首页 > 文献资料
-
靶向治疗药物相关标志物在卵巢透明细胞癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨靶向治疗药物相关标志物在卵巢透明细胞癌(OCCC)组织中的表达及其临床意义.方法 收集2008年1月—2015年12月在复旦大学附属肿瘤医院进行手术治疗的OCCC患者60例,其中40例为初次手术患者,23例为复发后二次手术患者(其中3例患者的初次手术也在本院完成,故重复计数).采用免疫组化SP法检测OCCC组织中靶向治疗药物相关标志物——表皮生长因子受体(EGFR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)、极光激酶A(AURKA)、乳腺癌易感基因(BRCA)1、BRCA2及程序性死亡配体1(PD-L1)的表达,并分析其与患者化疗耐药及预后的相关性.结果(1)免疫组化SP法检测显示,在初次手术患者和复发后二次手术患者的OCCC组织中,EGFR蛋白的阳性表达率分别为20%(8/40)和30%(7/23),HER2分别为22%(9/40)和35%(8/23),AURKA分别为38% (15/40)和35%(8/23),BRCA1分别为42%(17/40)和39%(9/23),BRCA2分别为20%(8/40)和22%(5/23),PD-L1分别为25%(10/40)和17%(4/23),分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)仅复发后二次手术患者的OCCC组织中HER2蛋白的表达与其铂类药物耐药明显相关(P=0.039);而初次手术患者及复发后二次手术患者的其他靶向治疗药物相关标志物的表达与其铂类药物耐药均无明显相关性(P>0.05).(3)单因素生存分析显示,40例初次手术的OCCC患者中,HER2、AURKA蛋白阳性表达者的中位无进展生存时间(PFS,分别为4、4个月)均明显短于各自的阴性表达者(分别为10、10个月,P=0.023、P=0.018);23例复发后二次手术的OCCC患者中,HER2、AURKA蛋白阳性表达者二次手术后的中位总生存时间(OS,分别为10、13个月)也均明显短于各自的阴性表达者(分别为44、43个月,P=0.026、P=0.044).多因素生存分析显示,6个靶向治疗药物相关标志物均不是影响OCCC患者初次手术后PFS、复发后二次手术后OS的独立危险因素(P>0.05).结论 HER2及AURKA表达与OCCC患者初次手术后PFS、复发者二次手术后OS明显相关,可作为判断OCCC患者预后的预测指标.
-
蟾酥活性成分下调极光激酶表达并促进肝癌细胞周期阻滞的机制研究
目的 探讨极光激酶(AURK)在肝癌中的作用,以及蟾酥活性成分华蟾毒配基和蟾蜍灵下调AURK表达和抑制肝癌HepG2细胞增殖的机制.方法 Kaplan-Meier生存函数法分析极光激酶A(AURKA)和极光激酶B(AURKB)mRNA表达水平与肝癌患者生存期的关系;MTT法检测HepG2细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化,蛋白免疫印迹法检测AURKA、AURKB、Xklp2靶向蛋白(TPX2)、染色体结构维持蛋白2(SMC2)、DNA拓扑异构酶2(TOP2A)和细胞周期蛋白依赖性激酶1 (CDK1)的表达水平.结果 Kaplan-Meier生存分析显示AURKA和AURKB mRNA表达水平与肝癌患者生存期呈现显著负相关;华蟾毒配基和蟾蜍灵可抑制HepG2细胞生长,抑制效应呈现时间和浓度依赖性;华蟾毒配基和蟾蜍灵均引起细胞周期G2/M期阻滞,下调AURKA、AURKB、TPX2、SMC2、TOP2A和CDK1蛋白表达(P＜0.05).结论 AURKA和AURKB mRNA表达水平与患者生存期呈现显著负相关.华蟾毒配基和蟾蜍灵能有效促使AURKA和AURKB表达下调,调控有丝分裂相关分子,引起HepG2细胞周期阻滞,从而抑制其增殖.
-
华蟾毒配基联合索拉非尼通过AURKA/Ras/Raf/ERK信号通路对肝癌Huh7细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究华蟾毒配基联合索拉非尼对肝癌Huh7细胞增殖与凋亡的影响及作用机制.方法 MTT法检测Huh7细胞增殖;Hoechst33342/PI荧光双染法检测Huh7细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞周期;免疫细胞化学法检测Ki67蛋白表达;Western blotting法检测Bax、Bcl-2、Caspase-8、极光激酶A(AURKA)、Ras、Raf、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白的表达变化.结果 华蟾毒配基、索拉非尼及联合用药对Huh7细胞的增殖均有抑制作用,联合用药组的增殖抑制作用更明显,具有协同效应;荧光染色可见细胞凋亡形态变化;索拉非尼引起Huh7细胞周期S期阻滞,华蟾毒配基和联合用药引起Huh7细胞周期GE/M期阻滞,联合用药组G2/M期阻滞较单药组更明显;华蟾毒配基和索拉非尼均能减弱Ki67表达,联合用药组的作用更为显著;华蟾毒配基、索拉非尼及联合用药上调Bax和Caspase-8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax/Bcl-2比例,对ERK蛋白表达无明显影响,显著下调AURKA、Ras、Raf和p-ERK蛋白表达,联合用药组的作用更为显著(P＜0.05).结论 华蟾毒配基联合索拉非尼通过AURKA/Ras/Raf/ERK信号通路抑制肝癌Huh7细胞增殖,诱导其凋亡.
-
Aurora A调控活性氧对卵巢癌顺铂耐药的影响
背景与目的:极光激酶A(Aurora A kinase,Aurora A)属于丝/苏氨酸蛋白激酶家族中的一员,可促进卵巢癌的化疗抵抗.活性氧(reactive oxygen species,ROS)由机体正常代谢产生,参与细胞信号转导过程.肿瘤细胞由于代谢旺盛及细胞内氧化还原体系的失衡,ROS水平高于正常细胞.并且耐药细胞株中ROS水平降低,提示ROS在肿瘤耐药中发挥作用.该研究旨在探讨ROS在Aurora A介导顺铂化疗耐药中的作用.方法:采用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(2',7'-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)法检测人卵巢癌细胞株A2780和顺铂耐药株A2780/CDDP中ROS的水平,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测顺铂的半数抑制浓度(50％inhibitory concentration,IC50);构建Aurora A过表达和沉默细胞株,检测细胞内ROS水平;加入ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC),检测顺铂的IC50;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测相关信号通路,探讨可能的分子机制.结果:顺铂耐药株中ROS水平低于对照细胞株.加入NAC降低细胞内ROS可增强细胞对顺铂的耐药性.Aurora A过表达,细胞内ROS水平下降,可增强细胞对顺铂的耐药;而Aurora A沉默后,细胞内ROS升高,则可提高细胞对顺铂的敏感性.Aurora A过表达,促进AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的磷酸化及糖酵解.结论:Aurora A可能通过促进AMPK磷酸化及糖酵解过程,降低细胞内ROS水平,从而增强卵巢癌细胞对顺铂的耐药性.
-
下调极光激酶A活性抑制Hep2细胞的促血管生成作用和迁移、侵袭能力
目的·探索极光激酶A(aurora kinase A,AURKA)活性对人喉癌Hep2细胞促血管生成作用和迁移、侵袭能力的影响.方法·使用100 nmol/L的VX680下调Hep2细胞中AURKA磷酸化,Western blotting检测VX680作用于细胞0(空白对照)、24、48 h时磷酸化AURKA (p-AURKA)与血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)及其受体VEGFR2蛋白表达情况.血管生成试验观察VX680对Hep2细胞促血管生成的影响.通过CCK8细胞增殖试验和Transwell细胞迁移、侵袭试验分别观察Hep2细胞增殖和迁移、侵袭能力.结果·与空白对照细胞相比,VX680作用48 h时p-AURKA蛋白表达水平降低(P=0.000).下调p-AURKA后,VEGFA、VEGFR2蛋白表达水平降低(均P=0.000);同时,血管生成减少,Hep2细胞迁移、侵袭能力降低(均P=0.000).结论·AURKA调控喉癌Hep2细胞的促血管生成作用及迁移、侵袭能力,以AURKA分子为药物治疗靶点可作为治疗喉癌的新策略.
-
短发夹RNA干扰引起前列腺癌DU145细胞极光激A基因沉默的研究
目的 观察极光激酶A(AURKA)对前列腺癌细胞活性的影响.方法 使用8条短发卡RNA(shRNA)进行筛选得出2条特异性强的shRNA.在抑制AURKA在前列腺癌细胞DU145的表达后,以噻唑蓝(MTT)法观察前列腺癌细胞活性的变化.结果 2条shRNA抑制DU145的AURKA表达后分别引起DU145活性分别下降40.5％ (P＜0.01)和61.3％ (P＜0.01),并使其凋亡比率分别增加9.23％ (P＜0.05)和15.45％(P＜0.05).结论 有效的shRNA片段能够使雄激素受体(AR)不表达的前列腺癌细胞DU145发生AURKA基因沉默,并通过促进凋亡来抑制DU145的活性.
-
AURKA基因在口腔鳞癌中的表达及意义
目的 检测极光激酶A(AURKA)基因在口腔鳞癌中的表达及意义.方法 收集20例口腔正常组织及42例口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织,采用Real-Time PCR检测AURKA基因在不同口腔组织中的表达.结果 AURKA mRNA在OSCC中高表达,且不同分化程度,不同临床分期,组间差异有统计学意义.不同年龄,不同性别,组间差异无统计学意义.结论 AURKA在OSCC中高表达,AURKA作为激酶可能直接或间接地激活多种致癌蛋白或使多种抑癌蛋白失活,从而推动肿瘤的发生发展.
关键词： 极光激酶A 口腔鳞癌 Real-time PCR
