APP5肽类似物165对老年性痴呆模型大鼠行为学及PSD95和Shank 1表达的影响

目的 观察5肽类似物165对老年性痴呆(Alzheimer disease,AD)模型大鼠学习记忆能力及突触后致密区蛋白95(postsynaptic density95,PSD95)和骨架蛋白Shank 1表达的影响.方法 将45只大鼠随机分为正常对照组、模型组和5肽类似物165治疗组,模型组和治疗组大鼠按体重3 mg/kg行双侧侧脑室链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 注射,第3天重复注射建立AD模型,对照组以人工脑脊液代替STZ.术后21 d治疗组按体重0.34 mg/(kg·d)给予APP5肽类似物165灌胃干预,其余两组以蒸馏水代替.3周后应用Morris水迷宫、免疫组织化学和Western blotting方法 检测大鼠的学习记忆能力及PSD95和Shank 1的表达.结果 5肽类似物165治疗组大鼠的平均游泳时间较模型组明显缩短(P＜0.01),且海马PSD95和Shank 1阳性神经细胞数及PSD95和Shank1蛋白表达较模型组明显增加(P＜0.05).结论 5肽类似物165可显著提高大鼠学习记忆能力,增加大鼠海马PSD95和Shank 1表达,表明其对突触功能和可塑性具改善作用.

Our previous study showed that when glutamate receptor (GluR)6 C terminus-containing pep-tide conjugated with the human immunodeficiency virus Tat protein (GluR6)-9c is delivered into hippocampal neurons in a brain ischemic model, the activation of mixed lineage kinase 3 (MLK3) and c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) is inhibited via GluR6-postsynaptic density pro-tein 95 (PSD95). In the present study, we investigated whether the recombinant adenovirus (Ad) carrying GluR6c could suppress the assembly of the GluR6-PSD95-MLK3 signaling module and decrease neuronal cell death induced by kainate in hippocampal CA1 subregion. A seizure model in Sprague-Dawley rats was induced by intraperitoneal injections of kainate. The effect of Ad-Glur6-9c on the phosphorylation of JNK, MLK3 and mitogen-activated kinase kinase 7 (MKK7) was observed with western immunoblots and immunohistochemistry. Our findings revealed that overexpression of GluR6c inhibited the interaction of GluR6 with PSD95 and prevented the kainate-induced activation of JNK, MLK3 and MKK7. Furthermore, kainate-mediated neuronal cell death was signiifcantly suppressed by GluR6c. Taken together, GluR6 may play a pivotal role in neuronal cell death.

PP2对大鼠面神经缺血损伤的保护作用

目的:探讨PP2(4-amino-5-(4-chlorophenyl)-7-(t-butyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidine)在大鼠面神经缺血损伤模型中的保护作用,为进一步探索面神经缺血损伤的治疗方法提供实验依据.方法:实验选取40只雄性SD大鼠,分为四组:假手术组,损伤组,DMSO溶剂对照组和PP2干预组.手术组沿耳廓外上缘行弧形切口,分离暴露出岩动脉,双极电凝灼断.假手术组暴露出岩动脉但不予灼断.PP2干预组和DMSO溶剂对照组于术前30 min分别脑室注射15 μg(总体积10 μL)PP2或相同体积DMSO.于3d后观察各组大鼠的行为学变化,同时运用免疫共沉淀和免疫印迹的技术分析其中分子机制.结果:(1)PP2干预组的大鼠相对于手术组和DMSO溶剂对照组,瞬目反射和触须动度明显好转(2)大鼠面神经缺血损伤时,损伤组相对于假手术组,NMDAR-PSD95-Src的结合明显增加(P＜0.05)(3)PP2干预组NR2A-PSD95-Src的结合相对于手术组和DMSO溶剂对照组明显降低(P＜0.05).结论:大鼠面神经缺血损伤时,存在NMDAR-PSD95-Sre形成的信号通路,PP2可以有效的抑制NMDAR-PSD95-Src信号通路的形成,从而起到面神经保护作用.

左乙拉西坦对癫痫模型大鼠海马组织中GFAP及PSD95表达的影响

目的:研究左乙拉西坦对癫痫模型大鼠海马组织中胶质纤维性蛋白(GFAP)及突触后致密物(PSD95)表达的影响.方法:选取清结级Wistar大鼠104只作为研究对象,随机分为4组:生理盐水组(NS组)23只,左乙拉西坦对照组(LEV组)24只,模型组(Li-pilo组)27只,模型+左乙拉西坦组(Li-pilo+LEV组)30只,LEV组与Li-pilo+LEV组的大鼠每日给予左乙拉西坦200mg/kg进行灌胃,连续给药4周.分别于第7d、14d、28d采用RT-PCR方法动态检测大鼠海马组织中GFAP及PSD95表达情况.结果:经治疗后,与NS组相比,Li-pilo+LEV组第7d、14d、28dGFAP的表达水平明显升高,PSD95的表达量明显降低(P<0.05);与Li-pilo组相比,Li-pilo+LEV组第7d、14d、28dGFAP的表达水平明显降低,PSD95的表达水平明显升高(P<0.05).结论:左乙拉西坦的抗癫痫作用可能与通过上调PSD95的表达及抑制GFAP的表达有关,具体作用机制还需进一步研究.

17β-estradiol通过促进PSD95/nNOS耦联抑制皮层海马神经元的存活

目的:检测17β-estradiol对皮层海马神经元存活的影响,并判断其与nNOS/PSD95耦联的关系.方法:采用原代培养的ICR小鼠皮层海马神经元.培养7天后分溶剂对照组和给药组分别给予溶剂DMSO和浓度为10 μmol/L的17β-estradiol,LDH法判断细胞损伤,测定给药30 min后细胞死亡情况,并拍摄光镜照片观察细胞形态.同时利用免疫共沉淀法检测DMSO组,10nmol/L17β-estradiol组.10 μmol/L 17β-estradiol组的nNOS和PSD95的耦联情况,观察药物对其影响.结果:给药30 min后,与对照组相比,10 μmol/L 17 β-estradiol组LDH漏出率增加.同时nNOS/PSD95耦联增加,而10 nmol/L 17β-estradiol对nNOS/PSD95耦联并没有影响.结论:浓度为10 μmol/L的17β-estradiol会损伤皮层海马神经元,而且这一结果可能是通过促进nNOS/PSD95耦联实现的.

戊四氮点燃致发育期癫(疒间)大鼠海马神经元突触结构的改变

目的 观察戊四氮(PTZ)点燃后发育期癫(疒间)大鼠海马神经元海马突触素(P38)和突触后致密物质(PSD95)及电镜超微结构的变化.方法 21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)和实验组(PTZ),用戊四氮建立点燃模型,免疫组化检测大鼠P38及 PSD95阳性细胞的数量及分布,电镜观察海马CA3区超微结构的变化.结果 PTZ组大鼠海马区P38及PSD95免疫反应产物表达量较NS组明显减少(P<0.05);电镜下NS组海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常,PTZ组大鼠神经元细胞及突触结构均有改变.结论 戊四氮点燃所致癫(疒间)对发育期大鼠海马神经元的突触结构有明显损害.

姜黄素对阿尔茨海默病模型小鼠病情效果的改善作用及相关机制研究

目的 探讨姜黄素改善阿尔茨海默病(AD)模型小鼠病情的效果以及相关机制,为AD的治疗提供实验依据. 方法 将48只昆明种A PP/PSI双转基因小鼠按随机数字表法分成4组,即AD模型组、AD模型+低剂量姜黄素组、AD模型+中剂量姜黄素组、AD模型+高剂量姜黄素组,每组各12只,后3组同时腹腔注射剂量分别为100 mg/(kg·d)、200 mg/(kg·d)、400 mg/(kg·d)姜黄素(1次/d,连续14 d).另取正常小鼠12只做为正常对照组,不做任何处理.应用牵引实验、Morris 水迷宫实验检测各组小鼠行为学改变,免疫组化染色检测各组小鼠脑组织Shank1、PSD95阳性表达,Western blotting法检测各组小鼠脑组织Shank1、PSD95蛋白表达. 结果 AD模型组和AD模型+低剂量姜黄素组的牵引实验平均得分、逃避潜伏期、通过原平台次数、原平台所在象限停留时间百分比以及Shank1、PSD95免疫组化染色阳性率与正常对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05);AD模型+中剂量姜黄素组的牵引实验平均得分、逃避潜伏期、通过原平台次数、原平台所在象限停留时间百分比以及Shank1、PSD95免疫组化染色阳性率与AD模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);AD模型+低剂量姜黄素组、AD模型+中剂量姜黄素组和AD模型+高剂量姜黄素组Shank1、PSD-95蛋白表达与AD模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 应用中剂量姜黄素可更好地改善AD模型小鼠的运动能力、学习能力及记忆能力,其机制可能是通过改善突触相关蛋白Shank1、PSD95表达及突触结构,提高AD模型小鼠海马突触数量,进而改善突触的可塑性.