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巧用盐附子治疗内科疑难杂症
盐附子是温阳散寒的代表药,所含的主要成分是乌头碱,性味辛甘大热,有毒,近些年来医生出于自我保护和药用安全,使用本品的人巳大大减少.本人有幸师承我县巳故老中医李平章先生,尽得其使用盐附子的经验,用之于临床,受益匪浅.现将几十年临诊所得总结如下,希望医学同仁推而广之.
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复方附子口服液质量标准的研究
目的 建立复方附子口服液(黄芪、盐附子、党参和麦冬)的质量标准.方法 TLC法定性鉴别黄芪、盐附子、党参和麦冬,HPLC-CAD法测定黄芪甲苷和麦冬皂苷D的含有量.结果 在TLC色谱图中,4种药材的斑点清晰,分离度好,阴性无干扰.黄芪甲苷在0.670～6.70 μg的线性范围内线性关系良好(r=0.999 8),加样回收率为97.56％(RSD=1.6％);麦冬皂苷D在0.138 8～1.388 μg的线性范围内线性关系良好(r=0.999 7),加样回收率为96.79％ (RSD=1.9％).结论 该方法准确可靠,专属性好,可用于复方附子口服液的质量控制.
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附子不同炮制品的指纹图谱研究
目的 研究附子3种主要炮制品的高效液相指纹图谱,为建立附子的行业质量标准提供依据.方法 利用高效液相色谱( HPLC)方法,色谱条件为:Alltimate C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；柱温:35℃；流动相40 mmol·L-1醋酸铵(氨水调pH=10.00)-乙腈梯度洗脱；流速1.0ml·min -1；检测波长为240nm.对附子3种炮制品进行指纹图谱研究,采用指纹图谱相似度软件和聚类分析对指纹图谱进行分析.结果 附子3种炮制品之间的指纹图谱差异较大.结论 该方法的精密度、重复性和稳定性良好,可为附子炮制品的质量控制提供依据.
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盐附子遗传毒性研究
[目的]选用目前新药遗传毒性评价中推荐使用的3种试验方法(小鼠骨髓微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、体外CHL细胞染色体畸变试验)研究盐附子的遗传毒性. [方法]小鼠骨髓微核试验设3个盐附子给药剂量组(15.45、7.73、3.86 g生药/kg)、阴性对照组和阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg).Ames试验选用两种方法:直接法和代谢活化法.试验菌株为鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535,盐附子在试验中设6个剂量组(5.000、2.500、1.250、0.625、0313、0.156 mg生药/皿),同时设自发回复突变对照组、阳性对照组.体外CHL细胞染色体畸变试验也选用两种方法:直接法和代谢活化法.盐附子不加S9时处理终浓度为5、2.5、1.25、0.625、0.313 mg生药/ml,加S9时处理终浓度为2.5、1.25、0.625、0.313、0.156 mg生药/ml. [结果]小鼠骨髓微核试验盐附子各剂量组小鼠骨髓多染红细胞微核率与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).Ames试验盐附子在加或不加肝微粒体酶(S9)时均未见引起TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535试验菌株基因突变,即Ames试验阴性,试验重复一次,所得结论相同.体外CHL细胞染色体畸变试验盐附子在加或不加S9时均未引起CHL细胞的染色体畸变,试验结果为阴性,试验重复一次,所得结果相同.[结论]在实验室条件下,盐附子在小鼠骨髓微核试验、Ames试验及体外CHL细胞染色体畸变试验中均为阴性结果,故认为盐附子无遗传毒性.
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盐附子对小鼠的急性神经毒性作用
目的 研究盐附子(SAC)对小鼠神经系统的急性毒性作用.方法 采用小鼠自发活动、爬杆、Morris水迷宫试验,分别设SAC生药7.68、3.84、1.92 g·kg-1剂量组,ig给药,同时设阴性对照和阳性对照组.单次给药后15、60 min用自发活动仪测定小鼠在10 min内自发活动的次数;单次给药30 min后将小鼠放在爬杆架的玻璃棒上,记录小鼠爬杆时间;连续给药4 d,末次给药后30 min进行水迷宫试验,以小鼠找到隐藏平台的时间为逃避潜伏期.结果 SAC高、中、低剂量组的小鼠自发活动次数、爬杆时间、逃避潜伏期与对照组相应指标相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SAC浓度为7.68、3.84、1.92 g·kg-时,未观察到其对小鼠神经系统的急性毒性作用.
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蚁附蠲痹颗粒的薄层色谱鉴别
目的对蚁附蠲痹颗粒中三七、黄芪、黑蚂蚁、盐附子等进行了定性鉴别.方法采用薄层色谱法.结果该法可鉴别出本制剂中的相关药物,阴性无干扰.结论本法专属性强,重复性好,方法灵敏,为蚁附蠲痹颗粒的质量标准提供了实验依据.
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不同加工产地盐附子的指纹图谱研究
目的:研究四川江油地区不同加工产地及时间的盐附子的高效液相色谱指纹图谱,为建立附子的行业质量标准提供依据.方法:利用HPLC方法,色谱条件为:Alltimate C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温是35℃;流动相乙腈-40 mmol·L-1醋酸铵(氨水调pH=10.00)梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1;检测波长为240 nm.对不同主产地的7批盐附子进行研究,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A和聚类分析对指纹图谱进行了分析.结果:从指纹图谱的相似度结果可知,7批盐附子由于加工产地的不同其相似度相差较大,相似度低仅有0.589.结论:该方法精密度 、重复性和稳定性良好,可结合盐附子含量测定用于全面控制附子炮制品(盐附子)的质量.
