-23a-pcDNA3.1、pre-miR-27a-pcDNA3.1重组质粒能够在真核细胞HEK293T中有效转录加工出相应的miR-23a和miR-27a;(2)miR-23a和miR-27a能够同连有Sprouty2基因MRE序列的pRL-TK重组质粒作用,但是只有miR-27a能够同连有Sprouty2基因3'-非翻译区(UTR)全长序列的pRL-TK重组质粒作用,而将Sprouty2基因3'-UTR中同miR-27a结合位点定点突变后,miR-27a无法同其作用;(3)在人乳腺癌细胞MCF-7中转染pre-miR-27a-pcDNA3.1真核表达载体,能够在蛋白水平显著影响Sprouty2基因的表达,但是对其RNA水平没有显著影响.结论 Sprouty2可能是miR-27a的功能靶基因,pre-miR-23a-27a-pcDNA3.1、pre-miR-23a-pcDNA3.1、pre-miR-27a-pcDNA3.1载体的构建为下一步深入研究miR-23a和miR-27a的功能奠定了基础.
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微小RNA-21反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株细胞生物学特性影响的体内外实验研究
目的 探讨体内外微小RNA-21( miR-21)反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株绌胞生物学特性的影响.方法 miR-21反义寡核苷酸(miR-21-ASO)通过脂质体转染宫颈鳞癌SiHa细胞,即时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR -21表达情况,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、集落形成实验、流式细胞术等方法探讨抑制miR-21表达对SiHa细胞形态及生物学特性改变的影响.应用免疫组织化学MaxVision法、TUNEL( TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况.结果 miR-21在SiHa细胞株中呈显著高表达,miR-21-ASO可使SiHa细胞中miR-21表达量显著降低(P＜0.05).MTT法检测结果显示,转染miR-21 -ASO后SiHa细胞的生长受到明显抑制(P＜0.05).阴性对照组的细胞集落形成率为98.3％±2.0％,miR-21抑制组则为55.6％±1.4％,miR-21抑制组的细胞集落形成率受到明显抑制(P＜0 05).流式细胞术检测显示,阴性对照组和miR-21抑制组的SiHa细胞凋亡率分别为6.7％±1.3％和29.4％±1.7％,miR-21抑制组的细胞凋亡率明显增加(P＜0.05).裸鼠皮下移植瘤成瘤率,miR-21抑制组与阴性对照组的成瘤比例分别为3/8和6/8(P ＜0.05).裸鼠瘤体的Ki-67阳性指数,miR-21抑制组(42％)比阴性对照组(90％)显著下降.荧光TUNEL凋亡检测显示,miR-21抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多(P＜0.05).结论 miR-21-ASO可有效抑制宫颈鳞癌SiHa细胞中miR-21表达,影响癌细胞增殖活性,促进癌细胞凋亡,体内抑制SiHa细胞裸鼠移植瘤生长促进其凋亡.
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早期食管鳞状细胞癌转移相关微小 RNA 的表达
目的：研究两组同一分期预后显著不同的早期食管鳞状细胞癌（简称鳞癌）微小RNA （ miRNA）表达的差异，探索不同miRNA在早期食管鳞癌转移中的预后意义。方法采用TaqMan human microRNA 芯片技术分析预后显著不同的两组早期食管鳞癌381个miRNA表达情况。荧光定量PCR（ RT-PCR）方法验证差异miRNA表达结果。结果两组样本中共41个miRNA表达变化差异具有统计学意义（P＜0.05），数据经生物信息学分析、靶基因预测、筛选出靶基因显著性功能分析、信号通路分析，其中上调或下调7倍以上的miRNA为：miR-27a、miR-886-5p、miR-143。富集的靶基因为GRB2、SOS1、MAPK1、EGFR、CBL、SPRY2、RPS6KA5、IGF1R、NGFR、MAPK14、CREB1。这些基因与以下信号通路显著相关：Sprouty 调节的酪氨酸激酶信号通路、Erk1/Erk2丝裂原激活的蛋白激酶信号通路、转录因子CREB 和细胞外信号。结论 miR-27a、miR-886-5p、miR-143可能是早期食管鳞癌转移的潜在预后相关标志物，对早期食管鳞癌转移具有预测意义，这些标志物的检测对早期食管癌治疗方式选择具有指导意义。
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miR-23a与转移抑制因子1在结肠癌中的表达及其临床意义
目的 探讨miR-23a( Homo sapiens miR-23a)与转移抑制因子1(metastasis suppressor 1,MTSS1)在结肠癌中的表达情况及其临床意义.方法 运用荧光素报告载体系统检测miR-23a直接调控的靶基因并采用Transwell侵袭实验检测miR-23a对人结肠癌SW620细胞的侵袭能力.收集结肠癌患者手术标本92例,癌旁组织作为正常对照,分别运用原位杂交、免疫组织化学EliVision法检测结肠癌组织及癌旁组织中miR-23a、MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析.结果 MTSS1是miR-23a直接调控的靶基因,miR-23a下调MTSS1蛋白的表达,增强结肠癌细胞侵袭能力.在92例结肠癌组织中miR-23a阳性表达率为87.0％( 80/92),MTSS1蛋白阳性表达率为17.4％(16/92),分别与癌旁对照组比,差异有统计学意义(P ＜0.01)；miR-23a的表达随着结肠癌临床分期演进(P =0.029)和浸润深度增加而增加(P=0.000),且有淋巴结转移的miR-23a的表达显著高于无淋巴结转移组(P=0.041)；MTSS1的表达随着结肠癌临床分期演进(P=0.027)和浸润深度增加而下调(P=0.017),且有淋巴结转移的MTSS1的表达显著低于无淋巴结转移组(P=0.009)；相关性分析表明,miR-23a表达与MTSS1的表达呈显著负相关(r=-0.594,P=0.013).结论 miR-23a通过靶向抑制MTSS1促进结肠癌SW620细胞生长、侵袭转移；miR-23a的高表达和MTSS1蛋白低表达可能是肠黏膜恶性转变以及结肠癌发生浸润转移的重要生物学标志,检测二者对预测结肠癌浸润转移有重要意义.
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MiRNA-146a对血管平滑肌细胞凋亡的抑制作用
目的 观察miRNA-146a对血管平滑肌细胞凋亡的作用并研究其机制.方法 原代培养大鼠血管平滑肌细胞,分成inhibitor组、control组和normal组,采用脂质体2000分别转染miRNA-146a inhibitors(50 μM)、错义链(50 μM)、PBS,real time PCR测定转染后miRNA-146a水平,流式细胞仪检测转染后血管平滑肌细胞凋亡,western blot检测转染后Bax蛋白水平.结果 转染48 h后,inhibitor组血管平滑肌细胞的miRNA-146a水平明显低于normal和control组(P＜0.01),inhibitor组血管平滑肌细胞的凋亡显著高于normal、control组(P＜0.05),且Bax蛋白表达水平增加(P＜0.05).结论 miRNA-146a可以抑制血管平滑肌细胞的凋亡,其机制与抑制Bax表达相关.
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miRNA在肝细胞癌中的研究进展
1993年Lee等[1 ]首次在对秀丽新小杆线虫(C.elegans)进行突变体的遗传分析中,发现能时序调控其胚胎后期发育基因表达的RNA:Lin-4,引起了广泛关注和研究.近年来揭示,miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用,在各种肿瘤组织中若干miRNA的表达水平有不同程度上调或下调,这说明肿瘤发生、诊断、治疗和预后与miRNA表达之间存在相关性.本文就国内外miRNA与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)研究领域的进展作一综述.
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骨关节炎发病机制的研究进展
骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种以关节软骨变性和丢失及关节边缘和软骨下骨骨质再生为病理特征的慢性关节疾病。常见部位膝、髋、肘和收的小关节等。OA的病因尚不明确，但具有相似的生物学、形态学和临床特征。OA主要累及关节软骨、软骨下骨、关节囊及韧带、滑膜和周围肌肉。多见于中老年人，女性多于男性。随着老龄化社会的到来，OA患者数量将逐渐升高。到2020年老年人为发达国家人口总数的1/4，65岁以上的老年人所患慢性病一半为OA。我国大于60岁骨关节炎患者约1.3亿人，约占人口总数的30%。OA是影响人类健康常见的关节疾患之一。骨关节炎严重威胁人类的健康和生活，一直是骨科科学研究的重要课题。虽然在OA的早期治疗和抑制其发展方向的投入较大，但在过去20年里，药物治疗方面也未取得长足的进步。尽管对关节软骨的生理、生化以及软骨细胞的代谢有了一定的了解，但 OA 的病因、发病机制至今尚不十分明确。因此对其早期诊断与治疗缺乏明确的针对性。骨关节炎的发病机制是由多种因素所致，包括基因遗传性；生物力学因素；软骨营养、代谢异常；软骨细胞凋亡等。现从关节软骨的结构、细胞因子学说、自由基学说、miRNA、STAT3等方面对骨关节炎的发病机制进行综述。
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MicroRNA、Toll样受体与HIV发病机制慢性免疫激活的研究进展
获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所致的致命性疾病.该病毒侵犯并摧毁宿主的免疫系统,初始感染CD4+T细胞,逐渐呈现出慢性免疫激活的状态并终导致AIDS的发生.MicroRNAs(miRNA),小型非编码RNA,在控制HIV病毒的感染及复制过程中发挥着重要的作用.Toll样受体(TLRs)在病原体诱导的免疫激活现象中起决定性的作用.本综述阐述了miRNA与HIV病毒间的相关联系,并介绍miRNA在AIDS发病机制慢性免疫激活的作用及其与TLRs的关系.
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甲状腺肿瘤相关性非编码RNA研究进展
非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA）是指除mRNA、tRNA和rRNA以外，不编码蛋白质的RNA。近年研究显示，ncRNA在细菌、真菌和哺乳动物等多种生物体的活动中可作为癌基因或抑癌基因，对肿瘤的发生、发展发挥调控作用。此外，ncRNA有希望成为肿瘤诊断的新型标志物。本文介绍了一些与甲状腺肿瘤相关的ncRNA新研究进展，并着重讨论微RNA（miRNA）及长链非编码RNA（lncRNA）在甲状腺肿瘤发生、转移中的作用。
