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PCR-SSCP分支杆菌菌种初步鉴定方法的建立及其应用

吴雪琼;张俊仙;刘佳文;黄海南;王晋洪

摘要: 目的:建立一种简便、快速、灵敏和特异的分支杆菌菌种鉴定方法.方法:通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)-单链构象多态性(Single-strnde d Conformation Polymorphism,SSCP)方法分析分支杆菌16S rRNA,根据其电泳图谱与标准株的相似性进行菌种初步鉴定.结果:29种分支杆菌标准株中,除结核分支杆菌、牛结核分支杆菌和卡介苗之间及堪萨斯分支杆菌和胃分支杆菌之间SSCP电泳图谱相似外,其余各种分支杆之间电泳图谱均有显著差异.70株BACTEC TB460初步鉴定为结核分支杆菌复合群的临床分离株中,55株显示与结核分支杆菌SSCP电泳图谱相似,15例(21.4%)显示出与结核分支杆菌完全不同的电泳图谱;10株经传统方法鉴定为结核分支杆菌的分离株中,仅1株显示出与结核分支杆菌不同的电泳图谱.结论:PCR-SSCP有可能成为一种快速、有效的分支杆菌菌种初步鉴定方法.

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