首页 > 文献资料
-
胚胎着床前遗传学诊断概况
本综述系统介绍了着床前遗传学诊断(PGD)的研究现状,包括常用方法,如多聚酶链反应、荧光原位杂交及其派生技术;适用范围,如选择极体细胞、早期胚胎细胞、囊胚期细胞;临床应用,如临床筛检遗传异常胚胎来指导试管婴儿工作、研究生殖细胞和早期胚胎的发育过程;以及相关的几个问题,如性别选择、移植胚胎数的选择和诊断的准确性.
-
染色体易位携带者胚胎着床前遗传学诊断的临床分析
目的 分析染色体易位携带者胚胎着床前遗传学诊断的临床结果,探讨不同性别染色体易位携带者临床结果的差异.方法 2013年1月至2015年12月本中心共实施646个染色体易位的胚胎着床前遗传学诊断(PGD)周期.采用比较基因组杂交芯片技术(aCGH)或单核苷酸多态性基因芯片技术(SNP array)对囊胚的滋养层细胞进行24条染色体分析,活检后的囊胚冻存及单囊胚解冻移植.分析易位携带者的异常胚胎比例及不同性别、不同类型染色体易位携带者的PGD临床结果.结果 646个PGD周期中,相互易位携带者的异常胚胎比例(68.15％,1 027/1 507)与罗氏易位携带者(47.91％,448/935)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).相互易位组PGD周期取消移植率(36.23％,150/414)也显著高于罗氏易位组(16.81％,39/232,P＜0.05);但是,相互易位携带者的妊娠率(69.55％,153/220)、活产率(64.41％,76/118)与罗氏易位携带者的妊娠率(72.33％,115/159)、活产率(64.65％,64/99)比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).相互易位组中,男性携带者与女性携带者对异常胚胎率、取消移植率、妊娠率和活产率均无影响(66.91％,69.65％;34.40％,38.27％;69.05％,70.21％;62.50％,67.39％;P＞0.05).罗氏易位组中,男性携带者与女性携带者对取消移植率、妊娠率和活产率均无影响(13.48％,21.98％,75.00％,67.80％;66.15％,61.76％;P＞0.05);但是,男性罗氏易位组的PGD异常胚胎数比例显著低于女性罗氏易位组(40.55％,58.44％;P＜0.05).结论 与罗氏易位相比,PGD中相互易位的可利用胚胎显著降低;但是在移植周期中,二者的妊娠结局无显著差异.不同性别易位携带者对PGD的妊娠结局亦无影响.
-
应用荧光PCR技术对单个体细胞进行多囊肾病的基因诊断
目的 建立单细胞水平的荧光PCR技术,探讨该技术对临床开展着床前遗传学诊断的可行性.方法 分离单个颊黏膜细胞,利用荧光PCR技术扩增微卫星D16S423位点,扩增产物在ABI 3730上电泳,结果用Genemarker软件分析.结果 单个颊黏膜细胞的PCR扩增成功率为93.3%,等位基因脱扣率为10.7%,诊断正确率为89.3%.结论 利用单细胞荧光PCR技术进行着床前遗传学诊断是可行的.
-
女性罗氏易位携带者辅助生育治疗5例临床分析
目的:探讨应用极体分析和分裂球分析法对反复流产的女性罗氏易位携带者进行着床前遗传学诊断(PGD)的临床策略.方法:采用荧光原位杂交(FISH)技术,对5例患者用全染色体涂抹探针检测第一极体和用特异位点探针检测分裂球中相应染色体的荧光信号.5例女性罗氏易位携带者的外周血淋巴细胞染色体核型分别为:45,XX,der(13;14)(q10;q10)3例,45,XX,der(14;21)(q10;q10)、45,XX,der(21;22)(q10;q10)各1例.结果:5例患者中4例获得妊娠并分娩,其中2例经分裂球分析后妊娠,出生3个婴儿:2个正常核型,1个罗氏易位携带者;1例经极体分析诊断后分娩一正常男婴;另1例极体分析未明确诊断又行分裂球分析选择胚胎移植后,出生1个罗氏易位携带者后代.结论:(1)女性罗氏易位携带者PGD应首选极体分析,争取避免携带者出生;(2)极体分析未能得到诊断的胚胎可在分裂球期再次PGD.
-
PGD周期中机械法和激光法活检对胚胎发育及妊娠结局的影响
目的:比较机械法和激光法进行卵裂球和极体活检对胚胎发育及着床前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)周期妊娠结局的影响.方法:本研究包括20对夫妇的21个PGD周期,其中18个周期分别用机械法或激光法于受精后第3天进行卵裂球活检,并用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析检出的卵裂球,于受精后第5或第6天移植信号正常的胚胎;2个周期分别用机械法和激光法在取卵后行极体活检,后行胞浆内单精子注射(introcytoplasmic sperm injection,ICSI).同时将活检取出的极体进行FISH分析,于取卵后第3天移植经FISH检查正常的卵发育而来的胚胎.另外一个周期先用激光法实行了极体活检,由于FISH检查均无信号,后又用激光法对胚胎行卵裂球活检.结果:共活检胚胎145枚,其中109枚用机械法,36枚用激光法.活检后胚胎的继续发育率分别为72.48%和83.33%,囊胚形成率为33.94%和44.44%,临床妊娠率为38.46%和16.67%,着床率为21.43%和8.33%,两种方法无显著差异.对27枚卵行极体活检,其中12枚用机械法,15枚用激光法.活检后2PN受精率分别为58.33%和46.66%,继续发育率为66.67%和60.00%,亦无显著差异.对活检出的极体进行FISH分析,用机械法活检的极体信号阳性率为90.00%,显著高于激光法的28.57%.结论:用机械法和激光法行极体或卵裂球活检对胚胎发育的影响差异无统计学意义.但使用机械法活检卵裂球能获得较高的临床妊娠率和着床率.极体活检时能获得较高的受精率和继续发育率,故推荐使用机械法进行活检.
