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蛋白激酶C活性、表达及亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药相关性的研究

孙爱民;袁亚维;陈龙华

摘要: 目的研究多药耐药肿瘤细胞PKC活性、PKC亚型的表达和亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药的关系.方法MTT法检测敏感株KB和耐药株KBV200细胞的耐药性;32P掺入法测定PKC的活性;Western blot法检测KBV200及其亲本KB细胞株PKC亚型的表达和亚细胞分布.结果长春新碱(VCR)和阿霉素(ADR)对KBV200细胞的IC50值分别高于KB细胞(P<0.01);耐药指数(RI)分别为65.03和19.8.KBV200细胞的膜组分、浆组分的PKC活性均较KB细胞高,KBV200细胞的总PKC活性是KB细胞的2.12倍.Western blot结果发现KBV200和KB细胞膜组分及浆组分均有PKCα的表达,且KBV200细胞的表达较KB明显增强.PMA可升高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分pKC活性,降低浆组分PKC活性、表达(P<0.01);PMA可升高VCR、ADR对KBV200细胞的IC50值(P<0.01).SP可降低PKC活性;SP预孵育使PKCα膜组分和浆组分的表达均降低,可降低VCR、ADR对KBV200细胞的IC50值(P<0.01).结论KBV200细胞的PKC活性、表达、亚细胞分布与KB细胞有明显差别,这种差别可能与KBV200耐药性的变化密切相关,在PKC亚型中,PKCα的表达明显高于其他亚型,且高于亲本株,提示KBV200细胞中PKCα与多药耐药相关.

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