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p65和nm23-H1在喉癌中的表达及意义
目的 探讨p65和nm23-H1蛋白在喉癌组织中的表达及临床意义.方法 在正常喉黏膜组织11例、喉癌40例患者的标本中,用免疫组织化学二步法检测p65和nm23-H1蛋白的表达,并将结果进行相关分析.结果 p65在喉癌组织中的表达比正常喉黏膜组织的表达高,差异有统计学意义(P<0.01);nm23-H1蛋白在淋巴结转移癌组织中的表达比正常喉黏膜组织中的表达低,差异有统计学意义(P>0.05);nm23-H1蛋白在喉癌高和中分化组比低分化组阳性表达高,差异有统计学意义(P<0.01);伴有淋巴结转移的喉癌组织比无淋巴结转移的喉癌组织nm23-H1蛋白阳性表达低,差异有统计学意义(P<0.01);喉癌中p65与nm23-H1蛋白的表达未发现相关性(P>0.05)..结论 p65在喉癌组织中表达上调,提示可能通过抑制喉癌细胞凋亡,对喉癌的发生和发展起重要促进作用;nm23-H1蛋白在伴转移的喉癌组织和淋巴结转移癌组织中的表达降低,提示nm23基因参与喉癌的浸润和转移.
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nm3-H1、E-cad及D2-40在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中表达的意义
目的 研究抑癌基因nm23-H1与细胞黏附相关的E-cad及微淋巴管标记物D2-40在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中的表达,以探讨其意义.方法 用免疫组化法检测nm23-H1、E-cad和D2-40在不同病理类型鼻腔鼻窦恶性肿瘤中的表达,并深入研究在鼻腔鼻窦恶性肿瘤、癌旁组织及对照组中的表达.结果 E-cad在鼻腔鼻窦恶性上皮肿瘤和恶性软组织肿瘤中的表达存在统计学差异(P＜0.01).nm23-H1和D2-40在恶性鼻腔鼻窦上皮源性和软组织源性肿瘤的表达无统计学差异(P＞0.05).nm23-H1在鼻腔鼻窦恶性肿瘤、癌旁和对照组中的表达存在统计学差异(P＜0.01),而D2-40的表达无统计学差异(P＞0.05).结论 E-cad与鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发生密切相关,但在不同病理类型组织中可能以不同的机制发挥作用.抑癌基因rim23一H1在鼻腔鼻窦的良恶性肿瘤的发生过程中均发挥作用,而微淋巴管在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中不发挥作用,这将为鼻腔鼻窦恶性肿瘤的病因学研究提供依据.
关键词： NM23核苷二磷酸激酶类 鼻窦肿瘤 E-Cad D2-40 -
蛋白质组学技术在髓系白血病分化研究及白血病早期诊断中的应用
目的 探讨白血病细胞粒细胞系、单核细胞系两系分化的蛋白质组学研究,分析差异表达蛋白质在白血病筛查中的应用价值.方法 利用ATRA和甾体类新药(编号:NSC67657)诱导髓系白血病HL60细胞,构建白血病细胞粒细胞系和单核细胞系分化模型.采用双向电泳技术,分离HL60细胞向粒细胞系、单细胞系分化前后差异表达蛋白质分子,经MALDI-TOF MS鉴定.对EF1A1、TLE1、NME3这3个差异表达蛋白质分子进行RT-PCR和WB验证.收集临床5例白血病患者和1名健康人的骨髓标本,研究3个差异表达蛋白质分子在白血病患者骨髓细胞中的表达情况.结果 WB分析发现细胞分化前后NME3蛋白质表达下降(对照组A=0.227,NSC67657处理组A=0.079,ATRA处理组A=0.064,2种药物处理组与对照组比较差异有统计学意义,P均＜0.01).在4份白血病患者标本中NME3表达水平高于健康人骨髓标本(健康人A=0.082,2例慢性粒细胞白血病急变期患者A=0.274、0.269,急性单核细胞白血病患者A=0.297,1例慢性粒细胞性白血病患者A=0.258,与健康人比较差异有统计学意义,P均＜0.05).另1例慢性粒细胞白血病患者A=0.121,与健康人比较差异无统计学意义,P＞0.05.结论 蛋白质组学技术从基础研究到临床应用是个阶段性的过程,本研究通过对筛选所得分化相关蛋白质NME3在白血病患者骨髓中的表达分析,为后续蛋白质组学技术在白血病早期诊断中的应用奠定了基础.
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缺血性脑卒中患者血清GFAP、NDKA和PARK7的临床应用价值
目的 探讨血清GFAP、NDKA和PARK7与IS的相关性，及其对IS诊断、预后评估的临床价值。方法用ELISA法检测37例IS患者、28例ICH患者和30名健康人血清GFAP、NDKA和PARK7含量水平，所有患者在发病12 h内、第3、14天除进行上述3项指标检测外，还在相应时间点用MESSS进行神经功能缺损评分，在14 d出院时用Barthel指数(BI)评价其日常生活能力。同时分析3项指标单项检测和联合检测对IS的诊断效能。结果IS组发病12 h内、第3、14天血清GFAP含量分别为(5.49±2.25)、(5.17±2.29)、(5.96±2.39) μg/L，血清NDKA含量分别为9.15(6.28～12.79)、9.13（6.31～12.23）、9.31(6.40～11.83) μg/L，血清PARK7含量分别为(32.71±6.34)、(31.23±6.04)、（32.79±6.94）μg/L；健康对照组血清GFAP、NDKA、PARK7含量分别为(4.62±1.56)、4.24(3.30～5.61)、(14.25±2.65) μg/L。IS组与健康对照组比较，除第3天的GFAP差异无统计学意义(t =1.129,P＞0.05),IS组其余各时间点的3项指标水平分别高于健康对照组（GFAP的t值分别为2.642、1.870，P均＜0.05；NDKA的Z值分别为6.173、6.100、6.278，P均＜0.01；PARK7的t值分别为14.964、15.367、16.060,P均＜0.01）。检测GFAP对IS诊断的特异度和敏感度分别为46.7％ (14/30)和81.1％ (30/37)，NDKA对IS诊断的特异度和敏感度分别为90.0％ (27/30)和78.4％ (29/37)，PARK7对IS诊断的特异度和敏感度分别为96.7％ (29/30)和97.3％ (36/37)；3项标志物联合检测对IS诊断的特异度和敏感度分别为96.7％ (29/30)和100％( 37/37)。此外，IS组GFAP升高的发病风险是健康对照组的1.3倍（OR=1.300，P=0.044）,NDKA升高是1.7倍（0R=1.668,P=0.036）,PARK7则是1.8倍（OR=1.809,P=0.005）。IS患者发病＜12h时GFAP血清含量在IS组和ICH组的差异有统计学意义（t=4.097,P=0.000）；发病不同时间的GFAP、NDKA和PARK7血清含量与MESSS存在不同程度正相关，即IS发病＜12 h时,3者r值分别为0.534、0.482、0.357，P均＜0.05；3d时，3者r值分别为0.433、0.487、0.299，P值分别为0.007、0.002、0.073；14 d时,3者r值分别为0.394、0.200、0.084,P值分别为0.016、0.236、0.620。14 d出院时GFAP、NDKA和PARK7血清含量与BI呈负相关（r值分别为-0.430、-0.321、-0.076，P值分别为0.044、0.050、0.657）。结论血清GFAP、NDKA和PARK7含量与IS密切相关，血清3项指标志升高是IS发病的危险因子，检测3项指标有助于IS的早期诊断，且对患者及时治疗和预后评估有重要意义。
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Quercetin上调Nm23-H1表达抑制肝细胞癌的侵袭转移
目的 研究quercetin和精胺调节Nm23-H1基因表达对肝癌侵袭转移能力的影响.方法RT-PCR和Western blot检测不同浓度和时间quercetin和精胺作用后SF7721细胞Nm23-H1mRNA和蛋白表达,Transwell和细胞黏附实验检测侵袭力和黏附力,并检测骨架蛋白α-tublin以及F-actin的含量以及分布情况;裸鼠移植入肝癌模型腹腔注射相应药物,检测肝癌生长转移及Nm23-H1蛋白表达. 结果 Quercetin浓度及时间梯度处理细胞后Nm23-H1 mRNA(分别F=169.2,215.6,均P＜0.001)、蛋白表达(分别F=3530,2928,均P＜0.001,)以及黏附力(分别F=75.31,88.06,均P ＜0.001)均高于对照组;侵袭力低于对照组(分别F=24.76,58.89,均P＜0.001);骨架蛋白α-tublin及F-actin荧光强度均低于对照组,分布情况无明显变化;精胺浓度及时间梯度处理后各组细胞Nm23-H1 mRNA(分别F=283.1,623.5,均P＜0.001)和蛋白表达(分别F=4 083,171,均P＜0.001)均低于对照组;侵袭力高于对照组(分别F=125.8,48.18,均P＜0,001).Quercetin组、精胺组、对照组肝癌组织体积重量比为:2.07±0.90比6.84±2.15比7.02 ±2.30,三组肺转移率对比为0/8比4/8比5/8,quercetin组及精胺组Nm23-H1蛋白表达水平较对照组分别为上调及下调(P＜0.05).结论 Quercetin可上调肝癌细胞Nm23-H1基因表达,抑制肝癌侵袭转移能力.
关键词： 癌 肝细胞 NM23核苷二磷酸激酶类 肿瘤侵润 -
皮肤恶性黑色素瘤患者瘤组织中MMP-9、Nm23-H1和MTA1蛋白表达水平及临床意义
目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中基质金属蛋白酶(MMP)-9、Nm23-H1和肿瘤转移相关基因蛋白1(MTA-1)表达水平及其临床意义.方法 收集2013年10月-2015年12月收治的CMM 64例存档的蜡块标本作为CMM组,选取同期外科切取的28例皮肤交界痣标本及18例正常皮肤分别作为皮肤交界痣组与正常对照组.检测3组MMP-9、Nm23-H1和MTA-1蛋白的表达水平.结果 MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率高,在皮肤交界痣组及正常对照组中阳性表达率逐渐降低(P ＜0.05);CMM组Nm23-H1蛋白阳性率低于正常对照组及皮肤交界痣组(P＜0.05);MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐升高,有淋巴结转移者阳性表达率高于无淋巴结转移者(P＜0.01);Nm23-H1在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐降低,有淋巴结转移者阳性表达率低于无淋巴结转移者(P＜0.01).结论 MMP-9、Nm23-H1和MTA1的表达水平在一定程度反映了CMM的病情,联合检测MMP-9、Nm23-H1和MTA1表达水平可为临床评估患者病情提供准确资料.
关键词： 癌 皮肤附件 黑色素瘤 基质金属蛋白酶9 NM23核苷二磷酸激酶类 肿瘤转移相关基因蛋白1 -
注射用磷酸肌酸钠对体外培养人卵巢癌细胞SKOV3侵袭能力的影响及其机制
目的:观察注射用磷酸肌酸钠(CP)对人卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭能力的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,随机分为空白对照组(生理盐水)及药物处理组(1、6和12 mmol·L-1CP );分别用生理盐水、CP处理细胞72 h后,采用MTT比色法和Transwell小室法观察细胞黏附和迁移侵袭能力;采用RT-PCR和FCM测定nm23-h1、c-myc mRNA及蛋白表达和MMP-2、MMP-9蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,1 mmol·L-1 CP组各项指标差异无统计学意义(P>0.05);6和12 mmol·L-1 CP组细胞黏附、迁移侵袭抑制率明显增加(P<0.01),nm23-h1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01),c-myc mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01);但6与12 mmol·L-1CP组间比较差异无统计学意义(P>0.05).与空白对照组比较,1、6和12 mmol·L-1CP组MMP-2、MMP-9蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:一定浓度注射用CP可抑制体外培养SKOV3细胞的黏附和迁移侵袭能力,其机制可能与上调nm23-h1、下调c-myc基因表达有关.
