胡黄连提取物在缺血再灌注肾损伤中的防治作用

目的研究急性缺血再灌注肾损伤(I/R)的机制及胡黄连提取物对I/R的防治作用.方法雄性SD大鼠37只,分为假手术组(5只)、手术对照组(8只)、不同剂量(40、80、160mg/kg)胡黄连提取物给药组(各8只),采用切除右肾后,用无创动脉夹夹闭左肾动脉60min再灌注72h的方法制备急性缺血再灌注肾损伤大鼠模型,测定血肌酐、尿肌酐,结合尿量计算肌酐清除率(Ccr),光镜、电镜观察肾组织形态学并进行肾小管计分,硫代巴比妥酸比色法测定血清丙二醛(MDA),改良DTNB显色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果肾脏I/R损伤时大鼠肾功能明显减退,肾脏病理变化明显,血清MDA、TNF-α升高,GPx下降;与手术对照组相比,各胡黄连提取物给药组肾小管计分降低(P＜0.01或P＜0.05),血清MDA降低(P＜0.01或P＜0.05),TNF-α降低(P＜0.05),GPx含量升高(P＜0.01),胡黄连提取物80mg/kg给药组和160mg/kg给药组Ccr升高(P＜0.01).结论胡黄连提取物可以减轻急性缺血再灌注肾损伤,促进肾功能恢复,此作用可能与其抗氧化、抑制炎症反应有关.

缺氧复氧后肾小管上皮细胞肿瘤坏死因子α的表达及胡黄连提取物对其的作用

目的 观察缺氧复氧后肾小管上皮细胞肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达及胡黄连提取物对其的影响.方法 建立人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤模型,分别用不同浓度胡黄连提取物(10 μg/mL、100 μg/mL、1 000 μg/mL)进行预处理,采用流式细胞术检测不同组细胞内氧化应激水平,ELISA法检测细胞上清TNFα蛋白表达、RT-PCR法测定细胞TNFα mRNA表达.结果 缺氧复氧后肾小管上皮细胞内氧化应激水平提高,细胞TNFα蛋白和mRNA表达上调,且随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高,TNFα表达逐渐增强;胡黄连提取物呈剂量关系抑制细胞内氧化应激水平,同时呈剂量关系抑制TNFα表达的上调.结论 缺氧复氧导致肾小管上皮细胞内氧化应激增强,进而诱导TNFα表达上调;胡黄连提取物可以通过抑制细胞内氧化应激抑制TNFα的上调.

胡黄连提取物picroliv和水飞蓟素对黄曲霉毒素B1引起的大鼠肝毒性的治疗作用/茜草科植物Palicourea condensata中新的抗HIV大环肽/菲律宾Lobophytum属软珊瑚中抑制HIV的西柏烷衍生物

胡黄连提取物对小鼠移植性肿瘤及化学致癌的作用/贯叶金丝桃提取物的生化活性

缺氧复氧后肾小管上皮细胞黏附分子1的表达及胡黄连提取物对其的作用

目的:观察缺氧复氧后肾小管上皮细胞细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达及胡黄连提取物对其的影响.方法:建立人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤模型,分别用不同浓度胡黄连提取物(10 μg/ml、100 μg/ml、1 000 μg/ml)进行预干预,采用流式细胞术不同组细胞内氧化应激水平,流式细胞术检测细胞ICAM-1蛋白表达,RT-PCR法测定细胞ICAM-1 mRNA表达.结果:正常情况下肾小管上皮细胞氧化应激水平极低,缺氧复氧后肾小管上皮细胞内氧化应激水平明显升高,细胞ICAM-1蛋白和mRNA表达上调,且随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高(P＜0.05),ICAM-1表达逐渐增强(P＜0.05);胡黄连提取物呈剂量关系抑制细胞内氧化应激水平(P＜0.05),同时呈剂量关系抑制ICAM-1表达的上调(P＜0.05).结论:缺氧复氧导致肾小管上皮细胞内氧化应激增强,进而诱导ICAM-1表达上调;胡黄连提取物可以通过抑制细胞内氧化应激抑制ICAM-1的上调.

胡黄连提取物的含量测定及其肝保护作用

目的:建立胡黄连提取物(AP)中胡黄连苦苷Ⅰ、Ⅱ的含量测定方法并研究其对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用.方法:采用HPLC测定AP中胡黄连苦苷Ⅰ、Ⅱ的含量,流动相为甲醇-水(42∶58),流速为1.0mL·min-1,检测波长为267nm;腹腔注射四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝脏指数.结果:胡黄连苦苷Ⅰ、Ⅱ的线性范围分别为50～600μg·mL-1,r=0.9999和50～500μg/mL,r=0.9999,平均回收率分别为107.78%,RSD=8.86%和103.62%,RSD=3.93%;小鼠连续5天灌胃给予AP 15.0、30.0、60.0mg·(kg·d)-1及静脉注射给予AP 15.0、30.0mg·(kg·d)-1能明显抑制肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高(P<0.01),减轻增加的肝脏重量指数(P<0.05).结论:该含量测定方法准确可靠,适合于测定AP中胡黄连苦苷Ⅰ、Ⅱ的含量;AP对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用.

胡黄连提取物对四氯化碳或半乳糖胺损伤的原代培养大鼠肝实质细胞的作用

为研究胡黄连提取物对四氯化碳( CCl4)或半乳糖胺 (D-GaIN) 损伤原代培养大鼠肝实质细胞的保护作用.半原位酶分离法分离大鼠肝细胞,利用 CCl4或 D-GaIN 引起原代培养大鼠肝实质细胞损伤模型,以培养液中谷丙转氨酶(ALT)活性变化为指标,并采用 MTT 法对细胞活性和增殖进行检测.结果:胡黄连提取物能够增强受损肝细胞的活性和增殖能力,但不能显著降低 CCl4或 D-GaIN 肝损伤模型 ALT 活性.

胡黄连提取物对大鼠脑缺血再灌注后半暗带区细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的:研究胡黄连提取物对脑缺血再灌注半暗带神经细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法:Wister大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和治疗组.利用流式细胞仪分别观察缺血1.5 h再灌注用药5 d后半暗带神经细胞凋亡及相关基因bcl-2蛋白表达.结果:与模型组比较,胡黄连组缺血半暗带凋亡细胞百分数明显降低(P＜0.05),bcl-2蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论:胡黄连提取物可能通过促进bcl-2基因的表达,对脑缺血再灌注模型半暗带的细胞凋亡产生抑制作用.

胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏黏附分子表达的影响

目的 研究胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏细胞黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达的影响.方法 雄性SD大鼠分为假手术组、手术对照组、胡黄连提取物不同剂量给药组,采用切除右肾无创动脉夹夹闭左肾动脉60 min再灌注72 h的方法制备急性缺血再灌注(I/R)肾损伤大鼠模型,生化法测定血清肌酐、尿肌酐,并结合尿量计算内生肌酐清除率(Ccr),光镜电镜观察肾组织病理变化并肾小管计分,免疫组化观察肾脏ICAM-1,MCP-1的表达,实时定量荧光RT-PCR测定肾组织ICAM-1,MCP-1 mRNA表达.结果 肾脏I/R损伤时大鼠Ccr明显降低,肾脏病理变化明显,肾脏ICAM-1,MCP-1表达明显,肾组织ICAM-1,MCP-1 mR-NA表达增加;与手术对照组相比,各胡黄连提取物组肾脏ICAM-1,MCP-1表达减弱,肾组织ICAM-1,MCP-1mRNA表达降低,肾小管计分降低,Ccr升高.结论 胡黄连提取物可以抑制缺血再灌注损伤后肾脏ICAM-1,MCP-1表达,改善肾功能.

顶空毛细管气相色谱法测定胡黄连提取物中大孔树脂残留物

目的 建立胡黄连提取物中苯乙烯骨架型大孔吸附树脂残留物的测定方法.方法 胡黄连提取物加DMF-水混合溶剂溶解后,在80℃下平衡40 min,采用顶空进样方式,用毛细管气相色谱法测定大孔树脂的残留物.结果 7种残留物的峰面积与浓度的线性关系良好,r均大于0.9995,回收率均大于85%,连续5次进样的RSD＜5%,检测限为(0.2～1.3)×10-5%.结论 该方法适用于苯乙烯骨架型大孔吸附树脂残留物的测定.