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艰难梭菌A毒素致细胞圆缩化和致死活性的相关性研究
艰难梭菌(Clostridium difficile)是人假膜性结肠炎和抗生素相关性腹泻的主要致病因子.其产生A、B两种与疾病有关蛋白毒素,其中由于A毒素具有肠道毒性而被认为是引起疾病的主要致病因子[1].A毒素的相对分子质量(Mr)很大,在未变性的状态下为(520~540)×103,在变性状态下降解为(220~240)×103左右,没有亚基分离.A毒素有肠道毒性、细胞毒性、小鼠致死活性、血球凝集活性、血管通透亢进等生物学活性.A毒素是一种可溶性蛋白,它通过受体介导的内吞作用进入细胞,诱导许多种哺乳动物组织和细胞发生细胞病变效应[1,2].A毒素对细胞的影响非常复杂,对A毒素的细胞毒性研究一般都是以细胞骨架变化引起的细胞形态变化即细胞圆缩化为敏感指标的,但是有报道认为细胞圆缩化后并不一定死亡[3].而国内虽然对艰难梭菌的分离、毒素精制、诊断方法及试剂方面有所研究,但还未对A毒素的细胞毒性展开工作.为此,我们采用非洲绿猴肾细胞Vero、人甲状腺乳头癌细胞TPC-1、人喉癌细胞HEP2、人肺癌细胞A549、人结肠癌细胞SW1116、人肝癌细胞SMMC7721等6种细胞系,探讨了在A毒素致细胞圆缩化和细胞致死活性之间的关系.
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艰难梭菌A毒素对人甲状腺乳头癌细胞系的毒性作用研究
艰难梭菌(Clostridium difficile)A毒素是艰难梭菌引起疾病的主要致病因子,具有肠道毒性、细胞毒性、小鼠致死活性、促血球凝集活性、致血管通透性亢进等生物学活性[1,2].艰难梭菌A毒素对组织和细胞有毒性作用,但其作用机制未完全阐明.目前国内对艰难梭菌A毒素的细胞毒性的研究刚刚起步,我们曾研究过艰难梭菌A毒素对HEP2等6种细胞的毒性作用,其中人甲状腺乳头癌细胞(TPC-1)对A毒素的敏感性较高[3].我们进一步观察A毒素对TPC-1细胞生长、细胞膜损伤、细胞形态和生化特征等方面的影响.
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茶多酚诱导人甲状腺乳头状癌细胞凋亡作用的研究
目的研究茶多酚对人甲状腺乳头状癌细胞的凋亡作用.方法实验组(含茶多酚100μg/ml,200μg/ml,400μg/ml),对照组(含10.00%FBS的RPMI1640)分别培养48 h,采用碘化吡啶染色,流式细胞仪检测凋亡细胞百分比,并于电镜下观察凋亡细胞的形态.结果经茶多酚作用48 h后CGTH W-3细胞凋亡百分比明显增加,对照组凋亡百分比为3.51%,茶多酚100μg/ml组为12.61%,茶多酚200μg/ml组为52.90%,茶多酚400μg/ml组为70.79%(P<0.01).电镜下可见细胞浆空泡变性,染色质浓集,核膜皱缩.结论茶多酚具有诱导人甲状腺乳头癌细胞(CGTH W-3)凋亡的作用,并呈浓度依赖关系.