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二氧化硫气体对小鼠雄性生殖细胞的毒性作用研究
目的研究二氧化硫对小鼠雄性生殖细胞的损伤效应.方法采用二氧化硫动式熏气装置对小鼠进行气体吸入染毒,测定二氧化硫对小鼠睾丸匀浆上清液谷胱甘肽氧化还原系统的影响;用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定二氧化硫对小鼠雄性生殖细胞DNA的损伤作用.结果二氧化硫熏气使小鼠睾丸匀浆上清液还原性谷胱甘肽含量显著减少,谷胱甘肽硫转移酶活性、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性显著降低,脂质过氧化产物丙二醛含量显著升高;睾丸细胞DNA受到损伤,且有剂量-效应关系.结论二氧化硫气体能够显著影响小鼠雄性生殖细胞谷胱甘肽氧化还原系统和造成雄性生殖细胞DNA的损伤.
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杭菊5个新栽培类型及传统型药用菊花花粉形态比较研究
花粉是植物携带遗传信息的雄性生殖细胞集合体,与其他组织器官相比性状更稳定,形态特征受环境因素影响较小.
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维甲酸定向诱导小鼠核移植胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化
目的 初步探讨体外条件下定向诱导小鼠核移植胚胎干细胞分化为雄性生殖细胞的条件,建立有效诱导分化技术平台.方法 分离BALB/c小鼠NT-ESCs样集落并鉴定.NT-ESCs消化后分4组:1)采用维甲酸诱导NT-EBs向雄性生殖细胞方向分化;2)未分化的NT-ESCs;3)分化培养前的NT-EBs;4)自主分化的NT-EBs;5)小鼠胚胎成纤维细胞.RT-PCR法检测各组Oct-4、VASA、Scp3、Sry、Tex14和β-actin的mRNA表达;免疫荧光染色法检测VASA、Scp3蛋白表达.结果 NT-ESCs集落性生长,符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性.NT-EBs维甲酸诱导组Oct-4、VASA、Scp3、Sry、Tex14和β-actin均有表达,对照组为阴性;NT-EBs细胞诱导分化后Scp3荧光强度为(+);实验组VASA荧光强度(+)也优于对照组的(±).结论 采用维甲酸诱导可促进核移植胚胎来源NT-ESCs分化为雄性生殖细胞.
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维甲酸诱导和生精小管重构促使小鼠诱导多能干细胞向雄性生殖细胞分化的实验研究
目的 探讨体外维甲酸联合异位重构生精小管诱导小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)向雄性生殖细胞分化的潜能. 方法 自2010年12月至2011年12月,采用悬浮法培养小鼠iPSCs形成类胚体.类胚体培养至第5天,添加维甲酸进行诱导,不添加维甲酸的类胚体自发分化组作为对照组.收集培养10d的类胚体,采用实时定量PCR和免疫细胞化学检测其生精细胞相关基因和蛋白的表达.同时将类胚体消化为单细胞,与新生小鼠睾丸细胞混合注入雄性裸鼠皮下,移植完成后裸鼠行手术去势,移植后第4、6、8、12周取移植物进行HE染色和免疫组织化学染色. 结果 小鼠iPSCs经类胚体形成及维甲酸诱导后Stra8、Odf2、Act和Prm1基因的相对表达量上调,分别为对照组的(4.50±1.02)、(1.48±0.04)、(10.52±0.25)和(323.28±25.64)倍;Oct-4、Dppa3、Piwil2、Tex14和Scp3基因相对表达量下调,分别为对照组的0.56±0.02、0.11±0.01、0.50±0.01、0.53±0.14和0.16±0.00.类胚体同时表达雄性生殖细胞相关蛋白VASA和联合复合体蛋白3.HE染色发现,iPSCs来源生精细胞和新生小鼠的睾丸细胞共移植后能重构成类生精小管.免疫荧光染色结果显示,类生精小管管腔内可见由iPSCs分化而来的VASA阳性生精细胞. 结论 小鼠iPSCs经类胚体形成和维甲酸诱导后可分化为雄性生殖细胞.部分iPSCs来源的生精细胞可定居于类睾丸生精小管的基底膜,异位重构的生精小管可为iPSCs向雄性生殖细胞分化提供适宜的微环境.
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甲醛对雄性生殖系统的毒作用及其机制
甲醛是常见的环境污染物,极易挥发,又缓慢释放,常通过呼吸道进入体内,能对人体各个系统产生损害.近年来研究显示,甲醛可引起雄性生殖器官、组织、细胞发生可逆和不可逆性的病理损害,其毒作用机制是通过破坏血睾屏障、诱发脂质过氧化和细胞凋亡等途径造成雄性生殖系统损伤.
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诱变剂诱导的精子染色体异常对胚胎发育的影响
环磷酰胺处理雄性小鼠后每周与超排卵雌鼠交配,制备分析受精卵染色,持续整个生精周期(7周).处理组小鼠雄原核染色体出现多种畸形,敏感期在处理后第8天,相当于诱变剂作用于睾丸精子期.处理后第8天的小鼠精子体外受精试验表明,睾丸精子期受环磷酰胺作用后精子的活力和密度及其受精能力未受显著影响,但胚胎发育受到显著阻滞(<0.01).
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国产花粉为何质不如人
您是否注意到,在琳琅满目的保健品市场中有很多产品已经被"洋货"一统天下了.花粉便是其中之一.花粉是种子植物中的雄性生殖细胞.它是蜜蜂从数百万种不同植物上采集而成的,是植物生命的精华,业内专家称其为名副其实的世界营养物质之冠.专家认为,普通的保健品基本上由几种或十几种植物的根茎叶或动物的机体内脏及其提取液构成,而花粉则是由数百万种植物的精华物质组成,所以其营养价值及保健作用远高于普通保健品,并且没有任何副作用,也不会成瘾.
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花粉广效用
花粉为高等植物的雄性生殖细胞,是种子植物特有的结构,相当于一个小孢子和由它发育的前期雄配子体。孕育着植物生命的精子,花粉在人工培养条件下,以植物激素诱导,可以发育成单倍体植株,经染色体加倍后,即能得到纯合的2倍体植株,用于杂交育种,可使杂交后代性状稳定并大为缩短育种周期,为植物育种提供了新的途径。
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花之元的异彩在百花中绽放--新一代"花之元"系列花粉产品问世
花粉是植物的雄性生殖细胞,是一种有生命的活体,花粉不仅含有200多种人体需要的丰实全面、配比平衡的营养成分,而且含有对医疗保健有重要作用的功能因子,具有双向调节的神奇功效.因此,花粉在众多保健资源中历来受到重视,被认为是21世纪有前景的食物资源,被营养专家称为"当代营养之冠"、"浓缩的微型的营养库".
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益母草对小鼠精子程序外DNA合成的抑制作用
研究证明,铅能通过睾丸屏障,造成小鼠雄性生殖细胞遗传损伤[1,2];同时铅具有重要应用价值,职业接触在所难免.因此,应用一些常用中草药对职业化学毒物损伤雄性生殖细胞防护作用的探讨,是一项有实际应用价值的研究.本文采用小鼠精子程序外DNA合成(UDS)试验,研究了益母草(Herba leonuri)对醋酸铅[Pb(CH3COO)2]引起的小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的影响.
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铅和镉对雄性小鼠生殖细胞DNA损伤的研究
目的研究一定剂量的醋酸铅、氯化镉对体外培养的雄性小鼠生殖细胞DNA损伤的作用.方法应用单细胞凝胶电泳技术检测不同浓度铅、镉离子对雄性小鼠生殖细胞DNA损伤.结果不同浓度的醋酸铅、氯化镉均可引起小鼠生殖细胞DNA的损伤,并存在明显的剂量-反应关系.结论体外条件下,醋酸铅、氯化镉可引起雄性小鼠生殖细胞DNA的损伤.
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精原干细胞研究进展
在哺乳动物的雄性成体中,存在着数套自我更新的系统,但就物种延续而言,重要的莫过于精子发生(spermatogenesis),它承担着雄性配子的产生和进化所必需的基因传递的作用.青春期启动后,精子发生贯穿整个雄性生命过程,其通过有序而且严格调控的细胞增殖和分化步骤而产生大量的精子,这一系统的基础便是精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs).作为一种雄性生殖干细胞,精原干细胞是位于睾丸曲细精管生精上皮基膜上的As细胞,其前体是原始生殖细胞(primordial germ cell,PGCs).精原干细胞一方面可以自我增殖维持自身数目的相对恒定,另一方面可以经过数次有丝分裂后进入减数分裂,形成精母细胞,终形成精子.而在此过程中,它还具有对可能的损伤维持更新的潜能和重新增殖的能力[1].精原干细胞的终生扩增性和永生性是产生雄性生殖细胞的保证,也使它成为生殖系中唯一在成年之后还能增殖的细胞.利用这一特性,精原干细胞可以作为成体多能性干细胞研究的前体.现对精原干细胞的体外培养、鉴定和目前进行的人类精原干细胞移植研究前景做简要概述.
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胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究进展
近年来,人们探索如何在体外诱导胚胎干细胞获得配子,以了解性别决定的基因调控和环境影响[1~3].这些研究都是用胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)建立1个类原始生殖细胞(primordial germ cell-like cells)的细胞群体,然后移植到睾丸或继续培养从而获得雄性或雌性配子.原始生殖细胞的迁移和向生殖干细胞的分化依赖于自身基因表达以及与周围细胞的相互作用.本文将对原始生殖细胞分化为雄性生殖细胞(有少许为雌性生殖细胞)的关键环节、原始生殖细胞和生殖干细胞分化过程中的标志物做一综述.
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诱导小鼠骨髓间充质干细胞向雄性生殖细胞的定向分化
目的 探讨小鼠骨髓间充质干细胞是否能够在体外被诱导发生向雄性生殖细胞方向的分化.方法 从雄性小鼠骨髓中分离能够长期贴壁生长的细胞,并鉴定其是否为间充质干细胞.对分离的细胞进行生殖细胞特异性报告基因标记(stra-8-GFP).采用视黄酸诱导标记的细胞发生向生殖细胞方向的分化.通过观察报告基因表达和生殖细胞相关基因mRNA表达情况确定是否发生了分化.结果 从小鼠骨髓中分离到的贴壁生长的细胞表达间充质干细胞的表面标志CD90、CD44、CD105和Sca-1;细胞在体外可以被诱导分化为成骨、成软骨及成脂肪细胞.报告基因标记的间充质干细胞在被视黄酸诱导2d后开始表达绿色荧光蛋白和生殖细胞相关基因Mvh、Fragilis和Stella的mRNA.未经视黄酸诱导的细胞不表达绿色荧光蛋白和生殖细胞相关基因.结论 小鼠骨髓间充质干细胞在体外可以被视黄酸诱导发生向雄性生殖细胞方向的分化.
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多能干细胞向雄性生殖细胞分化的研究进展
多能干细胞(PSCs)包括胚胎干细胞(ESCs)和诱导多能干细胞(iPSCs),具有分化为成体所有类型细胞的潜能.目前体外已能获得小鼠PSCs来源的成熟精子、人类ESCs (hESCs)/iPSCs (hiPSCs)来源的原始生殖细胞(PGCs)以及减数分裂前期精子细胞.若能诱导人类PSCs (hPSCs)体外分化为功能完整的成熟精子,可望治愈临床上非遗传因素无精子症;对于遗传因素导致少弱精子/无精子症,则可进一步结合基因编辑技术获得健康功能精子.iPSC分化的功能精子可避免精子细胞来源及医学伦理问题,具有更高临床价值.本文综述体外诱导PSCs向雄性生殖细胞分化的研究进展,为应用PSCs治疗男性不育提供参考.
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干细胞向雄性配子诱导分化研究进展
人类雄性配子的重要功能之一是完整地将父代遗传信息传递给子代.配子发生,尤其雄性配子发生是个极其复杂的细胞分化过程,它包括有丝分裂与减数分裂两大过程.然而由于缺乏可重复、高效率研究雄性配子发生的体外培养体系,生殖细胞发生、发育机制研究进展缓慢.干细胞经体外诱导向雄性生殖细胞分化的研究,将推进生殖细胞发育研究,甚至生殖生物学的发展.本文综述近年原始生殖细胞体外培养及干细胞向雄性配子诱导分化的研究进展.
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补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化
目的:验证补骨脂素能诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化的假说。方法使用终浓度为3.0μg/ml的补骨脂素干预大鼠间充质干细胞,显微观察细胞形态变化情况,接着使用MTT法检测细胞增殖变化,后使用实时荧光定量PCR (Qpcr)测定被干预细胞的七种代表性的生殖分化标记基因的表达变化,七种标记基因分别为:Oct-4、Stra8、RVLG、SCP3、TNP2、Itgb1、Itga6。结果显微观察表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,大鼠间充质干细胞形态变化不显著;MTT法检测表明3.0μg/ml的补骨脂素干预的5 d中,大鼠间充质干细胞增殖情况变化不显著(P>0.05);Qpcr测定表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,显著上调了Oct-4、Stra8、SCP3、Itgb1等基因的表达(P<0.05),而对RVLG、TNP2、Itga6等基因的表达影响不显著(P>0.05)。结论补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向的分化。
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显微授精和核移植研究进展及其生物医学意义
总结了近年来在哺乳动物上采用不同阶段生殖细胞进行的显微授精和核移植研究进展.分别叙述了不同阶段及来源的雌性和雄性生殖细胞进行显微授精和核移植的处理方法及需要注意的问题.指出了不同阶段生殖细胞进行临床应用的潜在价值,同时也指出了治疗性克隆的前景.