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恶性和结核性胸腔积液中CC趋化因子22与17的水平及其意义
胸腔积液是临床上常见的疾病或并发症,其免疫学机制尚未完全明了,炎性介质可能为其中的重要环节,CC趋化因子(CCL)22和17为细胞源性趋化介质,通过受体-配体途径动员表达相应趋化因子受体(CCR)的免疫细胞迁移,到达病变局部以发挥免疫效应.我们对恶性和结核性胸腔积液患者的胸腔积液及血清中CCL22和CCL17水平进行检测,以探讨其在胸腔积液发生中的免疫学意义.
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朝医二门五味汤对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的保护作用
目的:研究朝医方二门五味汤对CCl4引起小鼠急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:采用CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,观察二门五味汤对血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝匀浆中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)的影响.结果:二门五味汤明显降低因CCl4导致中毒小鼠血清中ALT、AST的活力;降低肝组织中MDA含量,提高SOD含量;提高GSH和T-AOC的含量.结论:本研究证实朝医方二门五味汤对药物CCl4所致的急性肝损伤有保护作用.其机制可能与清除氧自由基,抑制脂质过氧化有关;并能增强机体抗氧化的能力.
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神经病理性疼痛大鼠脊髓背角Sirt1与miR-34b表达的变化
目的 研究Sirt1与miR-34b在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中表达变化的临床意义.方法 将14只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和坐骨神经慢性压迫性损伤组(CCI组),每组7只.于模型建立前1d及术后第7、14天,测定大鼠机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL).术后第14天取大鼠L4～５节段脊髓进行病理学检查,HE染色后观察脊髓背角运动神经元的数量变化.real-time PCR检测脊髓背角内Sirt1与miR-34b的表达,Western blot测定大鼠脊髓背角内Sirt1、脑源性神经营养因子(BDNF)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达.结果 经MWT和TWL验证,大鼠CCI神经病理性疼痛模型建立成功.HE染色显示,与Sham组比较,CCI组大鼠在手术后7、14d脊髓背角神经元数量显著减少(均P＜0.05).real-time PCR结果显示,与Sham组相比,CCI组Sirt1表达降低,miR-34b表达升高(均P＜0.05).Western blot显示Sirt1与CREB表达降低,pCREB与BDNF表达增加.结论 Sirt1与miR-34b的表达变化可能参与坐骨神经慢性压迫性损伤导致的神经病理性疼痛的形成和维持.
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细胞穿透肽 CCL 融合蛋白的构建与表达
目的：评估细胞穿透肽 CCL 融合蛋白构建的可能性。方法将 CCL6-PEP-6XHis 构建至 pABP 质粒，然后提取 pABP-CCL6-PEP 质粒进行人胚肾 HEK293细胞转染表达，以及 CCL6-PEP-6XHis 蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽 CCL 融合蛋白。将 CCL6-PEP-6XHis Tag 基因经 PCR 扩增、接入 T 载体、克隆、培养，并提取质粒进行测序鉴定，所得序列与目的基因一致。成功将 CCL6-PEP-6XHis 基因构建至哺乳动物细胞表达载体 pABP 中，经质粒提取和酶切鉴定，电泳结果显示，HindⅢ＋ XbaⅠ切出约430 bp 的条带，符合预期，酶切鉴定正确。蛋白质印迹法（Western Blot）检测结果阳性，表明纯化得到的目标蛋白带有 hisx6标签。结论细胞穿透肽 CCL 融合蛋白能够人工构建，并通过真核细胞进行表达。
