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P53、p21WAF1/CIP1蛋白在宫颈鳞癌中的表达
P53野生型蛋白质分子具有抑制肿瘤细胞的作用,但其突变型的等位基因却具有癌基因的作用特点,可使体外培养的细胞发生恶变[1].近年来P53与肿瘤的发生机制研究较多,认为P53通过两种途径:一是下调p21WAF1/CIP1,一是非p21依赖型.本研究探讨P53、p21WAF1/CIP1表达与宫颈鳞癌的组织学分级及相关性.
关键词： 宫颈肿瘤 P53 p21WAF1/CIP1 免疫组织化学 -
喉癌患者的p21WAF1/CIP1和p53表达情况及其临床病理价值研究
目的 探讨喉癌患者的p21 WAF1/CIP1和p53表达情况并对其临床病理价值进行研究.方法 采用回顾性研究方法,选取2015年1月至2017年1月接收治疗的100例喉癌患者作为研究组,另外选取100例未患有喉癌的急性喉炎患者作为对照组.使用免疫组织化学方法(即S-P法)检测两组患者p21WAF1/CIP1和p53的表达情况,观察研究组p21WAF1/CIP1、p53表达同临床病理参数之间的关系,以及p53蛋白的表达与p21WAF1/CIP1表达的相关性.结果 随着分化程度的增加,p21WAF1/CIP1的阳性表达率逐渐增加,高分化患者的阳性表达率明显高于低分化患者(P＜0.05);患者p21WAF1/CIP1、p53的阳性表达率与性别、临床分型、T分期以及临床分期之间的差异无显著性(P＞0.05);p21WAF1/CIP1在对照组及研究组中的阳性表达率分别为94.0％、64.0％,对照组明显高于研究组,p53在对照组中的阳性表达率为0,研究组为62.0％,研究组明显高于对照组,两组差异有显著性(P＜0.05);p53蛋白的表达同p21WAF1/CIP1表达不存在相关性.结论 p21WAF1/CIP1蛋白受到抑制、p53基因表达均与喉癌的发生存在密切的关系,但p21WAF1/CIP1的表达同p53基因的表达之间不存在相关性,明确二者在喉癌患者体内的表达对于临床诊治有重要意义.
关键词： 喉癌 p21WAF1/CIP1 P53 临床病理价值 -
大鼠放射性肺损伤进程中PAI-1、P21WAF1/CIP1、α-SMA和PCNA表达的变化及意义
目的 探讨Ⅰ型组织纤溶酶原激活物抑制剂( PAI-1)、P21 WAF1/CIP1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及细胞增殖核抗原(PCNA)在大鼠放射性肺损伤中表达的变化及意义.方法 采用25 Gy60Coγ射线全胸照射二级雄性Wistar大鼠60只,复制大鼠放射性肺损伤动物模型,分别于照射后1d,1 w,1 m和3 m活杀取材,采用免疫组化SP法检测PAI-1、P21 WAF1/CIP1、α-SMA和PCNA在该病进展过程中表达的变化并对前三者的积分光密度和PCNA胞核阳性细胞数定量分析.结果 PAI-1表达于支气管上皮细胞和平滑肌细胞、血管壁平滑肌细胞、成纤维/纤维细胞等间质细胞胞浆,照射后1 m和3 m表达显著增强,除上述部位外,还见于渗出区巨噬细胞胞浆.P21 WAF1/CIP1表达于支气管上皮细胞和平滑肌细胞、血管平滑肌细胞、成纤维/纤维细胞等间质细胞、巨噬细胞胞浆,照射后1 w、1 m和3 m阳性细胞减少,表达减弱.正常肺组织中α-SMA表达于支气管壁和血管壁平滑肌细胞胞浆,照射后1 w和3 m,除上述表达部位外,肺间隔内可见大量强阳性细胞.PCNA阳性细胞数(主要为成纤维细胞、巨噬细胞等)于照射后1 m显著增加,照后3 m增加至正常的6倍.结论 PAI-1、PCNA和α-SMA的表达随着放射性肺损伤痛变进展而增强,表明成纤维细胞等细胞成分的增殖和活化在放射性肺损伤过程中发挥重要作用,提示上述指标有可能作为放射性肺损伤进程的标志物.
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丙戊酸钠诱导Siha细胞周期阻滞的实验观察
目的:研究丙戊酸钠对人宫颈癌Siha细胞增殖和细胞周期的影响.方法:MTT检测生长抑制,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法检测p21WAF1/CIP1、p-CDK2和cyclin E蛋白.结果:丙戊酸钠以剂量依赖性方式抑制Siha细胞生长IC20和IC50分别为2.0 mmol/L和8.0 mmol/L;丙戊酸钠上调G0/G1期比例由(74.92±0.60)%升高至(84.475±1.11)%,P=0.001,下调S期(13.19±0.70)%降为(7.72±1.40)%,P=0.004和G2/M(11.89±1.30)%降为(7.81±0.31)%期比例,P=0.006.丙戊酸钠上调p21WAF1/CIP1蛋白,下调cyclin E和p-CDK2蛋白.结论:丙戊酸钠上调p21WAF1/CIP1表达和抑制cyclin E表达,使细胞阻滞于G0/G1期,抑制Siha细胞生长.
关键词： 丙戊酸钠 宫颈肿瘤 细胞周期 p21WAF1/CIP1 cyclin E -
胃肠道类癌中生长抑素和p21WAF1/CIP1蛋白表达的意义
目的探讨生长抑素和p21WAF1/CIP1蛋白阳性表达与胃肠道类癌的组织分化、浸润和转移的关系.方法采用免疫组化S-P法对36例胃肠道类癌组织生长抑素和p21WAF1/CIP1蛋白的表达进行检测.结果 36例类癌组织中,生长抑素和p21WAF1/CIP1蛋白较多表达于高分化类癌组(P＜0.05),随着肿瘤的浸润和淋巴结转移,生长抑素阳性表达率显著降低(P＜0.01),p21WAF1/CIP1阳性表达差异有显著性(P＜0.05).结论生长抑素和p21WAF1/CIP1低表达在类癌的组织分化和发展中起着重要作用,可用于临床对患者进行预后判断.
关键词： 类癌 生长抑素 p21WAF1/CIP1 免疫组织化学 -
p21WAF1/CIP1基因的转录调控机制及其与肿瘤的关系
p21WAF1/CIP1基因参与多条信号通路,在细胞周期、细胞分化及凋亡等重要的细胞活动中具有重要作用.文章对p21WAF1/CIP1基因转录调控机制及其与肿瘤的关系进行阐述,以进一步明确其在肿瘤诊断、治疗和预后评价中的应用价值.
关键词： 基因 p21WAF1/CIP1 细胞周期 多态性 肿瘤 -
重组腺病毒介导P21WAF1/CIP1过量表达治疗人脑胶质瘤的实验研究
目的研究基因转移P21WAF1/CIP1过量表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响和治疗作用.方法本文构建缺陷型重组腺病毒载体:在CMV启动子控制下的人P21 cDNA(Ad-P21),其编码人P21蛋白.通过流式细胞仪、RT-PCR进行P21表达检测;应用TUNEL法、免疫组化、荧光显微镜和流式细胞仪进行相关凋亡检测、分析.结果 RT-PCR检测五株亲本胶质瘤细胞表达P21WAF1/CIP1cDNA,而流式细胞仪未检测到P21表达;Ad-P21转导的胶质瘤细胞株均过量表达P21;在体内外Ad-P21能诱导胶质细胞瘤向终末分化、凋亡或诱导炎症反应抑制肿瘤生长或消退.结论基因转移P21WAF1/CIP1为研究基因治疗恶性脑胶质瘤提供了有效的手段.
关键词： p21WAF1/CIP1 凋亡 胶质瘤 基因治疗 重组腺病毒 -
p21WAF1/CIP1基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系
p21WAF1/CIP1基因是在1993年由不同的实验室用不同的方法克隆出来的.Harper JW等[1]运用酵母双杂交的方法发现一种可与细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)相互作用的蛋白,并经蛋白测序和PCR 的方法将其克隆,命名为CDK相互作用蛋白1(cyclin-dependent kinase interacting protein 1,CIP1).
关键词： p21WAF1/CIP1 细胞周期 细胞凋亡 细胞分化 肿瘤/遗传学 -
苯丁酸钠通过上调p21 WAF1/CIP1基因抑制白血病细胞系的细胞周期
目的研究组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂苯丁酸钠(PB)对白血病细胞系细胞周期的影响,探讨其分子机制.方法PB处理白血病细胞系Kasumi-1、U937和NB4细胞,分别于处理后24,48和72 h收集细胞.碘化丙锭DNA染色,流式细胞术分析细胞周期的变化.半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析细胞周期相关基因p21WAF1/CIP1表达的变化.在人肾上皮细胞系293T细胞用荧光素酶报告基因分析PB对p21WAF1/CIP1基因启动子活性的影响.结果PB可以抑制Kasumi-1、U937和NB4细胞的细胞周期,作用呈时间和剂量依赖关系.3 mmol/L PB作用72 h,分别使Kasumi-1、U937和NB4细胞的G0/G1期细胞比例增加42.03%、44.36%和26.82%,S期细胞比例减少31.86%、38.91%和26.77%.PB使Kasumi-1、U937和NB4细胞p21WAF1/CIP1表达增高.PB处理后,p21WAF1/CIP1的表达水平较处理前增高(2.06±0.27),(2.78±0.40)和(1.78±0.20)倍.PB可以上调p21WAF1/CIP1启动子的转录活性,且呈剂量依赖关系.3 mmol/L PB处理48 h使转录活性增高(5.74±0.93)倍.PB上调p21WAF1/CIP1启动子转录活性主要是依赖于转录起始位点上游101 bp的序列.结论PB可以抑制白血病细胞系的细胞周期,这种作用可能是通过上调细胞周期相关基因p21WAF1/CIP1的表达实现的.
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AML1-ETO对p21 WAF1/CIP1启动子转录活性作用的研究
目的 观察AML1-ETO融合基因对p21WAF1/CIP1基因启动子转录活性的影响,探讨AML1-ETO促进白血病发生的机制.方法 构建p21WAF1/CIP1基因启动子的报告质粒,与AML1-ETO、AML1b和AML1a的表达质粒共转染非洲绿猴肾细胞系CV-1细胞,测定荧光素酶的活性,分析AML1-ETO、AML1b和AML1a对p21WAF1/CIP1基因启动子转录活性的影响.结果 在CV-1细胞中,AML1-ETO对p21WAF1/CIP1基因启动子的转录具有明显的抑制作用,在pCMV5-AML1-ETO的剂量为1000 ng时,p21WAF1/CIP1启动子的转录活性下降为对照组的(19±4)%,这种作用具有序列特异性和剂量依赖性;AML1b和AML1a对p21WAF1/CIP1基因启动子转录活性的抑制作用不明显,在剂量为1000 ng时,p21WAF1/C1P1启动子的转录活性分别下降为对照组的(61±16)%和(59±16)%.结论 AML1在与ETO形成融合基因后,其产物由于ETO蛋白能够更有效地募集转录共抑制复合物,其转录抑制活性要比AML1a和AML1b更强;外源的AML1-ETO对p21WAF1/CIP1的作用可能也与细胞系有关.
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滋养细胞疾病中Cyclin E及其相关蛋白的表达
目的：探讨细胞周期蛋白E（Cyclin E）、细胞周期蛋白依赖激酶2（CDK-2）、P27KIP1和P21WAF1/CIP1在正常胎盘组织、葡萄胎和滋养细胞肿瘤（gestational trophoblastic neoplasia，GTN）组织中的表达，研究上述指标表达水平的相关性以及与妊娠滋养细胞疾病（gestational trophoblastic disease，GTD）的关系。方法：采用链霉素-过氧化物酶免疫组化方法检测30例正常胎盘组织、38例葡萄胎组织和9例GTN组织（侵蚀性葡萄胎8例，绒癌1例）中Cyclin E、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表达，分析其与GTD发生发展及预后的关系。结果：①Cyclin E、CDK-2在葡萄胎和GTN组织中的表达高于正常胎盘组织（P＜0.01）；P27KIP1和P21WAF1/CIP1在GTN组织中的表达低于葡萄胎和正常胎盘组织（P＜0.05）， P27KIP1和P21WAF1/CIP1在发生恶性转变的葡萄胎组织中的表达低于未发生恶变者（P＜0.05）。②Cyclin E与P27KIP1、P21WAF1/CIP1的表达呈负相关（P＜0.05）；Cyclin E与CDK-2的表达呈正相关（P＜0.05）；P27KIP1与P21WAF1/CIP1的表达呈正相关（P＜0.05）。CDK-2表达随P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表达降低呈增高趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：Cyclin E/CDK-2复合物及其抑制蛋白P27KIP1和P21WAF1/CIP1的异常表达参与了GTN的发生发展；P27KIP1和P21WAF1/CIP1可能成为预测葡萄胎恶变的有效标记物。
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子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜中的Bim和p21WAF1/CIP1表达及相关性研究
目的 探讨Bim和p21 WAF1/CIP1在子宫内膜异位症发病中的作用及相关性.方法 采用免疫组化SP法检测30例正常子宫内膜和30例子宫内膜异位症患者的在位内膜和异位内膜的Bim和p21 WAF1/CIP1的表达.结果 Bim在正常子宫内膜、子宫内膜异位症的在位内膜、异位内膜的表达分别为86.7%、60%、43.3%,p21 WAF1/CIP1在子宫内膜异位症的在位内膜、异位内膜的表达分别为83.3%、56.7%、46.7%.子宫内膜异位症的在位内膜组、异位内膜组中,Bim和p21 WAF1/CIP1均呈正相关.结论 Bim和p21 WAF1/CIP1的凋亡与增殖作用在子宫内膜异位症的发展中起相互促进作用.
关键词： 子宫内膜异位症 在位子宫内膜 异位子宫内膜 BIM p21WAF1/CIP1 -
子宫颈鳞状细胞癌中P53、MDM2的表达与HPV16感染的关系
目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌中P53、MDM2蛋白的表达及其与高危HPV16型感染的关系.方法 免疫组化二步法检测43例子宫颈鳞状细胞癌、20例CIN、15例慢性子宫颈炎中P53、MDM2的表达,HPV16的检测应用原位杂交法.结果 43例子宫颈鳞状细胞癌中HPV、P53、MDM2的表达率分别为46.51%、34.88%、25.58%,CIN中的表达率分别为45%、5%、15%,HPV16在慢性官颈炎中的表达率为6.67%,P53、MDM2未见阳性表达,三组比较有统计学意义(P＜0.05).P53、MDM2在HPV16阳性和阴性两组间的表达差异无统计学意义.结论 HPV16与子宫颈鳞状细胞癌的发生密切相关,P53、MDM2的表达并不因HPV16的存在而消失.
关键词： 子宫颈癌 人乳头状瘤病毒 P53 p21WAF1/CIP1 -
侵袭性垂体腺瘤中p21ras p21WAF1/CIP1的表达及临床意义
侵袭性垂体腺瘤形成原因尚不清楚,很多学者从细胞、分子水平来对与其发病相关的因素进行研究,以期对其发生机制及侵袭、复发相关性作出预测并指导临床治疗,取得了一定的进展.本文通过免疫组织化学方法研究垂体腺瘤组织中p21ras和p21WAF1/CIP1的表达特征、相关性及其与垂体腺瘤侵袭程度的关系.
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重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α调节细胞周期的分子机制
背景:目前研究显示低氧诱导因子1α可诱导细胞周期停滞,但其机制尚不清楚.目的:研究重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α (Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803)调节细胞周期的分子机制.设计、时间及地点:对照实验,于2007-03/12在南方医科大学中医实验中心完成.材料:人结肠腺癌细胞株LoVo细胞由南方医院消化内科实验室提供;重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ载体为自行构建.方法:将重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ在HEK293A细胞中扩增,测定病毒滴度,然后在常氧下以感染复数10,20,30,40,50,60,70,80,90,100感染LoVo细胞.主要观察指标:X-gal染色检测重组腺病毒对LoVo细胞的感染效率;荧光定量PCR检测不同时间点低氧诱导因子1α与p21WAF1/CIP1的mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果:①重组腺病毒扩增后能获得较高的滴度,在LoVo细胞中具有很高的感染效率,感染效率与感染复数成量效关系,当感染复数为60时,感染效率为90%以上.②随低氧诱导因子1α表达的增高,p21WAF1/CIP1的表达也相应增高,两者存在正相关(r=0.945, P＜0.05).③与对照病毒相比,重组腺病毒感染后LoVo细胞增殖轻度受抑;细胞周期示G1期细胞明显增加,S期的细胞显著减少(P＜0.05).结论:①重组腺病毒载体介导的人HIF-1α-Ala564-Ala803基因可有效地转染LoVo细胞并成一定的量效关系.②低氧诱导因子1α在细胞周期的调节中发挥重要的作用,可能通过上调p21WAF1/CIP1的表达,诱导细胞周期停滞于G1期.
关键词： 腺病毒 HIF-1α p21WAF1/CIP1 细胞周期停滞 -
中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1表达的研究
目的通过研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1蛋白丰度变化的影响,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断和治疗效应及其机制.方法 2002年11月至2004年4月华中科技大学同济医学院附属同济医院采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测HCMV感染后24h、48h、72h、96h细胞中p21WAF1/CIP1丰度,检测中药金叶败毒制剂干预后p21WAF1/CIP1丰度的变化.结果病毒感染后24h、48h、72h、96h细胞中p21WAF1/CIP1丰度呈下降趋势,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势.结论中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的p21WAF1/CIP1丰度下降,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一.
关键词： 中药金叶败毒制剂 人巨细胞病毒 p21WAF1/CIP1 -
P21 WAF1/CIP1在眼科相关疾病中的研究进展
研究进展作一综述.
关键词： p21WAF1/CIP1 视网膜 角膜 白内障 青光眼 -
乳腺癌MCF-7细胞p21WAF1/CIP1启动子区雌激素受体α的高功能结合位点
目的 研究雌激素受体(ER)α募集于p21WAF1/CIP1启动子区调控其转录活性的具体作用位点,明确辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)及瘦素(leptin)在调节p21WAF1/CIP1启动子功能中的分子机制.方法 将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol/L的SAHA 0.88 μL(SAHA组)、0.625 nmol/L的leptin 10 μL(leptin组)处理24 h,对照组在完全型RPMI-1640培养基中培养细胞.应用染色质免疫共沉淀技术将各组细胞裂解液与ERα抗体孵育,收集纯化结合ERα抗体的DNA片段,应用实时PCR法检测p21WAF1/CIP1启动子区从转录起始点到其上游(+ 2～-4 000 bp) f1 ～f10片段的DNA相对表达量并用2-△△Ct法分析.结果 对照组中,与ERα抗体结合的f1、f2、f8片段DNA相对表达量较f9片段高出2倍以上(P＜0.01).与对照组比较,SAHA及leptin组f1～f10片段与ERα抗体结合能力均降低,其中SAHA组f8片段DNA相对表达量达低值(P＜0.01),且明显低于leptin组(P＜0.01).SAHA组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其升高(P＜ 0.05或0.01).leptin组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其降低,除f1外均有统计学差异(P＜0.01).结论 乳腺癌细胞增殖过程中细胞增殖信号招募ERα至p21WAF1/CIP1启动子区,且p21WAF1/CIP1启动子区-2 800bp～-3 200 bp区域存在与ERα高度结合的靶功能区.
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肝胆管癌丙型肝炎病毒感染与p53和p21WAFD/CIP1异常表达的关系
为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染与p53和p21WAF-CIP1基因的关系.采用免疫组化技术对29例原发性肝胆管癌中HCV抗原(NS5-Ag)、p53和p21WAF/CIP1蛋白表达进行研究.结果:29例胆管癌中NS5-Ag、p53及p21WAF1/CIP1蛋白表达进行研究.结果:29例胆管癌中NS5-Ag、p53及p21WAF1/CIP1的阳性率分别为51.7%(15/29),48.3%(14/29)和72.4%(21/29).NS5-Ag阳性与阴性组间p53和p21WAF1/COP1的表达有明显差异(P＜0.05).结论:p53和p21WAF1/CIP1基因可能参与胆管上皮的癌变过程,p53和p21WAF1/CIP1表达异常与HCV感染有一定关系.
关键词： 胆管癌 HCV P53 p21WAF1/CIP1 -
p33ING1转染HepG2肝癌细胞对p21WAF1/ CIP1表达的影响
目的 探讨p33ING1对pcDNA3.1-p33ING1转染后的HepG2肝癌细胞p21WAF1/CIP1表达的影响.方法 实验分为对照组和转染组;将pcDNA3.1-p33ING1及空载质粒pcDNA3.1转染到HepG2细胞中,终建立稳定转染的细胞株,RT-PCR检测p33ING1表达;RT-PCR和免疫组化检测P21WAF1/ CIP1mRNA和蛋白质表达.结果 与对照组比较,转染组p33ING1mRNA表达明显增高(P＜0.05),p21WAF1/CIP1mRNA及蛋白质表达亦明显高于对照组(P＜0.05).结论 成功建立pcDNA3.1-p33ING1的HepG2细胞株,并证实p33ING1影响p21WAF1/ CIP1mRNA和蛋白质的表达.
关键词： p33ING1 p21WAF1/CIP1 HepG2 抑癌基因
