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  • 上皮膜蛋白1在实验性糖尿病大鼠模型中额叶皮质血-脑屏障上的表达

    作者:赵文静;许蕾;黄娣;王肖肖;王文远

    目的:测定不同时间点实验性糖尿病大鼠额叶皮质血—脑屏障(BBB)上皮膜蛋白1(EMP1)的表达。方法选成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病组(STZ组)和对照组(CON组),每组分为2w、4w、8w3个亚组,采用免疫组织化学法检测EMP1的表达。结果STZ大鼠与CON大鼠比较,4w组中STZ大鼠上EMP1的表达显著增多(P<0.01),2w组和8w组中差异无统计学意义;EMP1的表达在STZ大鼠各亚组之间及CON大鼠各亚组之间比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论 EMP1在实验性糖尿病大鼠额叶皮质BBB上的表达改变,在模型建立成功后4w时表达显著增加。

  • EMP1、EGF和NRG3在鼻息肉中的表达水平及糖皮质激素的影响

    作者:缑丽军

    目的 探讨上皮膜蛋白1(EMP1)、表皮生长因子(EGF)、神经调节蛋白3(NRG3)在鼻息肉中的表达水平及糖皮质激素对其表达的影响.方法 鼻息肉组织标本取自于40例鼻息肉病例.选择30例因鼻中隔偏曲接受鼻内镜手术的病例的下鼻甲黏膜组织作为对照组.40例鼻息肉病例中,伴重度上皮增生14例,伴轻中度上皮增生26例;伴鳞状上皮化生12例,不伴鳞状上皮化生28例.采用实时荧光定量技术(qRT-PCR)、免疫组化方法检测EMP1、EGF和NRG3的表达水平.结果 鼻息肉组组织中EMP1、EGF、NRG3 mRNA的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).鼻息肉组组织中EMP1、EGF、NRG3的表达阳性率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).伴有重度上皮增生鼻息肉组织中EMP1、EGF、NRG3 mRNA的表达水平均低于伴有轻中度上皮增生鼻息肉组织,差异有统计学意义(P<0.05).伴有鳞状上皮化生鼻息肉组织中EMP1、EGF、NRG3 mRNA的表达水平均低于不伴有鳞状上皮化生鼻息内组织,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,鼻息肉组织中EMP1、EGF、NRG3mRNA的表达水平均较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,鼻息肉组织中EMP1、EGF、NRG3的表达阳性率均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05).治疗前鼻息肉组织中EMP1与EGF、NRG3的mRNA表达水平均呈正比(r =0.367,P=0.014,r=0.352,P=0.019),EGF、NRG3的mRNA表达水平呈正比(r=0.361,P=0.016);治疗后鼻息肉组织中EMP1与EGF、NRG3的mRNA表达水平均呈正比(r=0.356,P=0.026,r=0.341,P =0.029),EGF、NRG3的mRNA表达水平呈正比(r=0.350,P=0.027).结论 EMP1、EGF和NRG3在鼻息肉发病及上皮损伤、修复过程中起重要作用.糖皮质激素可通过上调EMP1、EGF和NRG3的表达在鼻息肉的上皮损伤和修复中起积极作用.

  • 过表达上皮膜蛋白1对结直肠癌SW-480细胞生物学行为的影响及其可能的机制

    作者:孙国贵;刘青;杨从容;张钧

    目的:探讨上皮膜蛋白1(epithelial membrane protejn-1,EMP1)在人结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)组织中的表达水平及其过表达对CRC SW480细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:免疫组织化学、Western blotting方法检测63例CRC组织及31例癌旁组织中EMP1的表达水平,分析EMP1表达与CRC临床病理参数的关系.慢病毒介导将pLenti6-EMP1质粒转染SW-480细胞,建立EMP1过表达细胞,转染plenti6/V5-DEST空白质粒为对照.Real-time PCR及Western blotting检测转染后SW-480细胞株中EMP1的表达,MTF、流式细胞术及Transwell实验分别检测EMP1过表达对SW-480细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.结果:EMP1蛋白在人CRC组织的表达显著低于癌旁组织(0.257±0.022 vs0.863±0.086,P<0.05),并且其表达水平在不同T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及组织分级组间表达有显著差异(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05).成功构建EMP1过表达的LeEMP1细胞.与LeEmpty细胞相比,LeEMP1细胞的增殖能力显著下降[(60.94±4.04)% vs (100.00±0.00)%,P<0.05],凋亡率显著升高[(12.10±1.30)% vs (3.10±0.60)%,P<0.05]、侵袭转移能力显著降低[穿膜细胞数:(87.00± 12.00)vs (178.00 ±21.00)个,P<0.05].LeEMP1细胞Caspase-9表达显著高于LeEmpty细胞(0.764±0.073 vs0.231±0.029,P<0.05),VEGFC表达显著降低(0.185±0.022 vs0.663±0.065,P <0.05).结论:人CRC组织中EMP1蛋白表达明显减低,过表达EMP1能够抑制CRC SW-480细胞的恶性生物学行为,其可能通过调控Caspase-9和VEGFC的表达来发挥作用.

  • 上皮膜蛋白1的研究进展

    作者:王妍亭;韩娟;刘进衡

    上皮膜蛋白1(EMP1)属跨膜蛋白家族亚组,分布于人体多种组织,在细胞的生长、增殖、分化、凋亡中具有重要的调节功能.并与肿瘤的发生、进展相关.EMP1可望成为新的生物学标记,为肿瘤的筛查、判断病情严重程度以及指导治疗提供一条可行的途径.

  • C-myc及上皮膜蛋白1在脑胶质瘤中的表达

    作者:杨聪颖;刘新丽;陈昊;王红霞;张春芳;孙维烨;刘毅;齐冬雪;刘华;李爱民

    目的 探讨C-myc及上皮膜蛋白1(EMP1)在脑胶质瘤中的表达并分析两者表达的相关性.方法 选取脑胶质细胞瘤65例为观察组,术前未做其他治疗,并以尸检标本正常脑组织15例为对照组.应用免疫组织化学方法检测C-myc和EMP1蛋白在两组中的表达,分析两者与不同组织学级别脑胶质瘤的相关性及两者之间的关联性.结果 C-myc和EMP1在胶质瘤中的阳性表达率明显高于正常脑组织(P<0.05);C-myc和EMP1蛋白表达与肿瘤病理组织学分级相关,且随胶质瘤恶性程度的上升而增高(P<0.05);Pearson相关分析结果显示胶质瘤组织中C-myc与EMP1蛋白表达呈显著正相关(r=0.957,P=0.043).结论 C-myc与EMP1在人脑胶质瘤中显著高表达,两者表达呈明显正相关,并且与胶质瘤的恶性程度密切相关.

  • 上皮膜蛋白1真核表达载体的构建及其对人舌鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

    作者:代晓华;张军;邹慧儒;连小丽;李燕妮;王冠华;颜艳

    目的:构建上皮膜蛋白1(EMP1)基因真核表达载体pEGFP-N1-EMP1,探讨EMP1基因对人舌鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用逆转录聚合酶链式反应(PCR)扩增EMP1基因,双酶切法连接至真核表达载体pEGFP-N1双酶切产物大片段,构建pEGFP-N1-EMP1重组质粒。经测序鉴定后,通过脂质体介导法将pEGFP-N1-EMP1重组质粒和pEGFP-N1空载体转染至人舌鳞状细胞癌Tb3.1细胞,荧光显微镜下观察转染后绿色荧光蛋白的表达情况,实时荧光定量PCR法检测转染后24、48、72 h的EMP1过表达水平。利用Transwell迁移及侵袭实验分析EMP1过表达对Tb3.1细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功克隆EMP1全长基因,经测序分析证实将EMP1基因准确插入真核表达载体pEGFP-N1,转染后细胞可见绿色荧光表达。实时荧光定量PCR结果显示,pEGFP-N1-EMP1重组质粒转染24 h组,Tb3.1细胞中EMP1表达量显著高于pEGFP-N1空载体组、野生型细胞组以及重组质粒转染48 h和72 h组。Transwell迁移及侵袭实验结果显示,EMP1过表达抑制了Tb3.1细胞的迁移和侵袭能力。结论成功构建了EMP1真核表达载体,并在体外证实了EMP1过表达可抑制舌鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭能力,为进一步研究EMP1基因在口腔鳞状细胞癌转移中的作用及其分子机制奠定了基础。

  • 鼻咽癌中EMP1蛋白的表达及其临床意义

    作者:孙国贵;付占昭;杨从容;李成林;胡万宁

    目的:探讨上皮膜蛋白1(EMP1)在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法和Western blot检测75例鼻咽癌组织及距癌组织边缘2 cm以上的镜下未见癌浸润的正常鼻咽组织中EMP1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理指标的关系。结果:免疫组织化学结果表明,EMP1蛋白在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中的表达阳性率分别为33.3%和74.2%,前者显著低于后者(P<0.05)。Western blot结果表明,EMP1蛋白在鼻咽癌组织的相对表达量较正常鼻咽组织明显降低(<0.05)。EMP1蛋白表达与鼻咽癌T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及细胞分化程度有关(P<0.05)。结论:EMP1低表达可能促进了鼻咽癌的发病过程,在鼻咽癌的发生发展过程中具有重要作用。

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