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  • 细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢中的表达及意义

    作者:刘秀兰;闫晓红

    目的 检测细胞色素P450芳香化酶(P450 arom)在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达水平,探讨P450 arom与多囊卵巢综合征(PCOS)的关系. 方法 应用半定逆转录-聚合酶链反应(RT-PcR)检测PCOS实验组及正常对照组大鼠卵巢组织中P450 arom基因(CYP19)的表达;采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法对大鼠卵巢组织中P450 arom进行检测. 结果 实验组和对照组卵巢组织中CYPl9基因,相对表达强度分别为(0.138±0.072)和(0.759±0.236),差别有显著性意义(P<0.01);实验组中原始卵泡、初级卵泡和成熟卵泡比较,P450 arom蛋白表达下降(P<0.05).对照组间初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡比较,arom蛋白表达有显著性差异(P<0.05). 结论 P450 arom mRNA在PCOS大鼠卵巢组织中呈低表达P450 atom蛋白在PCOS大鼠卵巢初级卵泡和成熟卵泡中表达下降;PCOS的发生可能与P450 arom在mRNA和蛋白水平的表达下调有关.

  • 三棱丸抑制大鼠异位子宫内膜芳香化酶及环氧合酶-2表达的研究

    作者:李傲;徐晓玉;董伟;汪莹

    目的:探讨三棱丸(SLW)抑制内异症大鼠异位子宫内膜局部雌激素的生成及其作用机制.方法:采用子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,将40只造模造模成功大鼠随机分为5组(n=8):模型对照组,SLW高、中、低剂量组和阿那曲唑组,另设正常对照组.分别灌胃给药4周后,免疫组化和western blot方法检测异位内膜组织中细胞色素P450芳香化酶(P450 arom)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,发光免疫分析法及放射免疫分析法分别检测异位内膜组织雌二醇(E2)及前列腺素E2(PGE2)的含量.结果:SLW各剂量组能有效抑制异位内膜组织中P450 arom的表达,降低其表达产物雌二醇的生成水平,与模型对照组比较,差异显著(P<0.01);SLW高剂量组能降低异位子宫内膜环氧合酶-2的表达,其产物前列腺素E2的水平也明显低于模型对照组(P<0.05).结论:SLW具有良好的抗EMS雌激素生成作用,其作用与抑制P450 arom表达,阻断雌激素生成的正反馈环有关.

  • 邻苯二甲酸二丁酯对大鼠血清雌二醇水平的影响及其机制研究

    作者:朱嘉月;孙增荣;张颖;梁东春

    目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期雌性大鼠雌二醇(E_2)合成的影响及相关机制.方法 将32只21日龄SPF级SD雌性大鼠按体重随机分为对照组(玉米油)和低(250mg/kg)、中(500mg/kg)、高剂量(1 000mg/kg)DBP染毒组,每组8只.采取灌胃方式进行染毒,染毒剂量为5 ml/kg,每天1次,连续灌胃染毒8周.染毒结束后,处死处在动情前期的动物,采用放射免疫法检测血清中E_2的水平,实时荧光定量RT、PCR检测大鼠卵巢甾体激素合成过程中关键酶细胞色素P450芳香化酶(cvtochrome P450 aromatase,P450arom)mRNA表达水平.结果 与对照组比较,中剂量DBP染毒组雌性大鼠体重较高,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,各剂量DBP染毒组雌性大鼠血清中E_2水平和卵巢P450arom mRNA表达水平均升高.差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 DBP可使青春期雌性大鼠血清中E_2水平升高,其作用机制可能与卵巢甾体激素合成过程中的关键酶P450arom mRNA表达升高有关.

  • 细胞色素P450芳香化酶与多囊卵巢综合征

    作者:刘秀兰;闫晓红

    目的:探讨细胞色素P450芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,P450 arom)与多囊卵巢综合征(PCOS)相关性的研究新进展.方法:阅读国内外有关文献并进行综述.结果与结论:细胞色素P450芳香化酶是体内催化雄激素转化为雌激素的限速酶,与PCOS高雄激素血症有关.

  • 益坤宁对围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶的调节作用和血清雌二醇水平的影响

    作者:张广美;刘国艺;安牧尔;张献;刘媛媛;王吏;李桂华;张旸旸

    目的:观察中药益坤宁方对围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶(Aromatase cytochrome P450,P450arom)的调节作用.方法:建立自然衰老的大鼠模型,将模型分为青年对照组、模型组、益坤宁组和西药对照组4组,益坤宁组和西药对照组分别给予中药益坤宁汤剂和西药利维爱混悬液治疗.4周后,采用免疫组织化学及Western Blot方法检测大鼠卵巢P450arom蛋白表达情况;采用放射免疫法测定大鼠空腹血清雌二醇(E2)水平.结果:P450arom蛋白在益坤宁组大鼠卵巢上均多呈阳性表达,与模型组比较均具有显著性差异(P<0.01);与西药对照组比较差异不具有统计学意义(P>0.05).益坤宁组大鼠空腹血清雌二醇(E2)水平升高,与模型组比较差异显著(P<0.01),与西药对照组比较差异不具统计学意义(P>0.05),但其E2水平仍然低于青年对照组,差异具有显著性(P<0.05).结论:中药益坤宁可促进围绝经期大鼠卵巢P450arom蛋白的表达.中药益坤宁可提高大鼠血清雌二醇(E2)的水平.中药益坤宁可通过促进卵巢P450arom的表达而利于雌激素的生成.

  • 中药益坤宁方调节围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶mRNA的实验研究

    作者:张广美;张旸旸;齐群艳;廖希慧

    目的:探讨细胞色素P450芳香化酶(aromatase cytochrome P450,P450arom)mRNA在围绝经期自然老化大鼠卵巢上的表达及意义.方法:选用11~13月龄雌性围绝经期Wistar大鼠32只.随机将其分为模型组、益坤宁组、西药对照组.另选青年大鼠10只,月龄4个月,作为青年对照组,用原位杂交方法检测大鼠卵巢上的P450arom mRNA的表达.结果:P450arom mRNA在模型组卵巢上呈阴性或弱阳性表达,在青年组呈强阳性表达,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).而在益坤宁组及西药对照组均呈阳性表达,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01).结论:中药益坤宁可促进大鼠卵巢P450arom mRNA的表达,有利于雌激素的合成.

  • hUCMSCs移植提高围绝经期大鼠血清雌激素水平的持续时间及对卵巢P450arom表达的影响

    作者:李嘉;尹春艳

    目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)移植提高围绝经期大鼠血清雌激素(E2)水平的持续时间及其对卵巢细胞色素P450芳香化酶(P450arom)表达的影响.方法:阴道脱落细胞涂片法筛选出30只SPF级12~14月龄的围绝经期SD大鼠,随机分为A、B组;同时筛选出15只SPF级3~5月龄具有生育能力的青年雌性SD大鼠,作为C组.B组:尾静脉移植浓度为1×106 cells/ml的hUCMSCs单细胞悬液1ml,隔日1次,共两次;A组:与B组在相同时间相同方式移植等量PBS液;C组:不予处理.于移植前所有大鼠经眼眶采血检测血清E2水平,并于末次移植后14d、21d、28d每组随机选取5只大鼠采血并取双侧卵巢组织,ELISA法检测血清E2水平、免疫组化及Western blot法检测卵巢P450arom表达水平.结果:末次移植后14d、21d、28d,B组大鼠血清E2水平、卵巢P450arom表达与移植前及A组相比均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),B组3个时间段的E2水平、P450arom表达无明显差异(P>0.05).结论:hUCMSCs移植提高围绝经期大鼠血清E2水平可至少持续至移植后28d;hUCMSCs移植可促进围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶表达,是其提高E2水平的可能途径.

  • PPARγ上调对 PCOS 患者卵巢颗粒细胞 P450 arom mRNA 的表达及 T 转化效应的影响

    作者:王碧君;郭艺红;张慧红;李婧;杨新红

    目的:探讨PPARγ上调对PCOS患者卵巢颗粒细胞P450 arom mRNA表达的调控作用及对T转化效应的影响。方法:提取10例雄激素正常的PCOS 患者( NA-PCOS组)、10例伴高雄激素血症的PCOS患者( HA-PCOS组)及10例仅因输卵管因素不孕患者(对照组)的卵巢颗粒细胞,分别给予0、1、10 nmol/L的PPARγ激动剂罗格列酮培养48 h后,采用RT-PCR测定PPARγ、P450 arom mRNA的表达,采用 ELISA法测定培养液中E2值,计算T转化率。结果:PPARγ上调后,3组患者P450arom mRNA 的表达均降低,T转化率下降,尤其是HA-PCOS 组(P<0.05)。 PPARγ上调(10 nmol/L罗格列酮处理)后,HA-PCOS组卵巢颗粒细胞中PPARγmRNA的表达水平和T转化率负相关,P450arom mRNA的表达水平和T转化率正相关(r=-0.633、0.829,P<0.05)。结论:PPARγ可能通过抑制P450 arom参与PCOS高雄激素血症的发生。

  • 补肾化瘀方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450表达的影响

    作者:杨正望;文炯;张增玲

    目的 现察补肾化疼方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞CYP450蛋白表达的影响.方法 运用补肾化瘀方对PCOS模型大鼠进行干预后,采用免疫组化法观察卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达.结果 模型组与正常组比较,卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达在表达面积及表达强度上均低于正常组,差异具有统计学意义(P<0.01);补肾化瘀方中、高、低剂量组及妈富隆组用药后,卵巢颗粒细胞的GYP450的蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);其中补肾化瘀方中荆量对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达效果佳.结论 补肾化瘀方能增强PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达,调节卵巢内分泌失调,改善PCOS高雄血症,逆转卵泡的发育异常,使排卵成功.

  • 丹栀逍遥散防治多囊卵巢综合征模型大鼠的P450arom及ERK通路研究

    作者:刘颖;邢福祺;张丽华;靖林林;孙学刚

    目的:观察丹栀逍遥散(DZXYP)对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的作用及机制.方法:用皮下埋植左旋18-甲基炔诺酮硅胶棒联合皮下注射人绒毛膜促性腺激素的方法诱导PCOS模型,化学发光法检测血清黄体酮(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T),免疫组化检测细胞色素P450芳香化酶(P450arom)的表达,western blotting检测P450arom及细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的活化.结果:DZXYP降低LH(P <0.05)和T(P<0.01)水平,增高FSH水平(P<0.01);增加P450arom的表达,降低ERK 1/2磷酸化.结论:P450arom表达降低是大鼠该PCOS模型发病的因素之一,DZXYP可能通过抑制ERK 1/2磷酸化,增加P450arom表达防治PCOS.

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