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  • MUC1/Y基因修饰的树突状细胞体外抗卵巢癌效应的研究

    作者:祁澜;孔北华;杨美香;曲迅

    目的研究人MUC1/Y基因转染人外周血树突状细胞(DC)后在体外诱导的特异性抗MUC1/Y+卵巢癌效应. 方法通过人外周血单核细胞诱导DC,采用脂质体法将已构建好的含人MUC1/Y全长cDNA的真核表达载体pEGFP-N1/MUC1/Y转染到DC中,荧光显微镜下观察其表达的蛋白定位;与自体T细胞共培养,观察其致敏的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MUC1/Y+的卵巢癌细胞A2780的杀伤活性,并与转染空载体的DC诱导的CTL进行比较. 结果 pEGFP-N1/MUC1/Y转染DC后,其绿色荧光蛋白主要表达于DC细胞膜上,可诱导出对卵巢癌细胞系A2780特异性的细胞毒性T细胞. 结论 MUC1/Y基因修饰的DC可诱导特异的抗MUC1/Y+卵巢癌效应.

  • 慢性乙型肝炎中医虚实辨证与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系探讨

    作者:冯建英;邵建国;陈琳;张玲燕;吴月平

    目的:通过对虚实不同证型的慢性乙型肝炎患者体内HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及T淋巴细胞亚群及病毒复制水平的检测,探讨慢性乙型肝炎中医虚实辨证分型与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系.方法:抗原特异性CTL及T淋巴细胞亚群采用流式细胞仪检测;HBV病毒学指标由ABBOTT I2000检测;HBVDNA由ABI荧光定量PCR仪完成.结果:(1)虚实两组患者特异性CTL细胞的阳性率存在差异(P<0.05),实证组患者特异性CTL细胞阳性率较虚证组患者高,差异有统计学意义(P<0.05).(2)虚实两组CD3+、CD4+以及CD4+/CD8+值均较正常对照有所下降,其中虚证组患者CD4+、CD4+/CD8+水平下降较正常组明显,有统计学意义(P<0.05),虚实两组之间CD4+水平有显著性差异(p<0.05),但实证组与正常对照组相比,二者无显著性差异(P>0.05),虚实两组患者CD8+水平均高于正常组,虚证组升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05).(3)虚实两组患者病毒复制程度不同,实证组中高病毒载量患者所占比例较大,约为62.2%,虚证组高病毒载量患者所占比例仅为40%,较前者明显减少,虚证组患者病毒复制处于低复制水平,二者有统计学意义(P<0.05).结论:虚实两组患者的外周血特异性CTL细胞阳性率、T淋巴细胞亚群及病毒复制水平存在有统计学差异,可以为指导临床辨证分型提供一定的客观参考价值.

  • 膀胱癌患者术前外周血调节性T细胞及细胞毒性T淋巴细胞表达水平比较

    作者:史佳豪;刘志宏;王俊;邱建新

    目的 分析膀胱癌患者术前外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及CD8+CD28+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的表达水平.方法 选取病理为低级别尿路上皮癌患者43例,高级别尿路上皮癌患者43例,以及未合并感染的肾囊肿患者20例为对照组.采用流式细胞技术检测外周血中CD4+CD25+Treg及CD8+CD28+CTL的表达水平,并探讨其表达与病理分级的关系.结果 低级别和高级别尿路上皮癌患者外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例分别为(6.58±2.93)%和(6.29±3.55)%,较对照组(4.55±2.83)%更高,差异具有统计学意义(P<0.05);低级别和高级别尿路上皮癌患者外周血中CD8+CD28+CTL占淋巴细胞比例分别为(6.57±3.30)%和(6.54±3.46)%,较对照组(8.81±3.78)%更低,差异具有统计学意义(P<0.05).不同病理分级患者组间比较表明,低级别与高级别患者外周血中上述两种T细胞的比例差异无统计学意义(P>0.05).结论 膀胱尿路上皮癌患者外周血中CD4+CD25+Treg的表达增加,而主要的抗肿瘤效应细胞CD8+CD28+CTL表达降低,通过调节上述两类T细胞的表达水平,有望成为膀胱癌免疫治疗的新方向.

  • CTL表位预测的研究进展

    作者:汤旭东;房殿春;万瑛;杨仕明

    细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位是抗原蛋白中经抗原提呈细胞(APCs)处理,与MHC-Ⅰ类分子结合并共同被T细胞抗原受体(TCR)特异性识别从而诱导相应的CTL克隆产生免疫应答的短肽.

  • CTL表位多肽疫苗抗肿瘤研究进展

    作者:陈婷;汤旭东;万瑛;房殿春;杨仕明

    以肿瘤的免疫治疗为主的肿瘤生物治疗是目前临床治疗恶性肿瘤继手术、放、化疗之后的第4种模式[1],它既可以独立地治疗肿瘤,又可与手术及放、化疗结合,具有疗效高、特异性强、副作用小等优点,尤其对于中晚期已经发生转移的恶性肿瘤而言,它具有独到的治疗作用,近年来越来越受到人们的关注.

  • 利用流式细胞术测定CTL活性方法在EIAV免疫学中的应用

    作者:童骁;沈弢;梁华;孟庆来;钟卫洲;马燕;魏丽丽;相文华;沈荣显;徐建青;张晓燕;邵一鸣

    利用PKH 26和CFSE两种荧光染料对靶细胞染色,建立了一种通过流式细胞术进行马传染性贫血症病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应的新方法,避免了经典的Cr51释放法对检测人员的放射线威胁,降低了本底释放,提高了检测的灵敏度.将该检测方法用于检测EIAV疫苗毒接种马和嵌合克隆接种马的细胞免疫反应变化趋势,数据显示细胞免疫反应在接种后3个月达到成熟阶段而后保持在较高的反应水平.该方法的成功建立和应用为研究EIAV减毒疫苗的免疫机制提供了好的研究手段,也为其他病毒的免疫学研究提供了新的参考方法.

  • 表达US3基因腺病毒载体下调CTL和NK细胞对其转染肝细胞杀伤活性的影响

    作者:王鹏;李玲;阚全程;潘雪;余祖江;张振香;冯婷

    目的 研究表达US3基因重组腺病毒载体对其转染肝细胞介导的免疫逃逸活性.方法 首先构建表达US3基因腺病毒载体,扩增纯化后转染HL-7702肝细胞,利用细胞毒性T细胞(CTL)杀伤实验和自然杀伤细胞(NK)杀伤实验,检测表达US3基因重组腺病毒载体的免疫活性.结果 表达US3基因的重组腺病毒r-US3成功构建,r-US3能够明显降低CTL和NK细胞对转染肝细胞的杀伤活性.结论 表达US3基因腺病毒载体在一定程度上能够介导转染肝细胞的免疫逃逸,降低机体免疫系统对转染肝细胞的排斥反应.

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