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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1与2型糖尿病胰岛素抵抗的相关性研究
目的 观察不同糖代谢人群血清胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBP-rP1)水平的变化,探讨IGFBP-rP1与胰岛素抵抗(IR)的关系.方法 选取该院2010年1月—2015年12月新发2型糖尿病组68例(T2DM组),糖调节受损组41例(IGR组),正常对照组50名(NGT组).分别测定血清IGFBP-rP1及相关代谢指标.结果 ①血清IGFBP-rP1水平,T2DM组、IGR组较NGT组明显上升,差异有统计学意义(P<0.01).②Spearman相关性分析显示:IGFBP-rP1与体重指数(BMI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹胰岛素(FINs)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),与腰臀比(WHR)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关.结论 2型糖尿病及糖调节异常人群血清IGFBP-rP1水平明显上升,且与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)密切相关,提示IGFBP-rP1与2型糖尿病胰岛素抵抗的发生发展有关,并可作为2型糖尿病检测的血清学指标.
关键词： 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 胰岛素抵抗 2型糖尿病 -
胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1与疾病关系的新进展
胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulin-like growth factor binding protein-related protein 1,IGFBPrP1)属于IGFBP超家族中的一员,是一种分泌蛋白,在细胞增殖、黏附、衰老、凋亡等进程中起重要作用,与恶性肿瘤、肝纤维化等多种疾病关系密切.
关键词： 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 恶性肿瘤 肝纤维化 -
肝纤维化血清学诊断标记物
肝纤维化是各种慢性肝病进展至肝硬化的必经阶段,其临床表现不典型,可进一步发展为肝癌,严重威胁患者生命健康.早期准确评估肝纤维化患者病情对疾病预后具有重要意义,血清学指标因其无创、操作方便、重复性好等优势一直是肝纤维化无创诊断的研究热点.本文简要介绍了传统血清学指标在肝纤维化辅助诊断中的应用,同时评述了指标转化生长因子β1、血清多花紫藤凝集素阳性巨噬细胞结合蛋白及YKL-40的临床应用价值及优缺点.此外,在本课题组长期研究的基础上建议将胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1作为进展期肝纤维化及肝硬化的实验室诊断指标.
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内源性转化生长因子β1对人肝星状细胞胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1表达的影响
目的 探讨内源性转化生长因子(TGF)β1对人肝星状细胞(HSC)胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)的表达的影响及其意义.方法 将人肝星状细胞LX-2分为3组:空白对照组(加入等量无血清无抗生素的培养液)、阴性质粒组(转染阴性对照质粒)、TGFβ1过表达组(转染TGFβ1过表达质粒).转染质粒后48h,荧光显微镜检测质粒转染效率.转染质粒后72h,采用RT-PCR法检测TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA的表达,采用Western印迹法检测TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1蛋白的表达.采用单因素方差分析比较空白对照组、阴性质粒组、TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA、蛋白相对表达量差异,进一步采用LSD-t检验进行组间两两比较.结果 质粒可转染LX-2细胞,转染效率达40%.TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA相对表达量分别为38.46±0.19、8.63±0.15、2.56±0.30,均较空白对照组的1明显上调,且差异均有统计学意义(t值分别为126.742、122.489、6.015,P均＜0.05);较阴性质粒组的1.05±0.01、1.03±0.02、1.00±0.10也均明显上调,且差异也均有统计学意义(t值分别为124.97、121.176、6.015,P均＜0.05).TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1蛋白相对表达量分别为0.27±0.04、1.47±0.02、0.53±0.01,较空白对照组的0.20±0.01、0.76±0.03、0.25±0.02均明显上调,且差异均有统计学意义(t值分别为4.108、35.5、19.33,P均＜0.05);较阴性质粒组的0.22±0.01、0.77±0.02、0.27±0.03也均明显上调,且差异也均有统计学意义(t值分别为2.988、35.0、18.388,P均＜0.05).结论 内源性TGFβ1可引起肝星状细胞CollagenⅠmRNA及蛋白的表达增加,同时也可以促进IGFBPrP1mRNA及蛋白的表达,推测IGFBPrP1可能作为TGFβ1的一个重要下游因子起到调控肝纤维化的作用.
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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad3信号通路的影响及意义
目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)对肝星状细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号通路的影响及意义.方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,分别设立空白对照组(加入等量磷酸盐缓冲液)和IGFBPrP1处理组(加入终浓度为30 μg/L的IGFBPrP1),作用24 h后收集细胞培养上清液,提取全细胞蛋白,另外收集细胞爬片.培养上清液中TGF-β1的表达采用Western印迹法及ELISA法检测,HSC-T6细胞TGF-β1的表达采用免疫细胞化学法检测；培养上清液中Smad3、p-Smad2/3和纤维连接蛋白(Fn)的表达采用Western印迹法检测.空白对照组与IGFBPrP1处理组TGF-β1、Smad3、p-Smad2/3、Fn蛋白表达量、p-Smad2/3与Smad3蛋白相对表达量比值比较采用独立样本t检验.结果 Western印迹法及ELISA检测结果均显示IGFBPrP1处理组培养上清液TGF-β1蛋白表达量均明显高于空白对照组[0.34 ±0.06与0.19±0.03相比,(188.34±32.24) ng/L与(136.16±19.52) ng/L相比],免疫细胞化学法也显示HSC-T6细胞TGF-β1蛋白表达量明显高于空白对照组(11.89±0.32与7.71±0.63相比),且差异均有统计学意义(t=3.859,P=0.018；t=3.391,P＜0.05;t=14.490,P＜0.05)；IGFBPrP1处理组与空白对照组HSC-T6细胞中Smad3相对表达量差异无统计学意义(0.65±0.05与0.64±0.05相比,t=0.084,P=0.937),p-Smad2/3蛋白相对表达量、p-Smad2/3与Smad3蛋白相对表达量的比值均明显高于空白对照组,且差异均有统计学意义(0.70±0.05与0.46±0.03相比,t=8.050,P=0.001；1.10±0.12与0.72 ±0.05相比,t=5.181,P=0.007)；IGFBPrP1处理组培养上清液中Fn蛋白相对表达量明显高于空白对照组,且差异有统计学意义(0.52±0.04与0.35±0.02相比,t=5.976,P=0.004).结论 IGFBPrP1可促进体外培养的HSC-T6产生TGF-β1.IGFBPrP1可使体外培养的HSC-T6中Smad3的磷酸化增加.IGFBPrP1可使体外培养的HSC-T6细胞外基质的重要成分Fn的分泌增加.
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比格犬肝损伤时F4/80、IL-6与IGFBPrP1的变化及意义
目的 探索硫代乙酰胺(Thioacetamide,TAA)诱导的比格犬肝损伤时F4/80、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)与胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulin-like growth factor binding protein-related protein1,IGFBP-rP1)的表达变化.方法 将12只雄性比格犬按随机数字表法分为正常对照组和TAA 6周组,每组6只,观察肝组织形态学改变,免疫组织化学染色检测F4/80与IGFBPrP1的表达,ELISA检测血浆IL-6与IGFBPrP1的水平,Western blot检测IGFBPrP1蛋白的表达.结果 HE染色结果显示TAA组肝细胞变性、坏死,炎细胞浸润增多.F4/80的免疫组织化学染色结果显示TAA组肝组织枯否细胞内可见大量棕褐色颗粒,表达较正常对照组明显增强(3.14±0.01 vs.0.10±0.02,P<0.05).IL-6的ELISA结果显示TAA组血浆IL-6水平较正常对照组显著增高(26.00±2.90 vs.16.8±4.10,P<0.05).IGFBPrP1的免疫组织化学染色结果显示TAA组肝组织肝窦、血管壁、汇管区及部分肝细胞内可见大量棕褐色颗粒沉积,表达明显高于正常对照组(1.69±0.01 vs.0.50±0.06,P<0.05).IGFBPrP1的Western blot结果显示TAA组IGFBPrP1蛋白的表达较正常对照组显著增多(P<0.05).IGFBPrP1的ELISA结果表明TAA组血浆IGFBPrP1水平较正常对照组显著增高(1.54±0.08 vs.1.09±0.05,P<0.05).结论 比格犬肝损伤时F4/80、IL-6与IGFBPrP1均发生了明显变化,表明其参与了肝损伤的过程.
关键词： 白细胞介素6 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 F4/80 硫代乙酰胺 比格犬 -
携带胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的腺病毒载体对大鼠肝组织的影响
目的 明确携带胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的腺病毒载体(Ad-IGFBPrP1)是否能导致大鼠发生肝纤维化.方法 清洁级雄性SD大鼠24只,采用随机数表法分为3组,每组8只:正常组:自由喂养,不做任何处理;Ad-GFP组(携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体):尾静脉注射Ad-GFP,2.5×109 pfu,1次;Ad-IGFBPrP1组:尾静脉注射携带Ad-GFP的Ad-IGFBPrP1,2.5×109 pfu,1次.4周后处死动物,10%中性甲醛固定后取肝组织行HE染色,观察肝组织病理变化;免疫组织化学染色观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(Fn)在肝组织的表达.结果 HE染色显示:正常组和Ad-GFP组肝小叶结构完整,肝细胞排列整齐,Ad-IGFBPrP1组中肝组织结构紊乱,肝细胞大量水肿变性,少数肝细胞核固缩、碎裂,可见纤维结缔组织异常增生;免疫组织化学染色显示:Ad-IGFBPrP1组肝组织中α-SMA、Fn的表达(3.10±0.13)%、(32.00±0.93)%均较正常组(0.19±0.03)%、(0.37±0.01)%和Ad-GFP组(0.19±0.03)%、(0.40±0.01)%显著增强(P<0.01).结论 给大鼠尾静脉注射Ad-IGFBPrP1可导致大鼠发生肝纤维化,该作用可能与激活HSC、促进Fn生成有关.
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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1对SD大鼠和比格犬肾组织的影响及意义
目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)对SD大鼠和比格犬肾组织的影响及意义.方法 (1)健康雄性SD大鼠随机分为3组,A组:经尾静脉注射生理盐水;B组:经尾静脉注射腺病毒携带增强型绿色荧光蛋白(Ad-EGFP);C组:经尾静脉注射腺病毒携带IGFBPrP1(Ad-IGFBPrP1).各组于注射后1、2、4、6、9周留取肾组织.(2)健康雄性比格犬随机分为3组,D组:正常饲养;E组:皮下注射硫代乙酰胺(TAA);F组:皮下注射TAA,5周起协同注射IGFBPrP1抗体.各组于12周留取肾组织.HE和Sirius red染色观察SD大鼠和比格犬肾组织形态结构改变和胶原纤维沉积情况;免疫组织化学染色检测SD大鼠肾组织IGFBPrP1、白细胞介素1β(IL-1β)、转化生长因子β1(TGFβ1)、纤维连接蛋白(Fn)以及比格犬肾组织IGFBPrP1的分布和表达情况.结果 (1)SD大鼠:与A组和B组正常肾组织相比,C组肾组织病理学改变逐渐加重,胶原纤维含量逐渐增多;IGFB-PrP1自转染后1周开始增多,2周达高峰,后逐渐减弱;IL-1β于6周达高峰,9周下降;TGFβ1呈时间按依赖性持续升高,9周达高峰;Fn在9周时显著增多.(2)比格犬:与D组正常肾组织相比,E组肾组织病变显著,胶原纤维含量增多,而F组较E组病变明显改善;E组IGFBPrP1表达增强,F组较E组减弱.结论 IGFBPrP1对肾组织会造成不同程度的损伤,是一种具有非组织特异性的致病因子.
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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1诱导大鼠肾肺炎症改变的研究
目的 明确胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)是否可诱导SD大鼠肾、肺组织发生炎症改变及其可能的意义.方法 选用健康雄性SD大鼠50只按随机数字表法随机分为3组,A组:经尾静脉注射0.9％氯化钠注射液组;B组:经尾静脉注射腺病毒携带增强型绿色荧光蛋白(Ad-EGFP)组;C组:经尾静脉注射腺病毒携带IGFBPrP1(Ad-IGFBPrP1)组.各组于注射后1、2、4、6周分别对肾、肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察其病理变化,并采用蛋白质印迹试验检测IGFBPrP1、TNF-α、IL-6、NF-κB、TGF-β及α-SMA蛋白的表达变化.结果 ①HE染色结果显示,与A组、B组大鼠正常肾组织及肺组织相比,C组肾组织及肺组织在转染早期即出现炎性改变,并随着转染时间的延长病变逐渐加重,晚期有纤维化样改变;②Western blot检测结果显示:各指标在A组和B组大鼠肾组织及肺组织中均为痕量表达,在C组中,IGFBPrP1自转染后1周开始表达增加,2周达高峰,之后表达逐渐减弱;TNF-α于2周开始增加,4周达高峰,6周下降;IL-6、NF-κB、TGF-β及α-SMA的表达均于2周开始增加且呈时间依懒性持续升高,各指标与A组、B组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论IGFBPrP1能够诱导SD大鼠肾、肺组织发生不同程度的炎症改变,该炎症的持续加重可诱导相应组织发生纤维化.
关键词： 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 大鼠 Sprague-Dawley 肾 肺 炎症 -
上调胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1对子宫内膜癌细胞系HEC-1A生物学功能的影响
目的:探讨上调子宫内膜癌细胞系HEC-1A中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的表达对子宫内膜癌细胞系HEC-1A增殖,凋亡及细胞周期的影响.方法:采用脂质体介导重组质粒转染HEC-1A细胞,按不同处理分为实验组(转染pEX-2-IGFBP7)、阴性对照组(转染pEX-2-Empty)、空白对照组(只加转染试剂),应用qRT-PCR技术检测各组细胞中IGFBP-rPl mRNA的表达水平,利用蛋白印迹法(Western Blot)测定各组IGFBP-rP1蛋白表达.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞系增殖抑制率,采用流式细胞仪检测各组凋亡率及细胞周期变化.结果:实验组、阴性对照组和空白对照组HEC-1A细胞中IGFBP-rP1 mRNA的相对拷贝量分别为2.699±0.293,1.296±0.169,1.031±0.301,实验组明显高于阴性对照组(P=0.001)及空白对照组(P=0.000).实验组IGFBP-rP1蛋白相对表达量(1.126±0.074)与阴性对照组(0.889±0.040,P=0.006)及空白对照组(0.884±0.043,P=0.005)中相比,差异有统计学意义.实验组24、48和72 h增殖抑制率(0.373 ±0.054,0.399 ±0.047,0.380±0.053)与阴性对照组(0.036±0.006,0.040±0.005,0.0334±0.006)和空白对照组(0.027 ±0.003,0.032 ±0.002,0.024 ±0.002)相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).而阴性对照组与空白对照组增殖抑制率相比,差异无统计学意义(P＞0.05).转染后24h,实验组凋亡率为(20.667±2.055)％,与阴性对照组[(3.967±0.351)％]和空白对照组[(4.967±0.252)％]相比,差异有统计学意义(P＜0.01);实验组S+ G2/M期细胞的比例为(30.980±1.461)％,明显低于阴性对照组[(38.797％±2.419)％]和空白对照组[(37.800％±0.350)％],差异有统计学意义(P＜0.01).结论:上调人子宫内膜癌细胞HEC-1A中IGFBP-rP1的表达可以抑制该细胞系的增殖,促进其凋亡,阻滞细胞周期.
关键词： 子宫内膜肿瘤 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 转染 细胞凋亡 细胞周期 -
胶囊渗透压泵控释rmIGFBPrP1对小鼠肝肾组织的影响及意义
目的 胶囊渗透压泵植入野生型小鼠皮下并持续恒量释放重组鼠胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(rmIGFBPrP1),观察小鼠肝肾纤维化相关指标的表达,探讨nnlGFBPrP1对小鼠肝肾组织的影响及其可能的意义.方法 将清洁级雄性C57BL/6野生型小鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组.采用胶囊渗透泵控释rntIGFBPrP1制备肝纤维化模型.HE染色、天狼猩红染色观察各组小鼠肝肾病理改变及胶原纤维沉积状况.免疫组织化学染色检测肝肾组织中IGFBPrP1、Smad3、p-Smad2/3、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)的表达和分布.原位缺口末端标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡.结果 与对照组和假手术组相比,模型组肝组织中胶原纤维含量增多,IGFBPrP1、Smad3、p-Smad2/3、Collagen Ⅲ表达增强(P<0.01).模型组肾组织中仅IG-FBPrP1表达较对照组和假手术组有所增加,胶原纤维和其他指标表达未见差异(P>0.05).TUNEL结果显示模型组肝细胞凋亡率增高,与正常组和假手术组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 外源性IGFBPrP1可促进小鼠肝细胞凋亡和肝纤维化的形成,而对小鼠肾组织影响甚微.IGFBPrP1致小鼠脏器组织纤维化可能具有选择性.
关键词： 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 肝硬化 细胞凋亡 -
NB4细胞诱导分化过程中WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因表达水平的变化
目的:探讨WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因与NB4细胞诱导分化的关系.方法:利用实时定量RT-PCR方法检测NB4细胞诱导分化不同时间点WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的表达水平,并用流式细胞仪检测NB4细胞表面抗原CD11b的变化.结果:随着NB4细胞向粒系终末分化,WT1、IGFBP-rP1基因的表达水平迅速下降.0.5 μmol/L全反式维甲酸(all transretinoic acid,ATRA)作用0、4、8、12、24与48 h后WT1N分别为1.91、1.21、0.60、0.44、0.18与0.04;IGFBP-rP1N分别为1.10、0.80、0.54、0.28、0.17与0.15.RbAp46基因的平均表达水平则下降缓慢,分别为2.65、1.86、1.40、1.27、1.48与0.49.NB4细胞处理组WT1基因的改变分别与RbAp46和IGFBP-rP1基因的变化存在相关性(r=0.829,P=0.021;r=1,P＜0.001),三者均与CD11b的变化呈负相关(r=-1.0,P＜0.001;r=-0.829,P=0.021与r=-1.0,P＜0.001).结论:WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的高表达可能参与了阻滞NB4细胞分化的过程.
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四种人子宫内膜癌细胞系中IGFBP-rP1的定位及表达
目的:检测不同子宫内膜癌细胞系中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBP-rP1)的定位及表达情况.方法:体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa、RL95-2、HEC-1B和HEC-1A,细胞免疫荧光法检测IGFBP-rP1在4种子宫内膜癌细胞中的定位;实时荧光定量PCR法与Western blot法检测4种子宫内膜癌细胞中IGFBP-rP1 mRNA及蛋白的表达水平.结果:细胞免疫荧光染色示IGFBP-rP1主要定位于4种子宫内膜癌细胞的胞浆.子宫内膜癌Ishikawa、RL95-2细胞中IGFBP-rP1 mRNA及蛋白表达水平明显高于HEC-1A、HEC-1B细胞(P<0.001).HEC-1A细胞中IGFBP-rP1 mRNA及蛋白表达量低,Ishikawa细胞中表达量高(P均<0.05).结论:4种子宫内膜癌细胞系中均表达IGFBP-rP1.
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子宫内膜腺癌组织中 IGFBP-rP1基因的甲基化状态及其 mR-NA、蛋白表达水平的检测
目的：探讨子宫内膜腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1（ IGFBP-rP1）基因的甲基化状态及其与IGFBP-rP1 mRNA、蛋白表达之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测45例子宫内膜腺癌、30例子宫内膜单纯性增生和30例子宫内膜不典型增生组织中IGFBP-rP1基因启动子区和第一外显子区CpG岛的甲基化状态；采用实时荧光定量PCR和免疫组化SP法分别检测上述3种组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达。结果：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率高于其在第一外显子区的甲基化率（χ2＝6．429，P＝0．011）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率低于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝14．659，P＝0．001）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达均高于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝8．619、χ2＝23．611，P均＜0．05）；在启动子区发生IGFBP-rP1基因甲基化的子宫内膜腺癌组织中，其mRNA的表达水平低于未甲基化组（t＝4．758，P＝0．001），其蛋白的表达与甲基化状态呈负关联（rP ＝－0．625，P＜0．001）。结论：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因甲基化主要发生在启动子区，且呈低甲基化状态；IGFBP-rP1启动子区的低甲基化状态可能是IGFBP-rP1基因在子宫内膜腺癌组织中高表达的调控机制之一。
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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1表达对鼻咽癌细胞系C N E1发生发展的研究
目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBP-rP1)对鼻咽癌细胞系CNE1细胞的增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 构建2条特异性针对IGFBP-rP1基因的小干扰RNA(siRNA32、siRNA34)及其阴性对照siRNA,将CNE1细胞分为4个转染组:siRNA32组(siRNA32转染)、siRNA34组(siRNA34转染)、阴性对照组(阴性对照siRNA转染)、空白组(不做任何处理),分别培养24 h或48 h后检测相关指标.结果 siRNA32组和siRNA34组IGFBP-rP1 mRNA及蛋白表达水平显著低于阴性对照组和空白组(P<0.05);siRNA32组和siRNA34组CNE1细胞迁移数、穿过PVP-F膜的CNE1细胞数显著低于阴性对照组和空白组(P<0.05);培养24、48 h后,siRNA32组和siRNA34组CNE1细胞增殖OD值显著低于阴性对照组和空白组(P<0.05);培养48 h后,siRNA32组和siRNA34组G0/G1期、G2/M期细胞所占比例显著高于阴性对照组和空白组(P<0.05);siRN A32组和siRN A34组S期细胞所占比例显著低于阴性对照组和空白组(P<0.05).结论 抑制IGFBP-rP1表达能降低鼻咽癌CNE1细胞的增殖、侵袭、迁移能力,为临床治疗鼻咽癌提供一种新的思路.
关键词： 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 鼻咽癌 CNE1细胞 -
胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1在活化肝星状细胞中的表达及意义
目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(insulin-like growth factor binding protein-related protein-1,IGFBP-rP1)在转化生长因子β1(tronstorming growth factor β1,TGFβ1)诱导的肝星状细胞中表达的变化及抗IGFBP-rP1抗体对TGFβ1诱导的肝星状细胞产生Ⅰ型胶原的影响.方法 大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)体外培养,分别设空白对照组(加入等量PBS)、不同浓度的TGFβ1.处理组、不同浓度的抗IGFBP-rP1抗体处理组,处理因素作用24h,采用免疫组织化学染色、Western blot检测IGFBP-rP1在HSC-T6中的表达,ELISA检测Ⅰ型胶原的含量并进行IGFBP-rP1与Ⅰ型胶原的相关性分析.结果 TGFβ1各处理组IGFBP-rP1的表达均较空白对照组显著增强.抗IGFBP-rP1抗体可以拮抗TGFβ1诱导的HSC-T6产生的过多Ⅰ型胶原.IGFBP-rP1与Ⅰ型胶原呈正相关(r=0.833,P＜0.01).结论 IGFBP-rP1参与了肝纤维化的形成,且可能在肝纤维化的发生、发展中占有重要地位.
