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Ni2+亲和胶的制备及其对带His6标签融合蛋白的纯化
目的:制备Ni2+亲和胶,并检测其纯化带His6标签融合蛋白的效果.方法:在强碱条件下,用环氧氯丙烷活化Sepharose 4B后,接上多个IDA臂,将Ni2+连接在IDA臂上,即为亲和胶成品.用亲和胶分别在变性和非变性的条件下,纯化包涵体和可溶性表达的带His6标签的人TRF1 和人tankyrase的PARP结构域,并通过Western印迹鉴定纯化的靶蛋白.结果:用自制的Ni2+亲和胶可以获得SDS-PAGE单一条带的目的蛋白,并得到Western印迹的鉴定.结论:自制的Ni2+亲和胶对带His6标签融合蛋白的纯化能力与商品胶完全等同,但价格低廉.
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镍钛合金表面钛、钛铌涂层防止Ni2+析出实验研究
目的:探讨镍钛记忆合金(以下简称NiTi)及表面钛、钛铌合金涂层后Ni2+在体内、外试验中的析出情况.方法:体外采用生理盐水浸泡试验,于试验后1～7 d采样,石墨炉原子吸收仪(GFAAS)法测定各组生理盐水中Ni2+浓度.体内试验选取成年犬18只,分别于骶棘肌和股骨内植入立方体和圆柱型植入体各10枚,12个月后处死取材,采用GFAAS分别检测心、肝、脾等组织的Ni2+含量.结果:表面未经钛、钛铌涂层修饰的NiTi Ni2+有明显析出,以前4 d为主,其吸出率(10-7μg·cm-2·s-1)分别为18.2、3.45、1.75和0.45,第5 d后Ni2+无明显析出.经钛、钛铌修饰后Ni2+无明显析出.该实验的样品回收率为94.6%～108.6%.体内非修饰的NiTi组植入体周围的骨组织和肌肉组织的Ni2+含量与同组同种组织、异组同种组织的Ni2+含量有显著差异(P＜0.05).结论:体内、外试验的结果均表明,钛、钛铌涂层修饰起到了防止或减少Ni2+吸出作用.
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镍对大鼠肝细胞内离子和线粒体含量的影响
目的探讨镍对大鼠肝细胞内[Ca2+]、[Mg2+]、[Ni2+]、[Na+]、[H+]和线粒体含量的影响.方法健康Wistar大鼠腹腔注射硫酸镍1.25,2.5,5 mg/kg染毒,1次/d,连续21 d.染毒结束次日激光扫描共聚焦显微术测定肝细胞内离子浓度和线粒体含量.结果染毒组动物肝细胞内[Ca2+]、[Ni2+]、[Na+]、[H+]均增加,[Mg2+]和线粒体含量下降.结论 NiSO4染毒可造成肝细胞内离子浓度和线粒体含量的改变.
关键词： 硫酸镍 激光扫描共聚焦显微镜 线粒体 Ca2+ Ni2+ -
钛、钛铌涂层修饰对防止镍钛合金Ni2+析出的影响
[目的]探讨镍钛合金及表面钛、钛铌涂层修饰后对Ni2+析出的影响.[方法]采用生理盐水浸泡试验,实验后的l～7 d采样,低温灰化炉灰化,以Mg(NO3)2为基体改进剂,石墨炉原子吸收法测定各组生理盐水中Ni2+浓度.[结果]表面未经钛、钛铌涂层修饰的NiTi在37℃恒温箱中Ni2+有明显析出,以前4 d为主,其吸出率(10-7μg.cm-2·s-1)分别为18.20、3.45、1.75和0.45,第5 d后Ni2+无明显析出.经钛、钛铌修饰后Ni2+无明显析出.该实验的样品回收率为94.6%～108.6%.[结论]钛、钛铌涂层修饰起到了防止Ni2+析出作用.
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镍钛合金钛与钛铌涂层防止Ni2+析出的体内实验研究
[目的]探讨镍钛合金(NiTi)表面金属钛(Ti)、钛铌合金(TiNb)涂层后对Ni2+析出的影响.[方法]成年犬18只,随机分为4组,NiTi组、Ti涂层组、TiNb涂层组各5只,空白组3只,分别于骶棘肌内和股骨内植入立方体试件和圆柱型试件各10枚,12个月后处死取材,用石墨炉原子吸收仪分别检测心、肝、脾,肺、肾、脑、骨、鼻咽粘膜、血液、肌肉、试件周围的骨组织和肌肉组织的Nit2+含量.[结果]非修饰的NiTi组试件周围的骨组织和肌肉组织的Ni2+含量与同组同种组织、异组同种组织的Ni2+含量有显著差异(P<0.05).[结论]本试验初步证明,NiTi表面金属钛、钛铌合金涂层起到了防止Ni2+析出的作用.
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Ni2+-Cd2+联合染毒大鼠睾丸支持细胞和生精细胞的体视学分析
目的:应用体视学方法定量分析Ni2+、Cd2+对大鼠睾丸支持细胞和生精细胞的影响.方法:63只雄性SD大鼠随机均分为21组,每组3只,实验试剂CdCl2和NiSO4通过腹腔注射给药,对照组(A1、A2、A3),以等量生理盐水代替,实验组分为急性染毒组、染毒2月组、染毒4月组(B1～G1,B2～G2,B3～G3),每天给药的质量分数分别为:B1、B2、B3组∶2.9 mg/kg Cd2+,C1、C2、C3组∶5.8 mg/kg Cd2+,D1、D2、D3组∶5 mg/kg Ni2+,E1、E2、E3组∶50mg/kg Ni2+,F1、F2、F3组∶2.9 mg/kg Cd2+5 mg/kg Ni2+,G1、G2、G3组∶5.8 mg/kg Cd2+ 50 mg/kg Ni2+.组织学切片观察,病理附值评分,采用体视学图像分析方法对各组大鼠睾丸细胞进行定量分析.结果:与对照组比较,G1组、F1组、G2组附值评分显著升高(P＜0.05);B1～G,组粗线期精母细胞与支持细胞的平均细胞比率显著减小(P＜0.05);急性染毒B1组、D1组支持细胞体密度和截面密度,C1组、D1组数密度均高于对照组(P＜0.05),而C1～G1组生精细胞体密度低于对照组(P＜0.01);染毒2月G2组支持细胞的体密度和截面密度显著增加,生精细胞的体密度显著降低(P＜0.01);染毒4月G3组支持细胞的体密度、截面密度均显著下降(P＜0.01).结论:Ni2+、Cd2+染毒可能引起睾丸支持细胞损伤但数量无显著改变,生精细胞数量显著减少,可能导致精子发生障碍.
