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宿主DNA对埃立克体病PCR诊断的抑制作用研究

朱晓宇;张慧娟;张建华;俞东征

摘要: 目的:优化埃立克体病的PCR诊断方法.方法:构建含有查菲埃立克体16S rRNA基因片段的重组载体.比较巢式PCR和普通一步法PCR的灵敏度差异.用RAW264.7细胞DNA模拟实验室诊断时的宿主细胞DNA,评估宿主细胞DNA对巢式PCR效率的影响.添加BSA作为优化剂,探讨BSA是否能降低宿主DNA的干扰.结果:巢式PCR可以扩增出特异性产物的低模板量为103拷贝,一步法PCR是105拷贝.50~100 ng的宿主细胞DNA能够降低巢式PCR的效率.BSA可以降低宿主细胞DNA对PCR的抑制作用.结论:巢式PCR的灵敏度明显高于一步法PCR;BSA可以降低宿主细胞DNA干扰,提高PCR的效率.建议埃立克体病的诊断应尽量选择巢式PCR,必要时可加入适量的BSA以提高灵敏度.

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  • 新生儿肺炎免疫功能及心肌酶谱变化的临床意义

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  • 子痫前期孕妇白细胞分化抗原可溶性CD40配体和肿瘤坏死因子-α水平变化及其与部分生化指标的相关性分析

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  • 血清同型半胱氨酸和C-反应蛋白联合检测在冠心病患者诊断中的价值分析

    作者:李诺飞

    目的 探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)和C-反应蛋白(CRP)联合检测在冠心病患者中的诊断价值.方法 选自本院于2015年6月-2016年6月收治的冠心病患者81例作为研究对象,同时选自本院同期健康体检者72例.采用循环酶法测定Hcy,采用胶乳增强免疫比浊法(透射比浊法)测定CRP.比较2组血清Hcy和CRP水平变化及Hcy联合CRP特异度和灵敏度.结果 观察组血清Hcy和CRP高于对照组(P<0.05);不稳定型心绞痛组和急性心肌梗死组血清Hcy和CRP含量高于稳定型心绞痛组,且急性心肌梗死组血清Hcy和CRP含量高于稳定型心绞痛组(P<0.05);Hcy联合CRP特异度和灵敏度均高于仅单项Hcy和CRP(P<0.05).结论 Hcy和CRP与冠心病密切相关,联合检测有助于冠心病患者早期诊断.

  • 中性粒细胞指数、降钙素原和C-反应蛋白在四肢闭合性骨折术后早期感染中的诊断价值

    作者:范亮全;徐天波;候振海

    目的 研究中性粒细胞指数(CD64指数)、降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)在四肢闭合性骨折术后早期感染的诊断价值.方法 选取本院骨科2009年1月-2017年7月住院手术治疗的闭合性骨折术后感染患者22例,采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞膜表面CD64表达水平,ELISA法和免疫透射比浊法测定血清中PCT及CRP的含量,制作ROC曲线分析三者在四肢闭合性骨折术后早期感染的诊断价值.结果 四肢闭合性骨折术后发生感染患者的CD64指数、PCT、CRP在术后1 d、3 d和7 d明显高于手术前.CD64 ROC曲线下面积为0.932 8,明显高于PCT和CRP.当CD64指数截断值为5.696%时,其诊断灵敏度和特异度均优于CRP和PCT,三者联合应用时,灵敏度和特异度有明显提高.结论 联合CD64指数、PCT及CRP检测对提高四肢闭合性骨折术后早期感染诊断的灵敏度和特异度具有重要价值,有助于临床早期诊断及早期治疗.

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