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以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗细胞膜DNA抗体在系统性红斑狼疮中的诊断价值
目的 比较以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗细胞膜DNA抗体(抗cmDNA抗体)在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值.方法 分别以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物,用间接免疫荧光法(IIF)检测306例SLE患者、192例疾病对照组患者、50例健康对照组血清中的抗cmDNA抗体.结果 以人B淋巴细胞株Raji为底物检测抗cmDNA抗体在306例SLE患者中阳性率为72.5%.而在脊柱关节病、类风湿关节炎、原发干燥综合征和其他结缔组织病中的阳性率分别为5.8%、10.0%、13.3%、15.0%.以人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗cmDNA抗体在306例SLE患者中阳性率为76.1%.而在脊柱关节病、类风湿关节炎、原发干燥综合征和其他结缔组织病中的阳性率分别为9.6%、11.1%、20.0%、22.5%.两种细胞为底物检测抗cmDNA抗体在健康对照组中阳性率均为0.抗cmDNA抗体阳性率在SLE组明显高于疾病对照组及健康对照组(P<0.01).以Raji及HL60两种细胞株为底物检测SLE患者抗cmDNA抗体,敏感性分别为72.5%和76.1%,特异性分别为91.7%和86.8%,差异均无统计学意义(P>0.05).Raji及HL60细胞培养、冻存及复苏方法相似,但Raji细胞较HL60细胞更易复苏.在荧光显微镜下观察,Raji细胞比HL60细胞表达效果更好.结论 抗cmDNA抗体是一种诊断阳性率较高的SLE血清学标记物之一.选择Raji细胞株为底物检测SLE患者的抗cmDNA抗体较HL60细胞株更有优势.
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高三尖杉酯碱诱导白血病细胞凋亡与人端粒酶逆转录酶及端粒酶的关系
目的研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导白血病细胞凋亡与细胞端粒酶和端粒酶逆转录酶(hTERT)水平的关系.方法在体外,以HL60细胞株细胞为对象,采用半定量RT-PCR法检测hTERT mRNA表达量;采用端粒重复序列扩增法(TRAP)-酶联免疫吸附试验(ELISA)检测端粒酶活性;采用TUNEL法检测凋亡细胞.结果与空白对照相比,HHT能够下调hTERT mRNA的表达.HHT浓度为0.005～0.030 μg/ml时,HL60细胞hTERT mRNA表达无明显变化;当浓度增至0.040～0.050 μg/ml,hTERT mRNA表达量下降至检测不出.0.020μ.g/ml HHT作用18 h后,hTERT mRNA表达呈下降趋势,24 h后端粒酶活性明显下降,两者的下降趋势基本相似,但hTERT mRNA表达下降幅度较端粒酶活性下降幅度更大.在HHT作用下,HL60细胞凋亡率增加,而端粒酶活性及hTERT mRNA水平下降,且与HHT浓度或作用时间相关.结论HHT下调端粒酶活性可能与hTERT mRNA转录水平下降有关.通过下降hTERT mRNA转录和端粒酶活性可能是HHT诱导HL60细胞凋亡的原因之一.
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雷藤甲素和亚硒酸钠对人白血病细胞系HL60生长抑制作用的协同效应
目的针对雷藤甲素治疗宽度窄的缺点,探讨与亚硒酸钠联合用药以减低雷藤甲素剂量的可能性.方法以MTT试验观察不同浓度雷藤甲素、亚硒酸钠单独或组合对HL60细胞的生长抑制作用,以基于中效原理的药物量效作用分析软件分析协同、相加、拮抗作用.CI＜1时为协同,=1时为相加,>1时为拮抗.结果半数(18/36)组合呈现协同效应,其中7个生长抑制率>70%.含雷藤甲素100nmol.L-1或含亚硒酸钠100μmol.L-1的所有组合CI均＜1.结论提示在该两药联合用药方案中减低雷藤甲素的剂量而仍保持原水平疗效的可能性是存在的,值得进一步研究.
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一磺基酞菁锌的合成和分离及对HL60细胞光敏杀伤的研究
目的合成和分离一磺基酞菁锌(ZnPcS),并研究其对体外培养人急性白血病细胞(HL60细胞株)的光敏杀伤效应.方法采用高效液相色谱法分离纯化ZnPcS,以HL60细胞经药物作用48h红光照射5min后测定ZnPcS对HL60细胞的杀伤作用.结果 ZnPcS浓度<20μg/ml对HL60细胞没有明显暗毒性,在红光照射下,10～20μg/mlZnPcS在体外能显著杀伤HL60细胞,并呈剂量的依赖性.结论 ZnPcS对HL60细胞表现出很强的光敏杀伤作用,其作用机理可能是ZnPcS与细胞原生质膜相互作用产生高浓度单线态氧(1O2),引起细胞生物分子产生过氧化反应.
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斑蝥素对白血病HL60细胞株hTERT mRNA表达及启动子甲基化的影响
目的:研究斑蝥素对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的影响及启动子甲基化的作用及其机制.方法:采用MTT法证实斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的确切作用;采用RT-PCR半定量法检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株端粒酶逆转录酶mRNA的表达情况的影响;利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)的方法,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行聚合酶链反应(PCR),检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株hTERT启动子甲基化作用情况.结果:斑蝥素可抑制HL60细胞增殖,具有明显的时间和剂量效应:中剂量斑蝥素组、高剂量斑蝥素组均能降低hTERT mRNA的相对表达量;高剂量组hTERT mRNA的相对表达量低于中剂量组(P＜0.01);各组hTERT启动子均处于甲基化状态.结论:斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的作用与其下调hTERT mRNA的表达有关.
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Serrin B和Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株的毒性作用
目的 探讨天然药物Serrin B和Nodosin对人早幼粒白血病细胞株HL60、人胃腺癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株LOVO、人胶质瘤细胞株U87、人肺腺癌细胞株AGZY的毒性作用.方法 将对数期生长的HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株接种于96孔板中,细胞贴壁后,分别加入Serrin B或Nodosin,使药物的终浓度分别为0.00、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μmol·L-1,24 h后用四甲基偶氮唑盐法检测细胞株的死亡率.结果 Serrin B对HL60、SGC7901、LOVO、U87和AGZY细胞株均有较强的毒性作用(P＜0.01),且其毒性作用呈现剂量-效应关系.Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87细胞株具有较强的毒性作用(P＜0.05,P＜0.01),而对AGZY细胞株无明显毒性作用.结论 Serrin B和Nodosin是中药溪黄草抗癌作用的有效成分,为人类多种肿瘤治疗的新药研究开发提供新的思路.
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雷公藤内酯醇对HL60细胞增殖周期调控的实验研究
目的:探讨雷公藤内酯醇对HL60细胞体外抗癌作用及其机制.方法:选用HL60细胞株,运用细胞培养、MTT法、流式细胞仪研究不同浓度雷公藤内酯醇对其增殖及细胞DNA含量分布的影响.结果:雷公藤内酯醇对HL60细胞具有明显的增殖抑制作用,呈时间与剂量依赖性,且细胞周期被阻滞于G1/S期,具有上调细胞G1/S检测点的能力.结论:雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力,能干扰HL60细胞G1/S检测点的转换.
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O-甲基芒籽碱对人肿瘤GLC-82、HL60细胞抑制的影响
目的 观察O-甲基芒籽碱抗肿瘤的效果.方法 以MTT法观察不同浓度O-甲基芒籽碱对人肿瘤GLC-82、HL60细胞抑制的影响.结果 10、100和1 000μmol/L O-甲基芒籽碱能抑制GLC-82细胞的增殖,其D值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);0.1、1、10、100和1 000μmol/L O-甲基芒籽碱能抑制HL60细胞的增殖,其D值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01).O-甲基芒籽碱对GLC-82,HL60的半数抑制浓度分别为83.31、65.59μmol/L.结论 O-甲基芒籽碱可抑制人肿瘤GLC-82、HL60细胞的增殖,具有一定的抑瘤作用.
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TAT-N24穿膜融合多肽对白血病细胞系HL60分化的影响
目的:观察TAT-N24穿膜融合多肽对急性髓系白血病细胞株HL60分化的影响.方法:TAT-N24作用于HL60细胞后,采用流式细胞术检测白血病分化指标CD11b及CD14,并观察HL60细胞经TAT-N24处理后的形态学变化,及BrdU/PI双掺入法测定DNA的合成.结果:HL60细胞在TAT-N24处理后,CD11b和CD14表达增高,且增高的趋势呈现TAT-N24浓度依赖性,同时形态学观察呈分化趋势,而且TAT-N24可以协同全反式维甲酸,增强其促进分化的作用.与此同时,BrdU/PI双掺入法显示TAT-N24使HL60细胞的增殖发生抑制.结论:TAT-N24穿膜融合多肽可促进急性髓系白血病细胞株HL60的分化,抑制其增殖,联合应用TAT-N24和全反式维甲酸具有明显的协同作用;TAT-N24有望被开发为有效的白血病分化治疗药物.
关键词： 白血病 TAT-N24穿膜融合多肽 HL60细胞株 分化 全反式维甲酸 -
氧代克斑宁对人肿瘤细胞GLC-82、HL60增殖的影响
目的:探讨氧代克斑宁抗肿瘤作用.方法:以MTT法观察氧代克斑宁在不同浓度下对人肿瘤GLC-82、HL60细胞增殖的影响.结果:氧代克斑宁在1001.tM浓度时对肺腺癌GLC-82细胞株具有明显抑制作用,而对人白血病HL60细胞株在1μM浓度时即显示极强的抑制作用.氧代克斑宁对GLC-82,HL60的IC50分别为109.17、86.61μM.结论:氧代克斑宁可抑制人肿瘤细胞株GLC-82、HL60增殖.
