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内源性转化生长因子β1对人肝星状细胞胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1表达的影响
目的 探讨内源性转化生长因子(TGF)β1对人肝星状细胞(HSC)胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)的表达的影响及其意义.方法 将人肝星状细胞LX-2分为3组:空白对照组(加入等量无血清无抗生素的培养液)、阴性质粒组(转染阴性对照质粒)、TGFβ1过表达组(转染TGFβ1过表达质粒).转染质粒后48h,荧光显微镜检测质粒转染效率.转染质粒后72h,采用RT-PCR法检测TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA的表达,采用Western印迹法检测TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1蛋白的表达.采用单因素方差分析比较空白对照组、阴性质粒组、TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA、蛋白相对表达量差异,进一步采用LSD-t检验进行组间两两比较.结果 质粒可转染LX-2细胞,转染效率达40%.TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1mRNA相对表达量分别为38.46±0.19、8.63±0.15、2.56±0.30,均较空白对照组的1明显上调,且差异均有统计学意义(t值分别为126.742、122.489、6.015,P均＜0.05);较阴性质粒组的1.05±0.01、1.03±0.02、1.00±0.10也均明显上调,且差异也均有统计学意义(t值分别为124.97、121.176、6.015,P均＜0.05).TGFβ1过表达组肝星状细胞TGFβ1、CollagenⅠ、IGFBPrP1蛋白相对表达量分别为0.27±0.04、1.47±0.02、0.53±0.01,较空白对照组的0.20±0.01、0.76±0.03、0.25±0.02均明显上调,且差异均有统计学意义(t值分别为4.108、35.5、19.33,P均＜0.05);较阴性质粒组的0.22±0.01、0.77±0.02、0.27±0.03也均明显上调,且差异也均有统计学意义(t值分别为2.988、35.0、18.388,P均＜0.05).结论 内源性TGFβ1可引起肝星状细胞CollagenⅠmRNA及蛋白的表达增加,同时也可以促进IGFBPrP1mRNA及蛋白的表达,推测IGFBPrP1可能作为TGFβ1的一个重要下游因子起到调控肝纤维化的作用.
