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肝X受体的研究进展
肝X受体(liver X receptors,LXRs)属孤核受体家族,包括LXRα(NR1H3)和LXRβ(NR1H2)两种同源亚型,LXRα在脂代谢密切相关的组织中大量表达,在肝脏中含量多;而LXRβ表达广泛.LXRs作为一种氧化固醇激活的核受体,参与机体多种生理活动的调节,包括胆固醇的代谢和转运、脂肪的形成、糖原异生和炎症等过程.本文对LXRs的结构、分布、其信号通路及在胆固醇代谢、脂肪酸合成中的一些重要作用做出一简要综述.
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氧化固醇与氧化固醇结合蛋白的研究进展
随着人口老龄化的增加,我国的脑卒中发病率不断上升,常见的缺血性卒中类型是动脉粥样硬化血栓形成性脑梗死,以动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)等原因引起的血管壁病变为基础,而血管内皮细胞损伤和功能障碍是引起早期动脉硬化的核心环节,氧化型低密度脂蛋白是损伤内皮细胞导致AS形成的关键原因之一.
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肝脏X受体与非酒精性脂肪性肝病
肝脏X受体(LXRs)早于1994年从肝cDNA文库克隆得到,因其在肝脏内大量表达而命名.LXRs初由于未发现有天然配体,因此被称为孤儿受体(orphan receptor)[1],但后来研究发现胆固醇的代谢产物氧化固醇,例如22-(R)-羟胆固醇、24-(S)-羟胆固醇、27-羟胆固醇和24、25-环氧胆固醇可以与LXRs结合并在生理浓度下激活LXRs[2].
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构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒
目的 构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒,并感染巨噬细胞使PAPSS1过表达,为研究其在胆固醇代谢中的作用提供工具.方法 PCR扩增hpapss1全长cDNA,继而构建了真核表达载体pCDNA3.0-hpapss1,再将hpapss1片段亚克隆入腺病毒穿梭质粒pshuttle-CMV,得到转移质粒pshuttle-CMV-hpapss1,并将其转化含腺病毒基因组质粒pAdEasy-1的BJ5183感受态菌(AdEasier-1 cells).筛选并鉴定重组正确的腺病毒质粒pAdEasy-1-hpapss1,在阳离子脂质体介导下,转染腺病毒包装细胞(293细胞)进行包装和扩增.携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒感染THP-1来源的巨噬细胞48 h后,用Western blot方法测定蛋白水平来确定PAPSS1的过表达.结果 成功制备携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒,滴度为5.3×108 pfu/mL,实现了hpapss1基因在巨噬细胞中的过表达.结论 携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒的成功制备为进一步探讨PAPSS1及氧化固醇硫酸化在巨噬细胞胆固醇代谢平衡中的作用及机制建立了很好的模型和工具.
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ABCA1转录水平上脂质调节的研究进展
ABCA1是ATP结合盒转运子(ABC) 基因超家族中的一个亚型,在胆固醇逆转运和HDL生成的起始步骤中起着极重要的作用,现从转录水平总结氧化固醇和肝孤儿受体(LXR)、合成的LXR激活剂、类视黄醇和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体等多种物质对ABCA1在动脉粥样硬化和其他代谢综合征方面对脂质的影响,为如何调节ABCA1提供新的视点,并为进一步认识ABCA1的功能和调控提供线索.