首页 > 文献资料
-
国产河豚毒素的毒性测定
河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是作用于钠离子通道的高毒神经性毒素,人畜误食含毒鱼类易致中毒或死亡.我们报道了国产TTX对小鼠和家兔(po)的毒性资料及中毒特征.为研究抗TTX的实验疫苗效果奠定了基础.
-
河豚毒素与钠离子通道的相互作用/河豚毒素在小鼠体内分布及代谢动力学/δ-睡眠肽和芋螺毒素的药理作用/刺尾鱼毒素对大鼠神经肌接头突触的传递/刺尾鱼毒素细胞毒性的作用
-
德国小蠊菊酯抗性与钠离子通道机制研究进展
菊酯杀虫剂长期使用会导致昆虫产生抗性, 严重影响德国小蠊等有害昆虫的治理.德国小蠊产生菊酯击倒抗性 (kdr) 与钠离子通道发生kdr突变有关.本文介绍了德国小蠊钠离子通道的跨膜分子结构、功能和基因表达调节方式, 同时讨论了钠离子通道kdr突变导致德国小蠊产生菊酯抗性的机制.理解钠离子通道kdr突变机制, 不仅为德国小蠊种群抗性监控提供有效分子靶标, 还可为新型杀虫剂研制提供思路.
-
急性脊髓损伤与基因表达(二)
5离子通道基因钾离子通道蛋白(putative K+ channel protein),电压门控型钾离子通道PK5(voltage-gated K+ channel PK5),电压门控型钾离子通道RK5(voltage-gated K+ channel RK5),钾离子通道TWIK(K+ channel TWIK),钾离子通道蛋白KSHⅢA3(K+channel protein KSHⅢA3),钠、钾离子腺苷三磷酸酶α2(Na+,K+ -ATPaseα2),钠离子通道Ⅰ(Na+ channel Ⅰ),钠钙离子交换蛋白基因NCKX2(Na+/Ca2+exchanger NCKX2),钙-腺苷三磷酸酶2(C2+ ATPase 2)在脊髓损伤后均下调,提示离子通道关闭,各种离子交换功能障碍.
-
苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流的影响
目的:观察苦参碱对豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流(INa)的影响,探讨其抗心律失常的作用机制.方法:豚鼠随机分为正常对照组、乌头碱组和苦参碱组.每组8只.乌头碱组以50μmol·L-1乌头碱灌流10 min,苦参碱组在乌头碱组基础上,以10,50,100 μmol·L-1苦参碱灌流20 min.采用膜片钳全细胞记录技术记录豚鼠单个心肌细胞钠电流并绘制电流密度电流强度(PA)/细胞膜电容(pF)曲线.结果:50 μmol·L-1乌头碱显著增大INa(-92.62±6.5)pA/pF[和对照组比较(-66.24±4.8)pA/pF,P<0.05].在乌头碱灌流基础上,10μmol·L-1苦参碱对INa没有明显作用,50 μmol·L-1可使INa减小至(-49.21±5.1)pA/pF(和乌头碱组比较P<0.05),100μmol·L-1又使INa稍微增大(和对照组比较P>0.05).结论:苦参碱抑制INa电流,呈浓度依赖性,浓度较高时抑制INa电流作用减弱,表现为双向调节的药理作用,可能是苦参碱抗心律失常作用温和持久的机制之一.
-
北京地区德国小蠊(Blattela germanica)对氯菊酯抗性相关的钠通道基因点突变的研究
应用RT-PCR扩增技术,克隆了北京地区自然种群德国小蠊(Blattela germanica)的钠离子通道基因片段,片段长度为162bp,并对其进行了测序.将推导的氨基酸序列与德国小蠊敏感品系的相应序列进行比较,发现在钠离子通道ⅡS4-ⅡS6的993同源位点上存在ku(TTG)→Phe(TTC)突变,表明该品系的抗药性可能与击倒抗性(knockdown resistance,kdr)有关.
-
在无杀虫剂选择下家蝇拟除虫菊酯抗性等位基因频率的变化
家蝇是重要的卫生害虫,拟除虫菊酯杀虫剂的广泛使用导致了家蝇抗药性的产生,家蝇种群演化出了多重的抗性等位基因。为推测抗性等位基因在无杀虫剂选择压下是否存在适合度代价,对来源于野外的北京家蝇种群( BJ2010)连续饲养25代,在不接触杀虫剂的实验室条件下,每隔5代检测基因型频率,测定该种群的钠离子通道等位基因和CYP6D1基因频率随时间的变化。研究结果显示,与拟除虫菊酯抗性相关的钠离子通道抗性等位基因kdr-his和CYP6D1v1频率值随时间有一定的波动,但没有显著的变化,说明kdr-his 和CYP6D1v1等位基因在无杀虫剂选择压下不存在明显的适合度代价。另一钠离子通道抗性等位基因kdr起始频率很低,其频率的终减低可能是由于遗传漂变的结果。因此,伴随拟除虫菊酯杀虫抗药性出现的抗性等位基因在BJ2010品系家蝇中并不表现适合度劣势,提示家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性一旦形成,将难于自然消减。
-
埃及伊蚊钠通道基因克隆与序列分析
电f依赖性钠离子通道是许多神经毒性药物的作用靶标.本研究采用RT-PCR技术,利用简并引物从埃及伊蚊中扩增的钠通道基因片段为4609bp,编码1 536个氨基酸,经Clustal软件分析发现与黑尾果蝇钠通道基因(para)和家蝇钠通道基因(Vsscl)有很高的相似性(80%,78%).
-
蚊虫两种靶标抗性机制的研究进展
对蚊虫抗性机制的研究在其抗性监测和环境治理方面具有重要的意义.人们经过多年的研究发现,蚊虫对杀虫剂的抗性与其行为、生理功能的改变、解毒功能的增强以及靶标位点的不敏感性均有关系.随着分子生物学的发展,基因芯片技术的普及和后基因组时代的到来,人们对蚊虫抗性形成和进化的研究已经从分子水平全面展开,已经发现并克隆出了一些与抗药性相关的靶标基因.本文将对与蚊虫抗性相关的钠离子通道和乙酰胆碱酯酶基因的研究现状作一综合介绍.
-
异位电活动的特点及其与慢性神经病理性痛的关系
外周神经损伤后,受累的背根神经节(DRG)神经元及损伤部位发放大量异位放电,这种放电被认为是慢性神经病理性痛发生发展的基础之一,但近期这一理论受到越来越多实验的挑战.本文以脊神经结扎(SNL)模型为例,从三个方面就异位放电的特点及其与慢性神经病理性痛的关系进行论述:首先介绍异位放电的特点;然后根据现有的实验资料分析异位放电发生的可能分子机制,着重讨论电压依赖性钠离子通道在异位放电中的作用;后,从正反两方面分析了损伤的外周神经产生的异位放电在慢性神经病理性痛发生发展过程中的作用.
-
消除疼痛的终理想还有多远——一种离子通道病显示出疼痛的根源
医学的分类一向是以器官为基础,例如心脏病、胃病、甲状腺病.到了分子医学时代,常常以某一种分子或基因的异常作为疾病分类的基础,例如受体病(以乙酰胆碱受体自体免疫引起重症肌无力症、自身免疫性甲状腺病为例)、离子通道病(以钠离子通道突变引起伴有高热惊厥的癫痫、高钾性阵发性瘫痪为例)等等.这种分类有可能导致医学变革的新局面,目前仅仅是拉开了序幕.本文将介绍的是发生在中国的科学故事:一种皮肤病的研究,如何开启了寻找理想镇痛药的大门.
-
不同家蝇种群拟除虫菊酯杀虫剂抗性基因频率的比较研究
目的 家蝇是一种广泛分布的重要公共卫生害虫,开展其遗传学、分子生物学的研究为认识和利用家蝇,有效地控制蝇传疾病提供科学依据.方法 检测我国5个家蝇种群中拟除虫菊酯类杀虫剂抗性等位基因的频率,通过分析在无杀虫剂选择条件下抗性等位基因频率的变化,推测抗性等位基因适合度效应.结果研究数据显示,与拟除虫菊酯类代谢抗性相关联的细胞色素P450 (CYP6D1v1)抗性等位基因在广东、上海和北京家蝇种群中频率上升,表明CYP6D1v1抗性等位基因不存在适合度代价;而CYP6D1v1等位基因在起始频率很低的山东和吉林种群中消失,可能是遗传漂变的结果.家蝇钠离子通道(Vssc)抗性等位基因(kdr-his)频率在广东、山东和吉林种群中下降,而在上海和北京种群中则有所上升,其中变化大的是山东种群,kdr-his基因频率由起始较高的0.33降至0,表明kdr-his等位基因的适合度因种群的不同而不同.进一步的序列分析表明,kdr-his等位基因可以区分为不同的单倍型,上述kdr-his基因频率的变化因种群而异,可能是因为不同家蝇种群其钠离子通道基因单倍型有所不同.结论不同的抗性基因或相同基因的不同单倍型具有不同的适合度,提示家蝇抗药性检测和抗性治理要因地制宜.
-
家蝇拟除虫菊酯抗药性的分子生物学监测
目的建立一种可以早期检测昆虫拟除虫菊酯抗药性的方法,以利于抗药性的控制.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法,用自行设计的特异引物,对昆虫的钠离子通道基因进行扩增.结果共检测敏感家蝇和溴氰菊酯抗性家蝇各20只,在所有抗性家蝇的钠离子通道基因中均扩增出特定大小基因片段(183 bp),表明基因发生了抗性突变.而在所有敏感家蝇的钠通道基因中均未扩增出该基因片段,表明未发生基因突变.结论PCR能够在短时间内完成对昆虫拟除虫菊酯抗性的检测,为早期监测昆虫对拟除虫菊酯的抗药性提供了快速可行的方法.
-
广西北海市家蝇杀虫剂抗性基因频率的检测与分析
目的 通过检测杀虫剂抗性基因频率对广西壮族自治区北海市家蝇的抗药性现状进行分析,为该地区家蝇的防治提供依据.方法 通过限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法对野外采集家蝇的细胞色素P450 CYP6D1基因、钠离子通道基因(Vssc)和乙酰胆碱酯酶(AChE)基因(ace)进行分型,统计其基因型频率.结果 北海市的63只家蝇样本经过检测,未发现CYP6D1抗性纯合个体,而敏感纯合个体所占比例高达96.83%(61/63),杂合个体频率为3.17%(2/63),CYP6D1抗性等位基因频率仅为1.59%.在同一样本中,检测到Vssc杂合子(10141/F)的基因频率为6.35%(4/63),敏感纯合子(1014L/L)的个体基因频率高达93.65% (59/63),未发现1014F的纯合个体及1014H突变个体.在北海市的38只家蝇样本中,检测到342G/A和342A/V两种AChE基因型个体,其频率分别为5.26%和94.74%,抗性等位基因频率总和(342A+342V)高达97.37%.结论 北海市家蝇样本中的CYP6D1和Vssc抗性等位基因频率均较低,而AChE抗性等位基因频率极高,提示目前北海市可使用拟除虫菊酯类杀虫剂防治家蝇;同时在该地区减少使用有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂进行灭蝇,避免家蝇种群抗性基因频率继续升高,以延缓抗性的发展.
-
钠离子通道与拟除虫菊酯击倒抗性的研究进展
拟除虫菊酯类杀虫剂具有高效低毒低残留性,现已占有全球超过25%的杀虫剂市场,广泛用于农业和卫生害虫的防制.然而20多年来的持续应用,导致很多昆虫都对之产生了抗药性,从而减损了这种杀虫剂持续有效的应用[1].神经生理学研究表明,DDT和拟除虫菊酯的作用机制是干扰电位依赖的Na+通道闸门开闭的动力学,使得Na+通道延迟关闭,引起重复后放(repetitive after discharge)和突触传递的阻断[2-3].昆虫神经系统对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性下降主要与神经细胞膜上Na+通道的敏感性降低有关.现介绍近年来对Na+通道与拟除虫菊酯击倒抗性的研究进展.
-
德国小蠊钠离子通道抗性研究进展
德国小蠊在医学与经济方面的重要性和危害性促使人们对其进行广泛的化学防治,但随之产生严重的抗性.该文以德国小蠊钠离子通道抗性即击倒抗性(knockdown resistance,kdr)为主题,重点论述了德国小蠊kdr抗性的发现历史、分子与进化机制,扼要介绍了钠离子通道结构特征、kdr突变的功能研究方法以及近期所取得的代表性研究结果.此外,概述了该领域的新研究方向及结果对德国小蠊防制、抗性监测与治理等的理论与指导意义.
-
特异性等位基因PCR扩增技术检测家蝇击倒抗性相关钠通道的基因突变
城市家蝇(Musca domestica)的化学防制多以混配或复配拟除虫菊酯类杀虫剂为主,近10年来国内各城市均有家蝇对拟除虫菊酯产生抗药性的报道[1-5].昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性主要是击倒抗性(knockdown resistance,kdr),Farnham发现kdr在家蝇对拟除虫菊酯的抗性中具有重要作用.拟除虫菊酯的作用靶标主要是昆虫神经细胞膜上的钠离子通道[6,7],通过比较敏感、抗性及高抗性家蝇的部分及全部钠通道基因序列,发现para型钠通道Vssc1基因的L1014F(亮氨酸到苯丙氨酸)即CTT→TTT的突变和击倒抗性相关[8-10].
-
河豚毒素的免疫保护试验
河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是目前已知的毒性强的非蛋白毒素之一,存在于河豚鱼和其它有毒海洋生物,因阻滞钠离子通道,阻断神经肌肉传导,引起肌肉麻痹和呼吸麻痹,导致人畜死亡.我国沿海中毒事件屡有发生,病死率在30%~60%.鉴于TTX的潜在军事意义以及我国为河豚中毒多发区,我们开展了河豚中毒的免疫抗毒研究.
-
角质细胞生长因子受体转基因对急性肺损伤时肺泡上皮细胞钠离子通道的影响
目的 观察角质细胞生长因子受体(KGFR)腺病毒表达载体在大鼠急性肺损伤前后对肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达的促进作用,从而验证基因治疗急性肺损伤的效果.方法 将雄性SD大鼠40只分成4组:正常对照组(n=8),致伤对照组(n=10),正常转基因组(n=10),致伤转基因组(n=12).用脂多糖(LPS)造成急性肺损伤模型,以肺组织明显肿大病变为制模成功标准.正常转基因组和致伤转基因组均通过大鼠尾静脉注射KGFR基因的腺病毒表达载体应用液1 mL,72 h后致伤转基因组和致伤对照组分别通过大鼠尾静脉以5 mg/kg注射LPS,正常转基因组和正常对照组则注射等量的生理盐水.过48 h后,断头处死所有实验组大鼠,取肺组织进行实验.通过免疫组化和免疫电镜检测各组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道的表达情况.数据采用完全随机区组设计的方差分析,行LSD-t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 肺泡Ⅱ型上皮细胞钠离子通道表达水平(免疫组化)由高到低依次为:正常对照组(PU值=47.7±3.33),正常转基因组(PU值=46.9±5.21),致伤转基因组(PU值=29.19±4.11)和致伤对照组(PU值=5.1±2.3);致伤转基因组的钠离子通道表达水平低于正常转基因组(t=9.134,P<0.001)和正常对照组(t=10.601,P<0.001),但明显高于致伤对照组(t=16.466,P<0.001).结论 KGFR腺病毒表达载体转基因效果明显,能够在LPS致伤情况下有效促进钠离子通道的表达,缓解肺泡腔内钠水潴留,达到转基因治疗肺损伤的效果.
关键词: 角质细胞生长因子受体 钠离子通道 急性肺损伤 基因治疗 -
Nav1.8在疼痛中的研究进展
Nav1.8是相关神经病理性和炎性疼痛的重要离子通道,对其进行深入、全面的了解具有重要意义.本文从Nav1.8的分子结构、表达、功能、药物开发等方面出发,对Nav1.8的表达部位、调节机制、参与疼痛种类、以及高选择性药物研究情况进行详细介绍.并就Nav1.8在疼痛中的研究现状和趋势发展进行详细综述.