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重组腺相关病毒介导的HO-1基因转染对大鼠移植肾缺血再灌注损伤的保护作用

周成;谢晋良;朱向荣;丁翔;王耀磊

摘要: 目的探讨重组血红素氧合酶-1基因(Heme oxygenase-1,HO-1)腺相关病毒(rAVV-HO-1)对大鼠自体移植肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法将48只雄性成年Lewis鼠随机分为两组。转染组(n=24)在供肾切取时应用rAVV-HO-1原位灌注;对照组(n=24)用磷酸盐缓冲溶液(PBS)原位灌注。所有供肾保存于4℃的UW液中24 h后行自体移植,同时切除对侧肾脏。留取术后3h、3d、7d的血清和尿标本以比较血肌酐、尿蛋白;取移植后3 h、3 d、7 d时的肾组织标本,以RT-PCR、免疫组化分析移植肾HO-1基因及蛋白的表达,间接法测定HO-1的活性。结果将rAVV-HO-1原位灌注后,转染组移植后3 h、3 d、7 d移植肾HO-1mRNA的表达强度分别为(0.55±0.13),(0.82±0.19)和(0.39±0.09),对照组移植后3 h、3 d、7 d的HO-1mRNA表达强度分别为(0.11±0.07)、(0.10±0.09)和(0.09±0.03),转染组在各时间点的HO-1 mRNA表达都明显高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。免疫组化结果显示转染组移植后3 h可见HO-1蛋白表达,而对照组无表达。3 d、7 d后转染组移植肾可见HO-1蛋白强阳性表达,而对照组仅可见HO-1蛋白微弱表达,两组具有显著差异。转染组移植后7 d血肌酐水平为(2.14±0.87)mg/dL,明显低于对照组(7.33±2.31)mg/dL,移植后7 d治疗组尿蛋白为(5.10±1.23)μg/mL,明显少于对照组(11.61±3.39)μg/mL,差异均有统计学意义(P〈0.05)。移植后3 d、7 d治疗组胆红素浓度明显高于对照组(P〈0.05)。结论用rAVV-HO-1转染大鼠移植肾可以诱导移植肾中HO-1的稳定表达,并对移植肾缺血再灌注损伤具有保护作用。

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