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套式聚合酶链式反应诊断三日疟原虫感染的临床应用
目的：应用套式聚合酶链式反应（PCR）扩增小亚单位核糖体核糖核酸（SSUrRNA）基因诊断三日疟原虫感染，以减少三日疟的漏诊和误诊。方法分别提取可疑三日疟患者抗凝血 DNA和对照间日疟、恶性疟患者抗凝血 DNA，以此为模板，用疟原虫属特异性引物进行第一轮扩增；然后以第一轮扩增产物为模板，用4种疟疾的种特异性引物进行第二轮扩增，比较扩增出的18 SSU rRNA基因片段的大小，并对目的片段进行测序鉴定。结果经属特异性引物 PCR 扩增后，3个样本均出现大小约为1200bp 的条带。经种特异性引物 PCR 扩增后，间日疟及恶性疟确诊样本均扩增出相应的120bp 和205bp 特异性条带；可疑患者样本仅在用三日疟原虫种特异性作引物时扩增出144bp 特异条带，与理论值相符，与 Genbank 标准序列对比显示，扩增片段大小及测序结果均完全正确。证实患者感染三日疟原虫。结论利用小亚单位核糖体核糖核酸基因片段三日疟种特异引物进行扩增可以用于诊断三日疟原虫感染。
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湖北地区须毛癣菌复合体的分子鉴定
目的：对分离自患者不同部位的须毛癣菌临床株进行种内分型研究，比较不同靶位对须毛癣菌复合体的鉴定效能。方法选取武汉市第一医院皮肤科近3年临床分离的须毛癣菌48株，经形态学观察和尿素酶试验进行表型鉴定。分别以核糖体DNA（rDNA）的转录间隔区（ITS）和核糖体大亚基（28S rDNA）D1?D2区为靶位，PCR扩增ITS区和D1?D2区后对产物进行测序，联合应用Clustal X2和MEGA 6.0软件，采用大似然度法进行序列分析并建立遗传进化树。结果 ITS树提示，受试菌株和趾间毛癣菌聚类在同一主支的概率为92%，D1?D2树无法有效区分癣毛癣菌昆克变种和趾间毛癣菌。趾间毛癣菌形态多变，可表现为羊毛型、绒毛型、乳皮型、粉末型和颗粒型。结论 ITS区可将须毛癣菌鉴定到种水平，其鉴定效能优于D1?D2区，形态学方法不能作为其种内鉴定的依据。
