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套式PCR扩增SSU rDNA特定片段检测云南金平县疟原虫感染的研究
目的采用套式PCR系统诊断、鉴别人体疟原虫感染. 方法采用已建立的套式PCR系统扩增SSU rDNA特定片段检测云南金平县恶性疟镜检阳性患者的6份血样,并设阳性与阴性对照. 结果间日疟原虫、恶性疟原虫和三日疟原虫感染血样中分别扩增出104 bp、102 bp和115 bp预期大小的特定扩增带.正常人血、人源弓形虫、杜氏利什曼原虫DNA及灭菌双蒸水均未产生特异扩增带.6份血样中检出4份P.v.、P.f.和P.m.的混合感染,1份P.v.和P.f.及1份P.f.和P.m.的混合感染. 结论该系统特异、灵敏、稳定,在诊断疟疾的同时可准确地判定混合感染,对疟疾的诊断、大规模流行病学研究及疫情监控等具有实际应用价值.
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套式聚合酶链式反应诊断三日疟原虫感染的临床应用
目的：应用套式聚合酶链式反应（PCR）扩增小亚单位核糖体核糖核酸（SSUrRNA）基因诊断三日疟原虫感染，以减少三日疟的漏诊和误诊。方法分别提取可疑三日疟患者抗凝血 DNA和对照间日疟、恶性疟患者抗凝血 DNA，以此为模板，用疟原虫属特异性引物进行第一轮扩增；然后以第一轮扩增产物为模板，用4种疟疾的种特异性引物进行第二轮扩增，比较扩增出的18 SSU rRNA基因片段的大小，并对目的片段进行测序鉴定。结果经属特异性引物 PCR 扩增后，3个样本均出现大小约为1200bp 的条带。经种特异性引物 PCR 扩增后，间日疟及恶性疟确诊样本均扩增出相应的120bp 和205bp 特异性条带；可疑患者样本仅在用三日疟原虫种特异性作引物时扩增出144bp 特异条带，与理论值相符，与 Genbank 标准序列对比显示，扩增片段大小及测序结果均完全正确。证实患者感染三日疟原虫。结论利用小亚单位核糖体核糖核酸基因片段三日疟种特异引物进行扩增可以用于诊断三日疟原虫感染。
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一例长潜伏期三日疟病例的诊断与治疗分析
目的 探讨和分析长潜伏期三日疟病例的诊断和治疗.方法 采用现场流行病学调查方法和实验室镜检及PCR基因检测方法对1例三日疟病例进行诊断,并采取氯喹和伯氨喹“8d治疗方法”.结果 90年代患者与其大儿子在珠海市金鼎区开发区上栅同居住,约1994年该地区曾暴发疟疾(类型不详),期间患者大儿子曾出现疟疾相关症状并经抽血检测后被诊断为疟疾,经治疗后痊愈.患者于2013年7月首次发作,近1年来,患者反复发作,间隔2～3d发作1次,出现发热、寒战和贫血等症状,2014年8月22日初步诊断为疟疾并住院治疗.镜检血涂片可见典型的三日疟原虫形态,PCR基因检测结果扩增出三日疟的特异性条带,确诊为三日疟.给予正规和足量的氯喹和伯氨喹治疗,痊愈出院.结论 该例患者可能是1例潜伏期超过20年的三日疟病例.
