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  • 不同季节洱海沉积物硫酸盐还原菌类群与含量及分布变化

    作者:王明义;梁小兵;郑娅萍;赵由之;张伟;魏中青

    目的 分析洱海沉积物硫酸盐还原菌类群与含量和分布的变化,为研究该区域环境污染物迁移转化提供相应的生物学信息.方法 分别采用PCR和荧光原位杂交法分析洱海沉积物硫酸盐还原菌类群和含量.结果 春、秋季节洱海沉积物中共检出脱硫肠菌属、脱硫叶菌属、脱硫球菌属-脱硫线菌属-脱硫八叠菌属和脱硫弧菌属-脱硫微菌属4个类群的硫酸盐还原菌,其中脱硫弧菌-脱硫微菌属只在秋季沉积物中检出;春季的硫酸盐还原菌为(0.19±0.25)×104个·g-1,从悬浮层至18 cm深度均有检出;而秋季为(9.95±12.21)×104个·g-1,从悬浮层至26cm深度均有检出,二者差异有统计学意义(P<0.01).结论 洱海沉积物硫酸盐还原菌类群较为丰富,脱硫弧菌属一脱硫微菌属在春季沉积物中可能为不可育状态;硫酸盐还原菌类群分布复杂,每一类群均具有季节和分布的差异和优势性;秋季含量显著高于春季且分布更深;洱海沉积物中可能存在硫酸盐还原菌6个类群以外的硫酸盐还原菌.

  • 重度肥胖症患者膳食干预前后肠道内硫酸盐还原菌的定量检测

    作者:殷晓晨;费娜;肖水明;申剑;赵立平;庞小燕

    目的 检测重度肥胖症患者膳食干预过程中,肠道内硫酸盐还原菌( SRB)的数量变化,为进一步研究SRB与肥胖的关系提供参考.方法 以SRB基因组中的重要功能基因-腺苷酰硫酸(APS)还原酶基因作为指示基因,通过实时定量PCR的方法检测了12名重度肥胖症患者在进行膳食干预过程中随着体重的降低,肠道内SRB的数量变化,同时以16S rRNA基因对肠道内总菌进行定量来计算SRB占总菌的相对比例.结果 膳食干预过程中,随着患者体重的显著降低,其肠道内SRB占总菌的比例也显著下降.在维持期,患者体重仍和干预前有显著差异,但较干预期有所回升;其体内SRB含量也显著低于干预前,但相比干预期,有所上升.结论 研究结果提示肠道菌群中SRB细菌与肥胖的发展有密切关系,为后续研究SRB细菌的功能和作用机理奠定了基础.

  • 高脂饲料诱导的肥胖大鼠肠道内硫酸盐还原菌的定量检测

    作者:冯雨佳;张旭;刘辰雷;殷晓晨;赵立平;陈峰;庞小燕

    目的 检测高脂饲料诱导大鼠肥胖过程中,大鼠肠道内硫酸盐还原菌( sulfate-reducing bacteria,SRB)的数量变化,为研究SRB与肥胖的关系提供参考.方法 20只Wistar大鼠随机分为2组(每组10只),一组饲喂高脂饲料(HFD组)18周,另一组饲喂正常饲料(NCD组,即对照组)18周.以编码腺苷酰硫酸还原酶α亚基的基因(aprA)作为分子标记,通过荧光定量PCR的方法检测两组大鼠在0、8和18周,肠道内SRB的数量变化;同时,以16S rRNA基因作为标记基因定量大鼠肠道内总菌的数量,以计算肠道内SRB在总菌中的比例变化.结果 分组饲喂8周后,高脂饲料饲喂组大鼠的体重与正常饲料组相比显著升高.对SRB的定量结果显示,饲喂8周和18周,高脂饲料组大鼠肠道内SRB的数量和含量与正常饲料组相比显著升高.结论 大鼠肠道中的硫酸盐还原菌与饮食诱导的肥胖密切相关,为进一步研究SRB在肥胖及其相关代谢疾病的发生发展中的作用提供了依据.

  • 一种肠道硫酸盐还原菌的增菌培养基

    作者:陈坤;赵宇峰;冯雨佳;刘辰雷;李学明;赵立平;庞小燕

    目的 针对已经分离、纯化的肠道硫酸盐还原菌,建立一种能快速、高效地培养菌体的培养基.方法 比较营养丰富的GAM肉汤与常用于培养硫酸盐还原菌的选择性培养基Postgate的培养效果,摸索在GAM肉汤中添加不同浓度的硫酸盐对两种肠道硫酸盐还原菌-Desulfovibrio desulfuricans和Desulfovibrio intestinalis的培养效果.确定效果佳的改良GAM培养基配方,并测定在该培养基中D.desulfuricans的生长曲线.结果 与Postgate培养基相比,GAM肉汤能在2d内快速培养D.desulfuricans,但培养至6d时细菌数量大幅降低.在GAM肉汤中添加Na2SO4与FeSO4,在实验浓度范围内,均显著地促进硫酸盐还原菌的生长.在此基础上改良GAM肉汤培养基,培养得到的细菌数量较GAM肉汤显著提高.D.desulfuricans的生长曲线显示,2d时细菌生长达到高峰,数量可达3.5×107 CFU/mL;培养6d,细菌数量为7.3×106 CFU/mL.结论 基于GAM肉汤改良而得到的增菌培养基,能快速、高效地培养肠道硫酸盐还原菌,为后续进一步研究肠道硫酸盐还原菌的生理功能提供了支持.

  • 肠道硫酸盐还原菌DGGE分析技术的建立

    作者:刘辰雷;殷晓晨;龙文敏;费娜;赵立平;庞小燕

    目的 建立分析肠道内硫酸盐还原菌(Sulfate-reducing bacteria,SRB)组成的变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术,并用于分析10例健康人粪便样品中的SRB组成.方法 从GenBank中下载13株脱硫弧菌科细菌的腺苷酰硫酸还原酶α亚基基因(aprA)的序列,利用Clustal X、Simulated PCR (SPCR)软件比较、评估了2对针对aprA 基因的引物(AprA-3-FW/APS-RV和AprA-1-FW/AprA-5-RV)用于扩增粪便样品中的SRB的特异性.确定PCR引物和条件,进一步摸索并建立DGGE分析体系.结果 Clustal X和SPCR软件分析的结果均表明引物AprA-3-FW/APS-RV优于AprA-1-FW/AprA-5-RV.实际PCR的结果也显示AprA-1-FW/AprA-5-RV扩增效率低并有非特异扩增.建立DGGE体系,对10例健康人肠道中SRB的分析显示,每个个体肠道中SRB的种类有l到5种不等.结论 基于aprA序列的DGGE技术是分析肠道SRB组成的有效方法.

  • 硫酸盐还原菌的培养及检测方法的研究进展

    作者:王丹;贾贞;游松

    目的 综述硫酸盐还原菌的培养及其检测方法的研究进展.方法 在查阅国内外文献的基础上,以其中的26篇文献为依据,对硫酸盐还原菌的培养及检测方法进行分析和归纳.结果 与结论 由于硫酸盐还原菌自身的特点,尤其在制药等行业废水治理方面的优势,硫酸盐还原菌的研究已引起人们的广泛关注.通过综述硫酸盐还原菌的培养方法及其检测技术,为该菌的进一步研究打下了基础.

  • 硫酸盐还原菌类群分离培养和PCR分析鉴定

    作者:王明义;梁小兵;郑娅萍;魏中青;赵由之

    [目的]探讨分离培养和聚合酶链反应(PCR)在硫酸盐还原菌类群分析鉴定中的应用. [方法]采用分离培养和PCR对贵州阿哈湖沉积物中硫酸盐还原菌类群进行分析,并对分离纯化的一株硫酸盐还原菌进行鉴定. [结果]贵州阿哈湖沉积物硫酸盐还原菌类群为脱硫肠菌属、脱硫叶菌属和脱硫球菌-脱硫线菌-脱硫八叠菌属;纯化菌株经PCR扩增初步鉴定为脱硫叶菌属,菌株形态与鉴定结果相符. [结论]采用分离培养结合PCR,可以对硫酸盐还原菌类群进行分析和鉴定.

  • 飞机燃料的微生物

    作者:赵升红

    微生物在喷气燃料中的生长繁殖微生物能借助风力四处传播,一旦遇到油水共处的适宜条件,即在油水界面迅速生长繁殖.喷气燃料在运输、储存和使用过程中,不可避免地要接触到各种水,水中的各种能降解烃的微生物就有机会进入到油中.现已查明鉴定的喷气燃料中的微生物有200多种,其中危害大的为树脂牙枝霉和硫酸盐还原菌两种.

  • 硫酸盐还原菌与人类健康研究进展

    作者:迟立巍;张启波;马圣君

    硫酸盐还原细菌(sulfate-reducing bacteria, SRB)是指能把硫酸盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等硫氧化物或元素硫还原成硫化氢的一类细菌的统称[1]。SRB按其生理特性主要分为四类:革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、嗜热古菌和嗜热细菌[2]。它可以在5-75℃、pH 5-9.5的范围内生存[1],并广泛分布于海水、水底沉积物、油井、天然气井、土壤、火山灰以及动物肠道等厌氧环境中。

  • 荧光原位杂交法在检测硫酸盐还原菌中的应用

    作者:王明义;袁晓燕;宋雪珍;刘海珠;张伟

    目的 探讨荧光原位杂交法在检测淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌检测中的应用.方法 建立荧光原位杂交方法 并应用该法进行洱海沉积物硫酸盐还原菌含量分析,所用寡核酸苷酸探针为依据硫酸盐还原菌16SrRNA特异性区域而设计的SRB385.结果 荧光显微镜下标本中可见发特异性红色荧光的硫酸盐还原菌菌体.经荧光原为杂交分析,洱海沉积物前18cm硫酸盐还原菌含量为(0.08-8.50)×103个/g,平均为(1.91±2.51)×103个/g.硫酸盐还原菌含量在空间分布上表现为悬浮层、5和8cm深度有较小谷值,3、6和11cm深度有较高的峰值,其中11cm深度形成的峰较宽.结论 荧光原位杂交法具有快速准确、检测信号强、杂交特异性高的特点,可以进行淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌含量的检测.洱海沉积物硫酸盐还原茵含量丰富且不同深度的沉积物中硫酸盐还原菌含量分布是不均一的.

  • 洱海沉积物硫循环相关微生物群落结构

    作者:王明义;梁小兵;郑娅萍;魏中青;赵由之

    [目的]分析洱海沉积物硫循环相关微生物群落多样性和空闻分布特点. [方法]倾注平板计数法分析洱海沉积物硫酸盐还原菌和硫氧化细菌数量;PCR分析硫酸盐还原菌类群.[结果]洱海沉积物硫酸盐还原菌和硫氧化细菌数量的空间分布规律相一致;沉积物中检出3个硫酸盐还原菌类群,脱硫叶菌属广泛分布于各层,脱硫肠菌属分布于深层而脱硫球菌-脱硫线菌-脱硫八叠菌属则分布于较浅层. [结论]洱海沉积物硫循环相关微生物群落组成复杂.

  • 氨基磺酸除垢剂致硫化氢中毒的法医化学探讨

    作者:袁慧雅;刘俊亭;徐恩宇;高利娜;张国华

    目的 研究中毒死亡现场中的硫化氢来源.方法 本文针对一例氨基磺酸使用中的意外中毒死亡事故,概述了氨基磺酸的物理化学性质,测定了生物样品中的氨基磺酸和硫化氢.结果 死亡者心血中硫离子浓度为3.5 μg/mL,提出了硫化氢的中毒来源,即氨基磺酸在硫酸盐还原菌作用下生成硫化氢,以及与硫化亚铁作用生成硫化氢而导致中毒.结论 提示氨基磺酸作为除垢剂具有潜在安全隐患.本文对于判定和预防硫化氢中毒具有实际意义.

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